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2009~2010学年第一学期《有害生物检测技术》期末试题(A)班级:姓名:学号:成绩:一、名词解释(总分15分,每题3分)1.检验2.平均样品3.同功酶4.血清学反应5.帐幕熏蒸二、填空题(总分15分,每空0.5分)1.抽样一般是建立在的基础上,为保证检查物品的代表性和均匀度,需,抽查样品数按货物类型而定。常用的取样方法有、和随机布点或分层随机取样法等几种。2.吸水纸检验是离体与活体检验的结合,其操作方法为:、、。3.诱集是对昆虫的利用。诱集昆虫的方法通常有:、、气味诱集和陷阱法。4.植物病毒提纯的主要步骤包括:、、和梯度离心。5.植物病原真菌的分离主要是分离法。植物病原细菌一般采用分离法。细菌技术的方法有、、;前两种方法是计数活的和死的细菌的总数,后一种方法是测定活细菌的数目。6.植物病毒病的外部症状,通常可以归纳为5种类型:、、环斑和环纹、、矮缩矮化和畸形。植物病毒的接种方法与他的传染途径有关,已知道的传染途径为;嫁接传染和菟丝子传染;;;种子和花粉传染。7.昆虫的室内饲养方法主要有:养虫箱饲养、、、。检查粮谷或种子中隐蔽的谷象、米象通常采用和进行检验。豆子中豆象的检验常用染色法加以检验。三、单项选择题(总分20分,每题2分)1.适于隐蔽性害虫检验的方法是()A比重检验B直接检验C、洗涤检验D吸水纸培养检验2.不适于病原病毒检验的方法是()A鉴别寄主反应B免疫电镜技术C、PCR技术D分离培养3.下列不宜采用溴甲烷熏蒸的货物是()A毛毯B木材C、文史档案D衣服4.目前我国进行检疫检验的依据是()A《中华人民共和国进出境植物检疫法》B《全国农业植物检疫条例》C、《农业植物调运检疫规程》D《国际植物保护公约》5、2002年发布的国际植物检疫措施标准《国际贸易中的木质包装材料管理准则》规定的木质包装处理温度为木材中心温度和处理时间是()A56℃,30minB56℃,60minC、76℃,30minD76℃,15min6、下列哪种熏蒸剂破坏大气平流层中的臭氧()A磷化铝B溴甲烷C、氯化苦D硫酰氟7、在植物检疫中可不能用于真空处理的熏蒸剂有()A氢氰酸B溴甲烷C、环氧乙烷D磷化铝8、解剖观察成虫外生殖器之前,将保存液内的标本移入()处理直至虫子腹部透明。A10%NaOHB10%NaClOC、70%乙醇D蒸馏水9、将病毒的抗原与抗体特异性免疫反应与PCR技术相结合,称作为()A实时荧光PCRB巢式PCRC多重PCRDIC-RT-PCR10、在转基因植物检测中用得较多的核酸杂交方式是()
AtNorthernblotBSouthernblotCWesternblotDEasternblot四、简答题(总分30分,每题6分)1.简述维管束组织内病原真菌的分离。2.在细菌的噬菌体检验中,常采用的方法有哪两种?3.植物寄生线虫的分离方法有哪些?4.在调运检疫时,针对杂草种子的检验方法有哪些?5.简述研制昆虫人工饲料的基本原则。1.简述斑点病原真菌的分离。2.在细菌的噬菌体检验中,常采用的方法有哪两种?3.常用药剂熏蒸的操作程序是什么?4.植物寄生线虫的分离方法有哪些?5.在调运检疫时,针对杂草种子的检验方法有哪些?6.简述研制昆虫人工饲料的基本原则。五、论述题(总分20分,每题10分)1.设计一个实验对猕猴桃溃疡病病原进行鉴定和分离。2.设计一个实验,对小麦种子中所携带的小麦矮腥黑穗病进行检验。答案:一、名词解释检验:对植物、植物产品或其它限定物进行官方的直观检查以确定是否存在有害生物和/或是否符合植物检疫法规。平均样品:将混合样品按机械分样或对角线分样以减少样品量,直到足够检验用的数量。