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燕郊高新区生物公共技术服务平台项目建设项目环境影响报告表

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'建设项目环境影响报告表(试行)项目名称:燕郊高新区生物公共技术服务平台项目建设单位(盖章):河北蓝梦生物医药科技有限公司编制日期:2015年5月国家环境保护总局制 《建设项目环境影响报告表》编制说明《建设项目环境影响报告表》由具有从事环境影响评价工作资质的单位编制。1.项目名称——指项目立项批复时的名称,应不超过30个字(两个英文字段作一个汉字)。2.建设地点——指项目所在地详细地址,公路、铁路应填写起止地点。3.行业类别——按国标填写。4.总投资——指项目投资总额。5.主要环境保护目标——指项目区周围一定范围内集中居民住宅区、学校、医院、保护文物、风景名胜区、水源地和生态敏感点等,应尽可能给出保护目标、性质、规模和距厂界距离等。6.结论与建议——给出本项目清洁生产、达标排放和总量控制的分析结论,确定污染防治措施的有效性,说明本项目对环境造成的影响,给出建设项目环境可行性的明确结论。同时提出减少环境影响的其他建议。7.预审意见——由行业主管部门填写答复意见,无主管部门项目,可不填。8.审批意见——由负责审批该项目的环境保护行政主管部门批复。1 建设项目基本情况项目名称燕郊高新区生物公共技术服务平台项目建设单位河北蓝梦生物医药科技有限公司法人代表李文娴联系人李晓通讯地址燕郊高新区创业大厦B-407室联系电话13933935718传真邮政编码065201建设地点燕郊高新区创业大厦B401~403、405、406立项审批部门燕郊高新区管理委员会批准文号燕区经备字[2015]16号行业类别建设性质新建√改扩建□技改□质检技术服务M7450及代码占地面积绿化面积458--(平方米)(平方米)环保投资总投资其中:环保120025占总投资2.1%(万元)投资(万元)比例评价经费预期投产日期2016月3月(万元)工程内容及规模:1.工程概况1.1一般情况河北蓝梦生物医药科技有限公司是一家专门从事生物实验技术服务、试剂研发的科技型企业,同时也作为河北省燕郊高新区生物公共技术服务平台和“e生物圈”生物技术外包联盟实验基地。公司服务内容涉及科研服务(肿瘤,心血管,骨科,自噬,miRNA,LncRNA,线粒体)、分子生物学(质粒库,慢病毒CDNA库,分子克隆,慢病毒,腺病毒等)、细胞生物学(细胞库,细胞功能学实验,稳转株构建等)、试剂研发(细胞转染试剂,支原体药物,慢病毒试剂盒,腺病毒试剂盒,基因敲除试剂盒,LC3-GFP-RFP等)等领域,服务客户包括:中国科学院生物物理研究所、北京大学人民医院、解放军总医院、北京海淀医院等国内知名科研单位、医疗机构。主要为上述单位硕博研究生提供全面的专业的实验技术研发及实践服务,包括实验场所、设备、技术指导等。本生物公共技术服务平台不包括P3、P4生物安全实验室、转基因实验室内容。本项目建设属于中华人民共和国国家发展和改革委员会令第40号《产业结构调整指导目录(2011年本)》(2013年修订)鼓励类第三十一类第6条“分析、试验、测试以及相关技术咨询与研发服务”。项目已取得燕郊高新技术产业开发区管理委员会的河北省固定资产投资项目备案证(燕区经备字[2015]16号),项目的建设符合国家产业政策。该项目建设地点位于燕郊高新区迎宾北路东侧、神威环岛东北角创业大厦内,厂址中心坐1 标:北纬39°57′54″,东经116°48′29″。该项目已取得燕郊高新区住房和规划建设局出具的符合规划证明(详见附件),项目用房具有三河市人民政府城镇房屋确权发证办公室出具的产权证,规划用途为住宅、办公,证号:三河市房权证燕字第038912号。因此,该项目符合燕郊高新区总体规划要求,符合土地供给政策。地理位置及四邻见附图1、2。1.2项目功能设计将通过建立开放式实验室,让更多的生物人通过这个平台创造出更有价值的科研成果,建成后主要有以下运营方案促进中小企业发展、形成产业聚集区:(1)实验室完全对外开放,“E”生物圈的各个小生物公司都可以来实验室完成各自客户的实验任务;从而最短的时间内让生物人才扎根燕郊,形成生物产业链来发展当地经济。同时医药产业公司也可以在平台实现初期的药效评价等检验工作。(2)整合国内生物人才资源,共同开发人类疾病早期诊断试剂,尽到公共服务平台的社会责任。(3)针对各大型医疗机构现在所面临的临床压力大,科研无法完成的现状,我们与各位医生共同合作将国家课题顺利进行,并对其硕博研究生共同培养。(4)针对国内各大院校生物学或基础医学本科生的现状,每年推出为期三个月的基础实验培训,达到上岗要求促进就业。对于有创业需求的大学生,我们联合燕郊高新区创业中心共同实施一揽子解决方案,完成国家的“大众创业,万众创新”号召。平台的主要任务是解决生物医药研发门槛高,单一企业无法完整解决的问题,同时整合各个生物医药企业优势资源、为中小生物医药公司及高校提供实验检测、验证;实验仪器,设备租赁;实验技术专业人才培养;转让研发成果并提供相关技术咨询和技术服务。