动物防疫样品采集技术规范

'DB43/426-2009动物防疫样品采集技术规范1　范围本标准规定了动物卫生监督、动物疫情监测样品采集的基本原则、采样前的准备、样品采集的一般程序与要求。本标准适用于我省行政区域内动物卫生监督和动物疫情监测的样品采集工作。2　规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T18635-2002　动物防疫基本术语NY/T541-2002　动物疫病实验室检验采样方法NY/T5344.6-2006　无公害食品产品抽样规范　第6部分：畜禽产品NY/T561-2002　炭疽诊断技术DB43/306-2006　动物防疫监督管理规范《中华人民共和国动物防疫法》（中华人民共和国主席令第71号）《高致病性动物病原微生物菌毒种或者样本运输包装规范》（农业部公告第503号）３　术语和定义下列术语和定义适用于本标准。3.1　动物卫生监督对各项有关动物防疫的法律、法规、标准、措施执行情况进行检查和评价，并依据检查情况按规定进行监督、批评以至处罚。3.2　动物疫情监测对动物疫病的发生、流行、分布及相关因素进行系统的长时间的观察与检测，以把握动物疫病的发生情况和发展趋势。3.3　样品取自动物或环境、拟通过检验反映动物个体、群体或环境有关状况的材料或物品。3.4　抽样单元同一饲养地、同一饲养条件下的动物群体或个体；同一产地、同一批次的动物产品。3.5　病料来自患病或可疑患病动物的被（待）检材料。3.6　采样从动物或环境取得样品的过程。3.7　随机抽样按照随机化的原则（总体中每一个观察单位都有同等的机会被选入到样本中），总体中抽取部分观察单位的过程。7 DB43/426-20093.8　流行率某个时间内，特定地区某病（新老）感染动物数占调查动物总数的百分率。3.9　被动监测动物或动物产品出现异情况、或怀疑有疫病存在，由相关部门作出的针对性监测。3.10　主动监测按照特定目的而制定有针对性的监测方案，并按计划实施的监测。4　样品采集的基本原则4.1　先排除后采样的原则急性死亡的动物，怀疑患有炭疽时，应先进行血液抹片镜检，确定不是炭疽后，方可解剖采样。炭疽动物的样品采集，按NY/T-561的2.1.2执行。4.2　尽早采样的原则采集死亡动物的病料，应于动物死亡后2h以内采集，最迟不得超过6h。4.3　无菌操作的原则采样过程应注意无菌操作，刀、剪、镊子、器皿、注射器、针头等用具应事先消毒，一套器械与容器只能采集一种病料。4.4　合理选择采样方法的原则根据采样的目的、内容和要求合理选择样品采集的种类、数量、部位与抽样方法，抽样时应注意减少和消除影响样品代表性的各种因素，使样品能最大限度地代表总体情况。4.5　生物安全防护的原则采样人员应加强个人防护，严格遵守生物安全操作的相关规定，避免对样品、环境的污染和对采样人员的伤害。5　采样前的准备5.1采样人员采样人员应熟悉动物防疫的有关法律规定，具有一定的专业技术知识，熟练掌握采样工作程序和采样操作技术。一次采样不得少于两人，动物卫生监督采样时至少一人为动物防疫监督员。5.2　器具和试剂5.2.1　器具5.2.1.1　动物检疫器械箱、采样箱、保温箱或保温瓶、解剖刀、剪刀、镊子、酒精灯、酒精棉、碘酒棉、注射器及针头。5.2.1.2　样品容器（如西林瓶、平皿、1.5mL塑料离心管、10mL玻璃离心管及易封口样品袋、塑料包装袋等）。5.2.1.3　试管架、塑料盒（1.5mL小塑料离心管专用）、铝盒、瓶塞、无菌棉拭子、胶布、封口膜、封条、冰袋。5.2.1.4　取样工具和盛样器具应当洁净、干燥，必要时作灭菌处理。5.2.2　试剂根据所采样品的种类和要求，准备不同类型的存放试剂，如PBS缓冲溶液、30%甘油缓冲溶液等。5.3　记录和防护材料采样单、不干胶标签、签字笔、圆珠笔、记号笔、采样单、记录本、口罩、一次性手套、乳胶手套、防护服、防护帽、护目镜、胶靴等。6　样品采集的一般程序与要求7 DB43/426-20096.1采样方法根据采样目的、内容和要求，选择样品采集的种类，具体采样方法参照NY/T541-2002及有关规定执行。6.2　样品的抽取6.2.1　被动监测和动物卫生监督检查时，采样应针对有患病征兆的动物或有明显病变的动物产品，在无法确定病因时，采集的样品应尽量全面。6.2.2　主动监测时，应根据动物年龄、季节、周边疫情情况估计其流行率，确定抽样单元，在抽样单元内遵循随机取样原则，抽样数量应尽量满足统计学要求（参照资料性附录A）。6.2.3　动物产品抽样时，参照NY/T5344.6-2006的4.2、4.3、4.4、4.5及有关规定执行。6.2.4　对具有食用、使用价值的样品，严禁随意扩大抽样的种类和数量。采样数量一般要求见表1。表1　动物产品样品采集数量样品种类采样数量要求肉类50g≤样品量≤200g脏器50g≤样品量≤200g血液2ml≤样品量≤15ml其他视检测需要6.3　样品分割样品抽取后，采样人员在现场将样品分成三份，两份送检，一份留样备查。6.4　记录和标注样品信息详见附录B和附录C，采样单应用钢笔或签字笔逐项填写（一式三份），样品标签和封条应用圆珠笔填写，保温容器外封条应用钢笔或签字笔填写，小塑料离心管上可用记号笔作标记。