同功酶:是指来源于同一器官或组织,催化统一化学反应;或者说具有同样特异性而其本身分子结构不同的一组酶。血清学反应:抗原和抗体之间发生的各种作用称为血清学反应。帐幕熏蒸:是指在一定的温度条件下,将一定量的熏蒸剂施入到密封的帐幕中,并保持一定的密闭时间和一定的熏蒸气体浓度,以杀死或控制有害生物的过程。二、填空题1.批逐级取样对角线取样法棋盘式取样法2.种子的摆放保湿培养观察3.趋性灯光诱集色诱4.粗体液的制备差速离心分步沉淀5.组织稀释测数计计数法混浊度计数法平板菌落计数法6.花叶变色坏死机械传染昆虫和其他介体传染土壤传染7.加罩养虫器饲养指形管饲养木盒或玻璃缸饲养高锰酸钾染色法品红染色法碘或碘化钾染色法三、单项选择1.C2.A3.A4.C5.A6.B7.D8.A9.D10.B四、简答题1.维管束组织内病原真菌的分离:寄主病部表面消毒后,将表皮组织用灭菌的解剖刀切去,然后切取其中小块变色的维管束组织,移入琼胶培养基平板上培养,表面消毒可用升汞水或用火烧(要不影响组织内的病菌),最常用的消毒方法是:在75%的酒精中浸过后将酒精用火烧去。
2.在细菌的噬菌体检验中,常采用的方法有两种:①利用指示菌细菌来检测样品中是否存在相关的噬菌体,以此来判断样品中是否有该噬菌体的寄主细菌存在。②利用已指示菌体来检测样品是否有相应的寄主细菌存在。即在代策样品的浸泡液中加入一定浓度的某种已知的噬菌体,培养一定的时间后,再测定噬菌体的数量,如果噬菌体数量明显增多了,即表明浸泡液中有已知的噬菌体的寄主细菌存在。3.植物寄生线虫的分离方法:①漏斗法②浅盘分离法③芬威克漂浮分离法④改进的浮力离心法⑤过筛分离法4.在调运检疫时,针对杂草种子的检验方法:①过筛检验②解剖法③显微切片法④生长检验⑤种植试验⑥分子生物学技术的应用⑦扫描电镜观察⑧其它鉴定方法:有的杂草由于真菌的内寄生而表现稳定的性状,根据这些内生菌的特征可以鉴别其近似种类。5.研制人工饲料的基本原则:①必须具备良好的物理性状;②必须具备良好的化学性能;③对饲养对象应能保持营养平衡;④必须有效地防止微生物污染。五、论述题1.猕猴桃溃疡病病原鉴定:根据叶片上的水渍状晕圈和枝干上白色水滴状菌脓初步诊断为细菌性病害。取病健交界处组织一块,放于在玻片上,向小块上滴1-2滴无菌水或蒸馏水,加盖玻片后。立即用低倍显微镜观察水滴与组织交界处,见到云雾状菌溢,亦可证明组织内有细菌存在。猕猴桃溃疡病病原分离:新鲜病健交界处的病组织洗净后切成4mm×4mm小块,用灭菌水冲洗3次;分别用70%酒精和0.5-1%的次氯酸钠进行表面消毒,病组织在消毒液中浸泡1-2min,再用无菌水冲洗3次,用培养皿稀释分离法或平板划线分离法分离。培养基可选用肉汁胨琼脂培养基:培养菌落圆形,污白色,全缘,微凹,光滑,生长缓慢,直径1-3mm;蔗糖蛋白胨培养基:菌落呈粘稠状;金氏培养基:菌落有黄绿色荧光。2.小麦种子中所携带的小麦矮腥黑穗病进行检验,方法如下:(1)抽取10-100克试样两份,分别放入三角瓶内,加入无菌水10-100ml,振荡5-10min,使附着在种子表面的病菌孢子冲洗下来。为了使种子表面的病原物能充分洗涤下来,可在无菌水中加入0.1%的湿润剂或其它去污剂。(2)直接取悬浮液观察,或将悬浮液分别倒入洁净的离心管内,通过离心浓缩,2000-4000r/min,10-30min。用吸管将上清液弃去,保留沉淀,然后将每个离心管中加入少量的蒸馏水,振动离心管使沉淀充分悬浮,将各离心管中的悬浮液合并后,用量筒定容至一定体积。立即取一滴悬浮液于载玻片上,用显微镜检查,鉴定病原种类,并计算每克种子上的孢子负荷量。为保证检测的可靠性,一般对每一样品的洗涤液至少要镜检5个玻片,计算方法常有:平均视野推算法、血球板测定孢子数法。