1.3职工人数及作业制度本项目劳动定员29人,具体为:管理人员4人,技术职员25人。实行单班制8小时作业,年工作300天,项目区内不设职工餐厅和宿舍。1.4主要设备概况本项目设备选用的原则是先进、节能、环保、高效、适用,均采用国内外先进的生产设备,无《产业结构调整指导目录(2011年本)》(2013年修订)中限制、淘汰类设备,主要生产设备见表1。2 表1主要设备一览表设备单位数量用途1.二氧化碳培养箱台4细胞培养实验2.荧光化学发光凝胶成像系统套1蛋白、核酸凝胶成像及分析3.高速离心机台3样品冷冻高速离心4.实时荧光定量PCR仪台1实时荧光定量PCR实验5.荧光倒置显微镜台1免疫荧光实验6.生物安全柜台1细胞培养实验7.冰箱台6细胞培养实验8.冰柜台2细胞培养实验9.电泳仪台5细胞培养实验10.分光光度计台2蛋白、核酸定量11.搅拌器台3试剂调配12.切片机台2细胞培养实验1.5主要原材料消耗情况本项目主要原材料消耗情况见表2。表2主要原材料消耗一览表序号名称品牌规格单位1组织/细胞蛋白提取试剂盒CWBIO25次瓶2BCA蛋白定量试剂盒TYGENE250T个3SDS-PAGE凝胶制备试剂盒TYGENE30T个430%丙烯酰胺溶液TYGENE500ML瓶5N,N-亚甲双丙烯酰胺Amresco50G瓶6过硫酸铵AMresco100G瓶710%过硫酸铵溶液TYGENE10ML瓶8TEMEDAmresco100ML瓶9TrisAMRESCO100G瓶10甘氨酸NOVON500G瓶111MTris-cl(PH6.8)TYGENE500ML瓶121.5MTris-cl(PH8.8)TYGENE500ML瓶135*Tris-GlycineSDS预混试剂TYGENE1L袋145*Tris-GlycineSDS电泳液TYGENE500ML瓶15溴酚蓝Amresco5G瓶16预染蛋白Marker(10-170KD)Fermentas2*250UL支17考马斯亮蓝R250Amresco10G瓶18考马斯亮蓝G250Amresco10G瓶19考马斯亮蓝快速染色液TYGENE100ML瓶3 20常规考马斯亮蓝洗脱液TYGENE100ML瓶21常规考马斯亮蓝洗脱液TYGENE500ML瓶22电泳用点样吸头20-200ULQSP96支盒23NC膜(0.45um)MILLIPORE20*15CM张24NC膜(0.22um)PALL20*15CM张25NC膜(0.45um)MILLIPORE30M*33CM卷26NC膜(0.22um)PALL30M*30CM卷27PVDF膜(0.45um)MILLIPORE13.5*15CM张28PVDF膜(0.22um)MILLIPORE13.5*15CM张29PVDF膜(0.45um)MILLIPORE3.75M*26.5CM卷30PVDF膜(0.22um)MILLIPORE3.75M*26.5CM卷31滤纸WHATMAN100张盒32甲醇国产500ML瓶3310*转膜缓冲液(不含甲醇)TYGENE500ML瓶34丽春红SAmresco10G瓶35丽春红S染色液(1*)TYGENE100ML瓶36丽春红S染色储存液(10*)TYGENE10ML瓶37脱脂奶粉BD500G瓶38杂交袋国产100张包39WesternBlot封闭液TYGENE100ML瓶40Western一抗稀释液TYGENE100ML瓶41Western二抗稀释液TYGENE100ML瓶4210*TBSTTYGENE500ML瓶4310*TBS预混试剂TYGENE1L袋44Western抗体洗脱液(碱性)TYGENE100ml瓶45Western抗体洗脱液(酸性)TYGENE100ml瓶46X-胶片(5*7)柯达100张盒47Western洗涤液TYGENE500ml瓶48显影粉天津可配1L包49定影粉天津可配1L包50通用显影液TYGENE500ml瓶51通用定影液TYGENE500ml瓶52HRP羊抗鼠二抗ZSBIO100UL支53HRP羊抗兔二抗ZSBIO100UL支54ECL发光试剂盒Thermo50ML瓶55Actin鼠单克隆抗体zsbio100UL支56兔抗GAPDH内参国产100UL支575*7暗盒国产1个个58增感屏国产1套套59TrizolReagentLife100ML瓶4 60RnaTotalKit天根50次/个个61CDNA合成试剂盒Thermo100RXNS个62CDNA合成试剂盒TOYOBO10ul体系*200次个63CDNA合成试剂盒(升级版加强型)TOYOBO10ul体系*200次个64SYBR-GREEN试剂盒TOYOBO200次/个个6510UL盒装无酶吸头AXYGEN96个/盒盒66200UL盒装无酶吸头AXYGEN96个/盒盒671000UL盒装无酶吸头AXYGEN100个/盒盒681.5ML无酶EP管AXYGEN500个/盒盒690.2ML无酶PCR管AXYGEN1000个/盒盒70无水乙醇国产500ML/瓶瓶71氯仿国产500ML/瓶瓶72异丙醇国产500ML/瓶瓶730.2ML八联排管BIORAD125排盒74DEPC处理水(0.1%)TYGENE100ML/瓶瓶75TrizolReagentLife100ML瓶2、主要构筑物情况2该项目位于燕郊高新区创业大厦B栋4层,总办公面积458m。