nyt405-2000 脱毒大蒜种蒜(苗)病毒检测技术规程

'B15N丫中华人民共和国农业行业标准NY/T405-2000脱毒大蒜种蒜(苗)病毒检测技术规程Rulesforvirusdetectionofvirus-freeseed(seedling)garlic2000一09一22发布2000一12一01实施中华人民共和国农业部发布 NY/T405-2000前言为了有效地实施对脱毒大蒜种蒜质量检验和管理，规范脱毒大蒜种蒜市场，促进大蒜脱毒技术的推广，实现脱毒大蒜种蒜(苗)病毒检测的规范化、标准化，特制定本规程。本规程在参照国内外大蒜病毒检测技术最新研究进展的基础上，结合当前国内生产实际，力求达到快速、准确、可操作性强的检测要求。检测对象主要选择生产上发生分布范围广、危害性大的病毒。检测方法主要采用双抗体夹心酶联免疫吸附检测方法。本规程内容包括脱毒大蒜种蒜(苗)检测的适用范围、检测对象、抽样方法、检测方法和质量要求。本标准由中华人民共和国农业部提出。本标准主要起草单位:农业部植物脱毒种苗质量监督检验测试中心(济南)、山东省植物保护总站。本标准主要起草人:李明立、孙作文、杨勤民、刘敬东、商明清、卢增全。 中华人民共和国农业行业标准NY/T405-2000脱毒大蒜种蒜(苗)病毒检测技术规程Rulesforvirusdetectionofvirus-freeseed(seedling)garlic1范围本标准规定了脱毒大蒜种蒜(苗)的病毒检测方法和操作规程。本标准适用于脱毒大蒜种蒜(苗)的病毒检测。2引用标准下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时，所示版本均为有效。所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。NY/T401-200。脱毒马铃薯种薯(苗)病毒检测技术规程3定义本标准采用下列定义。3.1脱毒苗应用茎尖组织培养技术获得的再生试管苗，经检测确认不带洋葱黄矮病毒(OYDV)、大蒜普通潜隐病毒(GCLV)，才确认是脱毒苗。3.2脱毒种蒜从繁殖脱毒苗开始，经逐代繁殖增加种蒜数量的种蒜生产体系生产出来的。分原原种、原种、生产用种三个级别。3.2.1原原种pre-elite用脱毒苗在防虫网室、温室条件下生产出的符合质量标准的种蒜。3.2.2原种elite用原原种作种蒜，在良好隔离条件下生产出的符合质量标准的种蒜。3.2.3生产用种certifiedseed用原种作种蒜，在隔离条件下生产出的符合质量标准的种蒜。3.3病毒病株允许率脱毒种蒜繁殖田中病毒病株的允许比率。4检测对象洋葱黄矮病毒(Onionyellowdwarfvirus,OYDV);大蒜普通潜隐病毒(Garliccommonlatentvirus,GCLV),5抽样引51组培苗抽样脱毒核心材料:每株必须检测。中华人民共和国农业部2000一09一22批准2000一12一01实施; NY/T405-20005.1.2扩繁苗:随机抽取1%-2%的扩繁苗检测。5.2田间抽样5.2.1原原种和原种抽样:大蒜生长前、中、后期，在目测全田的基础上一，~采‘一用、五~点取样法，抽样数量为0.1hm，以下200株;。11-1hm"5o0株;超出1hm"面积，划出另一检验区，按本规程规定面积取样。每株取叶片1一5g，低温保湿存放待检。5.2.2生产用种抽样:抽鳌前一周，在目测全田的基础上，采用随机取样法，0.1hm，以下检验2点，每点100株;0.11^-1hm，检验5点，每点100株;1.1-5hm"检验10点，每点100株;超出5hm"面积，划出另一检验区，按本规程规定的面积取样。取样方法及样品保存同5.2.1,5.3商品种蒜抽样没有经过田间检验的商品种蒜必须进行鳞茎检验。5.3.1根据种蒜不同存放方式，采用分层设点或随机取样的方法，抽样数量见表1,表1种蒜抽样数量标准表种蒜总量，kg抽样百分率，%抽样最低数量,kg(100006^-10100>100003-5注:不足抽样最低数量的全部作为混合样品。5.3.2将第一次抽取的样品混合后进行二次抽样，随机抽取10%的混合样品检测。6检测方法双抗体夹心酶联免疫吸附检测法(DAS-ELISA)按NY/T401-200。中附录A的方法执行。7质f要求凡酶联免疫检测呈阳性反应的为带毒种蒜。原原种:病毒病株允许率为。。原种:病毒病株允许率Sz00o生产用种:病毒病株允许率(1o%.'