6.5　样品包装6.5.1　品种和种类不同的样品不应混样,每份样品应仔细分别包装，在样品袋或平皿外面贴上标签，标签注明样品名、样品编号、采样日期等。6.5.2　存放样品的包装袋、塑料盒及铝盒应外贴封条，封条上应有采样人签章，并注明贴封日期，标注放置方向，切勿倒置。6.5.3　高致病性动物病原微生物样品运输包装参照《高致病性动物病原微生物菌毒种或者样本运输包装规范》执行。6.6　样品保存和运送6.6.1　包装好的样品应置于保温容器中运输，保温容器应密封，防止渗漏。一般使用保温箱或保温瓶，保温容器外贴封条，封条有贴封人（单位）签字（盖章），并注明贴封日期。6.6.2　一般情况下，样品应在特定温度（2～6）℃下运输，血清样品、拭子样品和组织样品可先作暂时的冷藏或冷冻处理，然后在保温箱内加冰袋冷藏运输。6.6.3　样品包装后应以最快最直接的途径送往实验室。样品到达实验室后，若暂时不处理，应冷冻（以-70℃或以下为宜）保存，不宜反复冻融。。7 DB43/426-2009附录A（资料性附录）抽样数量参照表A.1　使监测结果有95%的可信度时的样品采集数量见表A.1。表A.1　使监测结果有95%的可信度时的样品采集数量种群数量流行率0.10%1%2%5%10%15%20%25%30%40%50%20202020191612109764303030302619141198644040404031211512108655050504635221612108656060605538231612108657070706240241713108658080796842241713108659090877343251713108651001009678452517131096520020015510551271813119655005002251295628181411965100095025813857291914119651000025882941485929191411965infinite29952991495929191411965A.2　使监测结果有99%的可信度时的样品采集数量见表A.2。表A.2　使监测结果有99%的可信度时的样品采集数量种群数量流行率0.10%1%2%5%10%15%20%25%30%40%50%202020202018151311108630303030302319151211874040404036272116141197505050504229221714129760606058473123181512977070706851332318151297808080765434241915129790909083573525191513971001001009059362519151397200200180136734027201613975005003001838342282116139710009903682048643282116139710000368944822690442921161397infinite4603459228904429211613977 DB43/426-2009附录B（规范性附录）动物疫情监测/动物卫生监督动物采样单B.1　动物疫情监测/动物卫生监督动物采样单见表B.1。表B.1　动物疫情监测/动物卫生监督动物采样单№：　　　　　　　共　　页第　　页场名或畜（禽）主动物代次（划√）□祖代□父母代□商品代通讯地址邮编联系人电话传真栋号样品名称品种日龄存养量采样数量编号起止既往病史及免疫情况临床症状和病理变化备注采样单位单位名称联系人通讯地址邮编联系电话传真本次抽样始终在本人陪同下完成，上述记录经核实无误，承认以上各项记录的合法性。被采样单位盖章或负责人签名年月日本次抽样已按要求及产品标准执行完毕，样品经双方人员共同封样，并做记录如上。抽样人1：抽样人2：年月日注：此单一式三份，第一联采样单位保存，第二联随样品，第三联由被采样单位保存。“编号起止”统一用阿拉伯数字1、2、3、…表示，各场保存原动物编号。7 DB43/426-20097 DB43/426-2009附录C（规范性附录）动物疫情监测/动物卫生监督动物产品采样单C.1　动物疫情监测/动物卫生监督动物产品采样单见表C.1。表C.1　动物疫情监测/动物卫生监督动物产品采样单№：　　　　　　　共　　页第　　页动物产品货主种类及商标通讯地址邮编联系人电话传真包装有无标识有无抽样场所样品名称品种批次存量采样数量生产日期编号起止动物产品描述是否有病变情况采样单位单位名称联系人通讯地址邮编联系电话传真本次抽样始终在本人陪同下完成，上述记录经核实无误，承认以上各项记录的合法性。被采样单位盖章或负责人签名年月日本次抽样已按要求及产品标准执行完毕，样品经双方人员共同封样，并做记录如上。抽样人1：抽样人2：年月日注：此单一式三份，第一联采样单位保存，第二联随样品，第三联由被采样单位保存。“编号起止”统一用阿拉伯数字1、2、3、…表示，各场保存原动物产品编号。备注：“动物产品描述”应包括产品来源、是否有检疫证明、检疫证明号码、检疫单位等相关内容。7 DB43/426-20097'