具体内容见表3。表3主要构筑物一览表2序号名称面积(m)门牌号结构类型备注1办公室47.6405框架2细胞培养间55.075406框架3中心实验室111.628401框架4接待室47.6403框架5休息室37.44402框架6楼道等公摊158.6573、配套设施给水:本项目无生产用水,用水主要为员工日常盥洗用水。本项目预计定员29人,年工作日为300天,厂区内设休息室,不设宿舍,食堂,根据《河北省用水定额-生活用水》(DB13/T1161.3-2009),结合项目实际情况,用水量取100L/人·d。用水量为870t/a,由燕郊高新区自来水供水管网提供。项目用水情况详见项目水平衡图。排水:本项目污水为员工生活污水,产生量为696t/a。生活污水经创业大厦隔油池、化粪池处理后,达到《污水综合排放标准》(GB8978—1996)表4中三级标准和燕郊高新区污水处理厂入水水质要求后,排入市政污水管网,最终排入燕郊高新区污水处理厂。5 水量平衡图如下:自来水供水系统0.58/d4.9t/d2.9t/d2.32t/d生活用水隔油池、化粪池2.32t/d2t/d2t/d绿化用水市政污水管网代表挥发和损耗量注:绿化用水冬季、雨季除外单位:t/d图1:拟建项目水量平衡图供暖、制冷:本项目冬季取暖采用燕郊高新区市政热力管网统一供给,夏季采用分体式空调制冷,不新建锅炉。供电工程:本项目用电由燕郊高新区供电局供给,在厂区内接变压器一座,可以保证企业的正常运行。4、厂区平面布置项目总平面布局分为试验区、细胞培养区和办公区、接待区。各功能区对采光、安静程度的要求不同而布置在楼层的不同朝向房间内,各个功能区域相对独立,互不干扰,采光、通风效果好,具有一定的灵活性。整体平面功能布局合理,功能齐全,经济适用,从建筑上、结构上均能满足使用要求。与本项目有关的原有污染情况及主要环境问题:本项目为新建项目,故不存在原有污染问题。6 建设项目所在地自然环境社会环境简况自然环境简况(地形、地貌、地质、气候、气象、水文、植被、生物多样性等):1、地形地貌本区地处燕山山前冲积平原,总的地势北高南低,自北向南倾斜。平均海拔高程5.9~31.9m,地面自然坡降1/1500左右。工程地质条件较好,大部分为黄壤土,少部分为砂壤土。本项目规划范围内用地平坦,适宜建筑。2、气候特征本区属大陆性季风气候,冬春季受西北干冷气流控制,多风少雨雪,气候干燥寒冷,夏季和初秋受东南暖湿气流控制,炎热多雨,全年85%以上的降雨集中在6-9月间。多年平均降水量约628.6mm,多年平均蒸发量2132mm。多年平均气温11.1℃,最高气温40.2℃,最低气温-25.8℃,冰冻期一般为11月中旬至翌年3月中旬,冻土层厚0.77米,无霜期183天,一年四季分明。风向:夏季主导风向为东南、东风;冬季主导风向为西北风。风速:年平均风速2.8m/s,8、9月份风速最小,四月份风速最大(3.7m/s)。相对湿度平均为60%,属比较干燥地区。3、水文燕郊开发区周围地表水主要有潮白河和鲍邱河。潮白河上游由潮河和白河两支流组成,到燕山山地汇成潮白河,是河北省与北京市的界2河,全长434km,总流域面积19354km。潮白河上游建有密云水库、怀柔水库等25座中小型水库,潮白河自苏庄进入三河市,于吴村闸入潮白新河。90年代平均泄流量为1.57—0.953亿m/年。4、水文地质该区位于燕山南麓,浅层地下水以第四系孔隙水为主,含水层主要由潮白河冲洪积松散堆积物质构成,地下水流向为由西北向东南,主要补给来源为大气降水渗入、侧径流补给和深层地下水的顶耗补给。5、生态环境本区原生植被已不存在,现主要是人工植被。只在低洼河和撂荒的重碱地,有野生植物自然组成的群落。人工植被有农田、果树、林地等类型;植物组成有小麦、玉米、棉花、苹果、梨等。本区野生动物有獾、刺猬、兔、黄鼬、野鸭、蛇等,野生植物有蒲公英、马齿草、车前子等。7 社会环境简况(社会经济结构、教育、文化、文物保护等):三河市辖10个镇,395个行政村。行政区总面积643平方公里。2009年年底全市总人口53.05万人,其中农业人口34.01万人,非农业人口19.03人,分别占总人口的64.1%和35.9%。燕郊隶属河北省三河市,位于三河市西部,与北京隔河相望,距北京天安门和首都机场均为30公里。南距天津120公里,东距唐山121公里,是北京、天津、唐山“金三角”经济区域的腹地,地理交通优势极为明显。燕郊经济技术开发区位于三河辖区的西部,是1992年7月成立的河北省省级经济技术开发区,1999年12月被批准为省级高新技术产业园区,2001年又被批准为河北省高新技术产品出口基地、河北省首家软件产业基地和河北省海外留学人员燕郊创业园。按照三河市整2体规划,其商业企业主要在燕郊开发区发展,经过十几年的建设,开发区面积已达45km、人口11万,初步形成了电子、生物制药、绿色食品、新型材料等门类齐全的商业产业体系,成为集科技、生产、旅游、度假、金融、商贸于一体的新兴城市。区内现有中央、省直属单位38家,其中有18所国家级科研机构,8所高等院校。区内还有中等以上医院4所,中小学10所,各类教育科技人才2万余人。通信便捷,拥有河北、北京“6159”局两套程控电话,是全国唯一的跨省电话端局。燕郊开发区日处理能力5万吨的污水处理厂已正式运行,采用的是水解——SBR处理工艺,其中进水水质为COD360mg/L,BOD180mg/L,SS150mg/L,氨氮35mg/L,TP5mg/L;4出水水质为COD100mg/L,BOD30mg/L,SS30mg/L,氨氮25mg/L,类大肠群数1×10个/L,该污水处理厂目前日接收废水量约为2.4万吨,因此,该污水处理厂有能力接收本项目废水,且污水管网现已铺至本项目处。燕郊开发区内居民小区及商业区都已实现燃气管道化。通过现场调查,在评价范围内无珍贵动植物及文物保护单位。8 环境质量状况建设项目所在地区域环境质量现状及主要环境问题(环境空气、地面水、地下水、声环境、生态环境等)本次环评本着充分利用现有资料、加快评价进度,减少评价费用的原则,采用三河市环保局监测站2014年三河市城区常规监测数据为本次评价服务,本次监测资料比较完善,可较好反映项目所在区域的环境质量现状及存在的主要环境问题。1、环境空气质量现状三河市环境监测站2014年常规监测数据及评价结果见表4。表4空气环境监测及评价表单位:ug/m3项目指标标准值第一季度第二季度第三季度第四季度SO215074~10177~11076~12084~14024小时NO28014~1712~1614~1812~16平均浓度范围TSP300160~190160~190150~180140~190由监测结果可知SO2、NO2、TSP的监测值均低于标准值,区域环境空气满足《环境空气质量标准》(GB3095-2012)二级标准(日均值)要求,项目所在区域环境空气质量良好。2、地表水环境质量现状项目附近地表水河流为潮白河,2014年7月24~25日,三河市环境监测站对三河市境内河流断面的常规监测结果如下表。表5地表水水质监测结果汇总表单位:mg/L化学生化河流断面项目pH值氨氮氟化物挥发酚六价铬需氧量需氧量牛府平均值8.076.115.215.111.260.0100.051断面标准指数0.52.5372.53310.0730.8411潮白白庙平均值8.1358.512.19.0321.620.002L0.021河断面标准指数0.5651.952.0176.0211.0800.42IV类标准限值6~93061.51.50.010.05监测结果表明:结果表明潮白河主要污染物COD、BOD、NH3-N、氟化物等多项污染物指标均超过《地表水环境质量标准》(GB3838-2002)IV类水质指标要求。3、地下水环境质量现状地下水质量评价执行《地下水质量标准》(GB/T14848-93)中的Ⅲ类标准。2014年,三河市环境监测站对城区的地下水进行了采样监测,监测项目:pH、氯化物、硫酸盐、氨氮、总硬度、氟化物。监测结果列于表6。9 表6评价区域地下水监测结果汇总表单位:mg/L(pH无量纲)监测结果监测时间pH氯化物硫酸盐氨氮总硬度氟化物7月24日8.05.617.10.025L3360.647月25日8.05.617.10.025L3300.68标准值6.5-8.5≤250≤250≤0.2≤450≤1.0标准指数0.670.02240.068400.733-0.7470.64-0.68备注0.004L为低于检测限数据地下水监测结果表明:评价区域内地下水监测井的pH、氯化物、硫酸盐、氨氮、总硬度、氟化物等六项监测指标均符合《地下水质量标准》(GB/T14848-93)中的Ⅲ类标准,表明地区地下水水质良好。4.声环境环境质量现状本次评价根据项目所涉及环境目标的分布情况,2015年5月7日在厂界四周设置监测点,对环境噪声进行现状监测。环境噪声监测值见表7。表7项目所在地噪声监测值单位:LeqdB(A)噪声监测值噪声标准值监测点昼间夜间昼间夜间厂界东52.543.5厂界南46.040.36050厂界西46.340.8厂界北56.750.1项目所在区域噪声监测点位均符合《声环境质量标准》(GB3096-2008)中的2类标准要求,声环境状况良好。主要环境保护目标(列出名单及保护级别):该项目位于燕郊高新区创业大厦内,距离最近的敏感点为创业大厦内的办公场所。本项目所在区域没有重点文物、自然保护区中和珍稀动植物等重点保护目标。环境要素主要是环境空气质量和声环境质量。表8环境保护对象及保护目标一览表环境保护对象距厂址的距离方向功能保护目标要素(m)《环境空气质量标准》环境空气居住、(GB3095-2012)二级标准创业大厦紧邻紧邻声环境办公《声环境质量标准》(GB3096-2008)表1中2类标准10 评价适用标准环境选用标准标准值单位要素取值年平均日均小时时段TSP0.200.30--《环境空气质量标准》3mg/m空气SO20.060.150.5(GB3095—2012)二级(标态)环境标准NO20.040.080.2质量PM100.070.15--标《声环境质量标准》噪声2类昼间:60夜间:50dB(A)准(GB3096—2008)表1《地表水环境质量标PHCODSSBOD氨氮地表水准》mg/l(GB3838—2002)Ⅳ类6~930—61.5《地下水质量标准》PH氨氮氯化物硫酸盐硝酸盐地下水(GB/T14848-1993)Ⅲmg/l类6.5-8.50.225025020环境选用标准标准值单位要素PHCOD氨氮BODSS《污水综合排放标准》GB8978—1996中三级废水6-9500-300400mg/l燕郊高新区污水处理厂6-936035180150入水水质要求污《工业企业厂界环境噪染噪声声排放标准》GB123482类昼间:60夜间:50dB(A)物—2008表1排(1)生活垃圾处置执行《中华人民共和国固体废物污染环境防治法》(2005.4.1)“第三放标节生活垃圾污染环境的防治”之规定。准(2)固废处置执行《一般工业固体废物贮存、处置场污染控制标准》(GB18599-2001)固废标准及修改单相关规定(环保部公告2013年36号)。(3)危险固废鉴别执行《危险废物鉴别标准》(GB50851~7-2007),临时贮存执行《危险废物贮存污染控制标准》(GB18597-2001)。总本项目建议总量控制指标:量控COD≤0.209t/a,NH3-N≤0.017t/a,SO2≤0t/a,NOx≤0t/a制指标11 建设项目工程分析工艺流程简述(图示):燕郊高新区生物公共技术服务平台项目主要完成蛋白质印迹试验和荧光定量试验。1、westernblot,蛋白质印迹简介:蛋白质印迹法(免疫印迹试验)即WesternBlot。它是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法。其基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色。通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中表达情况的信息。原理:WesternBlot法采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳,被检测物是蛋白质,"探针"是抗体,"显色"用标记的二抗。经过PAGE(聚丙烯酰胺凝胶电泳)分离的蛋白质样品,转移到固相载体(例如硝酸纤维素薄膜)上,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原,与对应的抗体起免疫反应,再与酶或同位素标记的第二抗体起反应,经过底物显色或放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分。试验流程:组织蛋白抽取→蛋白定量→制胶及电泳→转膜→一抗孵育→二抗孵育→曝光(1)组织蛋白抽提预冷组织裂解液,加入蛋白酶抑制剂。称取组织重量,以重量:裂解液=1:9比例加入裂解液,用眼科剪剪碎组织块,用玻璃匀浆器进行匀浆,匀浆时离心管需进入冰水混合物中进行降温。匀浆完成后在冰上孵育20分钟,然后在4℃离心机上离心,转速13000,20分钟。离心完成后取上清,分装保存,待测。此步的目的是为了把组织里的总蛋白分离出来(2)蛋白定量准备蛋白定量工作液A液:B液=50:1,稀释好各个牛血清白蛋白标准品,样品进行稀释。样品:工作液=1:8,混匀后37度静置30分钟,酶标仪570nm波长滤光片读取数值,计算蛋白浓度。此步的目的是通过酶标仪得到总的蛋白浓度(3)制胶及电泳12 ①装电泳槽,凝胶的时候是反着装,装好后放在硅胶板上待用;②将所需试剂按顺序摆好,开始配分离胶;③将配好的分离胶加进去,加到一定高度后用酒精封,等20分钟凝胶;④时间到后,再将积层胶加进去,码平后将小梳子插进去,等20分钟凝胶;⑤配实验所需的电泳液500毫升待用;⑥取出蛋白20微升,使加入样本的蛋白总量一致,加蛋白上样缓冲液5微升,离心;⑦积层胶时间到后,将电泳槽按照正常使用的装好放在槽里,拔下梳子,将电泳液加进去;⑧在梳子齿间的空隙里加入处理好的蛋白,再加入5微升的蛋白标记;⑨开始电泳,电压120伏,时间100分钟;制胶的目的是为了让蛋白有个固相支撑,进入胶内电泳的目的是为了让蛋白按照分子量大小分离开(4)转膜①配制转移缓冲液1升;②在电泳完成后,将胶上有蛋白条带的部分用刀切下来,放在转移液中;在一大玻璃平皿中按照“负极-海绵-三层滤纸-胶-膜-三层滤纸-海绵-正极”的顺序制备“三明治”,每一层都应该彻底排除气泡;3后将“三明治”放入转移电泳槽中,加入转移缓冲液,按照从负极到正极的方向,恒压100伏、100分钟将蛋白转移至硝酸纤维素膜上。转膜完成后关闭电源;4转膜完成后,将膜卸下,根据膜上蛋白标记的条带剪下所需要的目的条带附近的膜;5配制封闭液,将膜浸泡于封闭液中,摇床上,37度封闭1小时;转膜的目的是为了让在胶上的蛋白转到硝酸纤维素膜上(5)一抗孵育1用一抗稀释液稀释一抗;2将膜浸泡于稀释后的抗体溶液中,摇床上,37度放1小时;3一抗孵育完成后,将膜取出;此步的目的是为了让实验所需的一抗跟膜上的蛋白特异性结合(6)二抗孵育1用二抗稀释液稀释二抗;13 2将膜浸泡于稀释的二抗溶液中,摇床上,37度放1小时;3弃去二抗溶液,将膜取出;此步的目的是为了让二抗跟膜上已经结合的一抗特意向结合(7)曝光①配制发光液,取等体积的A、B液,混合到一起,②膜用镊子夹住膜的一角,在滤纸上沥干,将膜面向上平铺于薄膜上,将混合的发光液均匀的加到膜上,保证发光液能覆盖住整个的膜;4室温下反应3分钟,后用透明薄膜包住膜,置于曝光夹内,在暗室内用X胶片进行曝光,经显影、定影、晾干后即可观察和分析条带。此步的目的是为了让膜上的条带映到X胶片上(实际操作等同于照相馆里洗胶卷)2、qPCR,荧光定量简介:荧光定量通过荧光染料或荧光标记的特异性的探针,对PCR产物进行标记跟踪,实时在线监控反应过程,结合相应的软件可以对产物进行分析,计算待测样品模板的初始浓度。原理:荧光定量PCR技术是通过荧光染料或荧光标记的特异性探针,对PCR产物进行标记跟踪,实时监控反应过程。随着PCR反应的进行,反应产物不断累积,荧光信号强度也等比例增加。每经过一个循环,收集一次荧光强度信号,这样就可以通过荧光强度变化监测产物量的变化,结合相应的软件对产物进行分析,可以得到荧光扩增曲线,计算待测样品初始模版的量。实时荧光定量PCR技术是一次由定性技术向定量技术的飞跃,运用该项技术,可以对DNA、RNA样品进行相对定量、绝对定量和定性分析。试验流程:RNA抽取→逆转录→PCR扩增(1)RNA提取①取冻存的组织样品向里面加入裂解液,研磨,随后向匀浆液中加入蛋白酶K,混匀后56℃处理10分钟。②离心机12000转离心5分钟,取上清进行操作。③缓慢加入0.5倍上清体积的无水乙醇,混匀,得到的溶液和沉淀一起转入吸附柱中,12000转离心30秒,弃掉收集管中的废液,将吸附柱放回收集管中。④向吸附柱中加入去蛋白液,12000转离心60秒,弃废液,将吸附柱放回收集管中。14 ⑤配制脱氧核糖核酸酶I工作液。⑥向吸附柱中央加入脱氧核糖核酸酶I,室温放置15分钟。⑦向吸附柱中央加入去蛋白液,12000转离心60秒,弃废液,将吸附柱放回收集管中。⑧向吸附柱中央加入漂洗液,室温放置2分钟,12000转离心60秒,弃废液,将吸附柱放回收集管中。⑨12000转离心2分钟,倒掉废液。将吸附柱置于室温放置数分钟,以彻底晾干吸附材料中残余的漂洗液。⑩将吸附柱转入一个新的塑料离心管中,室温放置2分钟,12000转离心2分钟,得到核糖核酸溶液。此步的目的是将组织里的核糖核酸分离出来。(2)逆转录①取一灭菌的无核糖核酸酶的离心管,每个样本加入如下组分得到混合物1。表9混合物1的成份表内含物用量核糖核酸5微升引物1微升脱氧核糖核苷三磷酸1微升②把混合物1在65℃温浴5分钟,然后立即放冰2分钟。③在混合物1里加入如下成分得到混合物2。表10混合物2的成份表内含物用量逆转录反应体系2微升镁离子4微升二硫苏糖醇2微升核糖核酸酶抑制剂1微升逆转录酶1微升混合物17微升④50℃处理50分钟。⑤85℃处理5分钟。立即放置到冰上。⑥向每混合物2中加入1微升的核糖核酸酶,37℃处理20分钟。此步的目的是将得到的核糖核酸反转录成脱氧核糖核酸。(3)PCR扩增:PCR反应体系加入到PCR机器上的PCR管中,最后机器读出来结果。15 主要污染工序:1.运营期(1)废气:本项目区内不设职工食堂和宿舍,项目试验过程无废气产生,因此,本项目无废气产生。(2)噪声:本项目运行期噪声主要来源为试验设备,如高速离心机的运行噪声,源强65-70dB(A)之间。(3)废水:本项目没有生产废水产生。排放废水主要为职工盥洗污水,产生量为696t/a,废水中主要污染物为COD、氨氮、BOD、SS。(4)固体废弃物:本项目固体废物主要来源于职工的生活垃圾,产生量为4.35t/a;试验过程产生的废培养基0.4t/a和废试剂0.08t/a,以及废包装盒、包装纸箱等0.03t/a。其中废培养基、废试剂属于危险固废。16 项目主要污染产生及预计排放情况内容排放源处理前产生浓度及污染物名称排放浓度及排放量(单位)类型(编号)产生量(单位)水COD300mg/L0.209t/a300mg/L0.209t/a污氨氮25mg/l0.017t/a25mg/l0.017t/a生活用水染BOD180mg/L0.125t/a180mg/L0.125t/a物SS100mg/l0.07t/a100mg/l0.07t/a大气污--------染物生活垃圾固废4.35t/a当地环卫部门处理固废培养基0.4t/a体收集后交有资质部门处理废物试验室废试剂0.08t/a废包装物0.03t/a收集后外售,综合利用本项目的噪声源主要为试验设备运行噪声,噪声源为65-70dB(A)。项目采取噪了选用低噪声设备、基础减振、隔声门窗,降噪25-30dB(A),使厂界噪声达到《工声业企业厂界环境噪声排放标准》(GB12348-2008)表1中2类标准要求。其他主要生态影响(不够时可附另页)本项目租用燕郊高新区创业大厦内现有办公场所,无施工期,因此,本项目的建设不会对周围生态环境产生明显不利影响。17 环境影响分析施工期环境影响简要分析:本项目租赁现有办公场所,施工主要是室内装修及设备安装调试,没有土建工程,因此该项目的施工期不会对外环境造成明显不利影响。营运期环境影响分析:1.废水影响分析(1)废水污染源分析本项目外排废水主要为职工生活污水,产生量按下式计算:WC=D×N×qc×qI/1000式中:WC——污水排放量,t/a;N——人口数;qC——人均生活污水排放系数,取0.8;qi——用水额,取80L/人.d。D——年工作日,天/a。本项目定员29人,年工作日为300天,人均生活污水排放系数取0.8,厂区内设休息室,不设宿舍,食堂,根据河北省用水定额,结合实际情况,用水量取100L/人·d。以此估算本项目使用期污水产生量696t/a,废水中主要污染因子为COD,氨氮、BOD、SS,其产生浓度及产生量分别约为COD产生浓度300mg/L,产生量为0.209t/a;氨氮产生浓度25mg/L,产生量为0.017t/a;BOD产生浓度180mg/L,产生量为0.125t/a;SS产生浓度100mg/L,产生量为0.07t/a。污水经创业大厦的隔油池、化粪池处理后排入市政污水管网,最终进入燕郊高新区西污水处理厂统一处理。2.噪声影响分析本项目的噪声源主要有高速离心机等设备噪声,作业噪声65-70dB(A)之间。本项目试验设备均置于封闭房间内,房屋阻隔衰减按25-30dB(A)计,以设备外1m处声值作为声源,由于声源到试验室边界预测点的距离远大于声源长度,因此噪声源为点声源。所用设备噪声级如下表。18 表11各整体声源的平均噪声级单位dB(A)设备数单台设备噪声评价标评价结治理措施贡献值名称量噪声级衰减量准果高速离心厂房隔音+基础减昼间:601702545达标机震夜间:50由上表厂界噪声预测结果表明,经厂房隔音和基础减震措施后,设备对厂界影响值较小,噪声排放值满足《工业企业厂界环境噪声排放标准》(GB12348-2008)中表1的2类标准要求(因声源距离试验室边界距离较近,且设备噪声源强较低,噪声距离衰减不计即可满足排放要求)。通过预测表明本项目采取噪声防治措施是可行的,不会对厂区声环境质量造成明显不利影响。4.固体废弃物本项目产生主要固体废物为职工的生活垃圾、试验室产生的废培养基和废试剂、废包装盒、纸箱等。(1)职工生活垃圾V生=D×fv×N/1000式中:V生-生活垃圾产生量,t/a;fv-排放系数,取0.5Kg/人·d;N-预测人口数。D—年工作日,天/a。本项目定员29人,年工作日为300天,预计生活垃圾产生量为4.35t/a。采用袋装方式收集后,由当地环卫部门定期运往垃圾处理厂进行集中处理,不会对周围环境造成不利影响。(2)试验室固废根据建设单位技术人员提供资料,废培养基产生量为0.4t/a,废试剂产生量为0.08t/a,属于国家危废名录中HW02医药废物,收集后交有资质单位处理。(3)废包装物项目废包装纸盒、纸箱等产生量约为0.03t/a,收集后外售综合利用。综上所述,本项目对固体废弃物的处置符合“减量化、资源化、无害化”的原则,上述固体废物均采取了综合处理措施,可获得一定的经济收益,因此认为固体废物处治措施从经济、技术分析是可行的。不会对当地环境造成明显不利影响。19 5.三同时验收一览表本项目总投资1200万元,其中环保投资25万元,占总投资2.1%。表12环境保护三同时验收一览表类投资污染源治理措施验收标准标准来源别(万元)《污水综合排放标准》COD≤500mg/LGB8978—1996表4中三废隔油池+化粪池氨氮≤25mg/L生活污水级标准同时满足燕郊--水(创业大厦配套已有)BOD5≤300mg/L高新区污水处理厂入SS≤400mg/L水水质要求《中华人民共和国固集中收集后,交当地体废物污染环境防治生活垃圾环卫部门统一处理法》“第三节生活垃圾污染环境的防治”固废处置执行《一般工业固体废物贮存、处置场污染控制标准》20废包装盒收集后外售(GB18599-2001)标准固不对周围环境产生(固废收及修改单相关规定(环废二次污染集及储存保部公告2013年36设施费用)号)危险固废鉴别执行《危险废物鉴别标准》(GB50851~7-2007),废培养基、废试剂收集后交有资质单位处理临时贮存执行《危险废物贮存污染控制标准》(GB18597-2001)。《工业企业厂界环境噪试验设备昼间60dB(A)噪声排放标准》房间隔音+基础减震5声的运行噪声夜间50dB(A)GB12348—2008表1中的2类标准总25计污染物排放总量控制COD≤0.209t/a,NH3-N≤0.017t/a,SO2≤0t/a,NOx≤0t/a。指标20 建设项目拟采取的防治措施及预期治理效果内容排放源污染物名称防治措施预期治理效果类型(编号)水COD污氨氮生活用水隔油池、化粪池达标排放染BOD物SS大气污--------染物不对周围环境产生职工生活垃圾当地环卫部门定期清运固明显不利影响体废包装盒、不对周围环境产生收集后外售废纸箱明显不利影响实验室物废培养基、不对周围环境产生收集后交有资质单位处理废试剂明显不利影响噪试验设备置于封闭房间内,采用基础减震+厂房隔音措施后可达标排放,不会对周围环境造成明显不利影响。声其他生态保护措施及预期效果本项目租用创业大厦内现有办公场所,创业大厦已建成多年,配套设施完善。本项目的建设无需土建工程,不会对周边生态产生明显不利影响。21 结论与措施一、结论1.河北蓝梦生物医药科技有限公司拟投资1200万元新建燕郊高新区生物公共技术服务平台项目,本项目建设属于中华人民共和国国家发展和改革委员会令第40号《产业结构调整指导目录(2011年本)》(2013年修订)鼓励类第三十一类第6条“分析、试验、测试以及相关技术咨询与研发服务”。项目已取得燕郊高新技术产业开发区管理委员会的河北省固定资产投资项目备案证(燕区经备字[2015]16号),项目的建设符合国家产业政策。2.该项目建设地点位于燕郊高新区迎宾北路东侧、神威环岛东北角创业大厦内,厂址中心坐标:北纬39°57′54″,东经116°48′29″。该项目已取得燕郊高新区住房和规划建设局出具的符合规划证明(详见附件),项目用房具有三河市人民政府城镇房屋确权发证办公室出具的产权证,规划用途为住宅、办公,证号:三河市房权证燕字第038912号。因此,该项目符合燕郊高新区总体规划要求,符合土地供给政策。地理位置及四邻见附图1、2。3.工程建成后主要污染物及防治措施⑴废水该项目排放废水主要为生活污水,产生量为696t/a,主要污染物为COD、BOD、SS、氨氮,产生浓度分别为COD:300mg/l、BOD:180mg/l、SS:100mg/l、氨氮:25mg/l。经创业大厦配套污水处理设施处理达到《污水综合排放标准》GB8978-1996表4三级标准,同时满足燕郊高新区污水处理厂入水水质要求后,经市政污水管网,最终进入燕郊高新区污水处理厂。⑵噪声该项目噪声主要来源为试验设备高速离心机产生的噪声,源强65-70dB(A)之间。经采用基础减震降噪措施及密闭厂房隔音等措施后,可满足《工业企业厂界环境噪声排放标准》GB12348—2008表1中的2类标准的限值要求,厂界达标,不会对周围声环境造成明显的不利影响。⑶固体废弃物本项目固体废物主要来源于职工的生活垃圾。职工生活垃圾年产生量4.35吨,由当地环卫部门定期清运处理。根据建设单位技术人员提供资料,废培养基产生量为0.4t/a,废试剂产生量为0.08t/a,属于国家危废名录中HW02医药废物,收集后交有资质单位处理。项目废包装纸盒、纸箱等产生量约22 为0.03t/a,收集后外售综合利用。综上所述,本项目对固体废弃物的处置符合“减量化、资源化、无害化”的原则,上述固体废物均采取了综合处理措施,可获得一定的经济收益,因此认为固体废物处治措施从经济、技术分析是可行的。不会对当地环境造成明显不利影响。4.拟建项目不新建锅炉房,办公区冬季由市政热力管网统一供暖,设备选型不包括国家明令淘汰的落后设备,符合国家清洁生产要求。5.本项目不涉及放射性、辐射性问题,若存在,须另作环境影响评价,本报告不予评价。本生物公共技术服务平台不包括P3、P4生物安全实验室、转基因实验室内容,若存在,须另作环境影响评价,本报告不予评价。6.根据《全国主要污染物排放总量控制计划》中所规定的“十二五”期间全国实行排放总量控制的2种污染物,结合项目自身特点建议污染物排放总量控制项目为COD和氨氮。建议值为COD≤0.209t/a,NH3-N≤0.017t/a。综上所述,本项目符合国家产业政策,选址可行,具有良好的经济效益,社会效益,在满足本评价提出的污染防治措施后,从环境影响的角度分析,项目的建设不会对周围环境造成明显的不利影响,因此该项目的建设是可行的。二、建议1.建设单位应严格按照设计方案组织运行,不得随意改变工程性质及建设内容。如有改动,应提前向环保有关部门提出书面申请,根据环保部门要求,办理相关事宜。2.建设单位应固定地点、固定容器收集危废,且由专人负责危废的收集、联系有资质的单位转运、处理。3.建设单位要加强企业管理,对环保设施和设备定期进行维护管理,保证设备的正常运转。为搞好环境保护工作,建设单位应设置专职环境保护管理人员,对拟建工程环境保护工作进行监督和管理。4.建设单位应加强对项目的强化管理,做好企业员工的劳动保护。5.建设单位应做好防火消防工作。23 预审意见:公章经办人:年月日下一级环境保护行政主管部门审查意见:公章经办人:年月日24 审批意见:公章经办人:年月日25 注释一、本报告表应附以下附件、附图:附件1立项批准文件附件2其他与环评有关的行政管理文件附图1项目地理位置图(应反映行政区划、水系、标明纳污口位置和地形地貌等)附图2项目平面布置图二、如果本报告不能说明项目产生的污染及对环境造成的影响,应进行专项评价。根据建设项目的特点和当地环境特征,应选下列1—2项进行专项评价。1.大气环境影响专项评价2.水环境影响专项评价(包括地表水和地下水)3.生态影响专项评价4.声环境专项评价5.土壤影响专项评价6.固体废物影响专项评价以上专项评价未包括的可另列专项,专项评价按照《环境影响评价技术导则》中的要求进行。26 27'