《细胞生物学实验》教学大纲

西南科技大学本科实践教学大纲《细胞生物学实验》教学大纲【课程编号】17314359【英文名称】ExperimentofCellBiology【课程学时】32【适用专业】生物技术一、本实验课程的教学目的和要求细胞生物学是一门实践性强，对实验技能实验仪器要求较高的课程，因此开设本课程的目的是通过实验教学，使理论与实践统一，使学生加深对课堂讲授内容的认识与理解，掌握细胞生物学实验设备的操作方法，具备观察和研究细胞结构与功能的基本方法，学会发现问题和解决问题的基本技能，为毕业后从事生物学相关的科研和教学工作奠定基础。实验内容既包括经典的细胞生物学实验技术与方法，又安排了一些反映当前细胞生物学发展水平的内容。通过实验课不仅加深对理论知识的理解和认证，而且通过对细胞生命现象的观察和亲手操作，使学生获得有关细胞生命活动的感性知识，有效地提高理论课的教学效果，提高学生实验技能，并培养学生树立独立设计实验的思考观念和独立处理问题、解决问题的能力。本实验计划学时32学时，开设7-9个实验项目，并有部分实验可供同学们选作。二、本实验课程与其它课程的关系细胞生物学实验是对细胞生物学理论课程教学的重要补充和完善。本课程应在植物学实验、无机及分析化学实验、有机化学实验和生物化学实验等课程之后开设，而遗传学染色体研究技术、分子生物学技术以细胞生物学实验为基础，因此本课程应在遗传学实验、分子生物学实验、细胞工程实验等课程之前开设，并尽量同细胞生物学理论课教学同步。三、实验课程理论教学内容安排本实验课程不安排理论教学内容。四、实验内容安排1、实验项目的类型及性质序号实验项目名称学时类型性质验证综合设计演示必做自选1细胞凝集反应2√√2不同因素对细胞膜的通透性影响2√√3巨噬细胞吞噬现象的观察2√√4植物细胞骨架的光学显微镜观察2√√5细胞器的分离与提取技术2√√6动植物细胞线粒体和液泡系的超活染色与观察4√√7动物细胞培养24√√8抗癌药物诱导HL-60细胞凋亡的形态和生化特征观察14√√3 西南科技大学本科实践教学大纲9动植物染色体标本的制备与观察8√√实验学时合计6022240143228实验个数合计97101452、实验项目说明实验一、细胞凝集反应（2学时）【目的要求】通过本实验可以使学生熟悉并理解细胞凝集反应的原理，掌握临时装片技术和显微镜的使用方法；能熟练地将理论教学中细胞膜的相关知识与实际操作观察相结合。【内容】显微镜下观察血球凝集现象，学会配置PBS缓冲液和兔子静脉采集血液方法。【方法】使用教具示范，要求学生亲自操作临时制片法、无菌法抽取兔子静脉血（含抗凝剂）。【参考资料】杨汉民编，细胞生物学实验，高等教育出版社出版，1997年第二版。实验二、不同因素对细胞膜的通透性影响（2学时）【目的要求】了解细胞膜的渗透性及各类物质进入细胞的速度；能熟练地将理论教学中细胞膜的相关知识与实际操作观察相结合。【内容】制备羊血细胞悬液和低渗溶液、等渗盐溶液，将不同等渗溶液加入到相同体积的羊血中观察溶液颜色变化和溶血现象。【方法】使用教具示范，要求学生亲自操作。【参考资料】王金发编，细胞生物学实验教程，科学出版社出版，2003年第一版实验三、巨噬细胞吞噬现象的观察（2学时）【目的要求】通过对小白鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞活动的观察，加深理解细胞吞噬作用的过程及意义；掌握小鼠腹腔注射给药和颈椎脱臼处死方法。【内容】实验前一天给小白鼠腹腔注射6%淀粉肉汤；实验时腹腔注射1%鸡红细胞悬液；脱臼处死小鼠，注射器吸取腹腔液；制片显微镜观察。【方法】使用教具示范，要求学生亲自操作小鼠腹腔注射给药和颈椎脱臼处死方法以及制片。【参考资料】王金发编，细胞生物学实验教程，科学出版社出版，2003年第一版实验四、植物细胞骨架的光学显微镜观察（2学时）【目的要求】掌握用光学显微镜观察植物细胞骨架的原理及方法，观察光学显微镜下细胞骨架的网状结构。【内容】植物细胞用适当浓度的TritonX—100处理后，可破坏细胞内蛋白质，但细胞骨架系统的蛋白质却保护完好。考马斯亮蓝R250(CoomassiebrilliantblueR250)是一种蛋白质染料，处理后的材料用考马斯亮蓝R250(考马斯亮蓝R250)染色后，用光学显微镜观察，可以见到一种网状结构，即是细胞骨架结构。【方法】使用教具示范，要求学生亲自操作。【参考资料】王金发编，细胞生物学实验教程，科学出版社出版，2003年第一版杨汉民编，细胞生物学实验，高等教育出版社出版，1997年第二版。实验五、细胞器的分离与提取技术（2学时）【目的要求】用差速离心法分离动植物细胞核与染色体；了解差速离心3 西南科技大学本科实践教学大纲的原理；掌握有关操作方法。【内容】样品处理；离心；分离物鉴定；镜检。【方法】使用教具示范，要求学生亲自操作。【参考资料】王金发编，细胞生物学实验教程，科学出版社出版，2003年第一版实验六、动植物细胞线粒体和液泡系的超活染色与观察（4学时）【目的要求】观察动植物活细胞内线粒体、液泡系的形态、数量与分布；掌握一些细胞器的超活染色技术。【内容】样品处理；制片；染色；镜检。【方法】理论讲授结合教具示范，要求学生亲自操作。【参考资料】杨汉民编，细胞生物学实验，高等教育出版社出版，1997年第二版。实验七、动物细胞培养（24学时）【目的要求】掌握原代细胞培养的基本方法和操作过程及原代培养细胞观察方法。以原代培养的小鼠胎儿细胞为材料，学习动物细胞培养中最常用的消化法进行细胞传代培养的实验过程，为细胞纯化、冷冻保存、生长曲线的测定和细胞活性检查等实验奠定基础，并进一步练习无菌操作技术。【内容】处死动物取材；样品处理；分装培养；观察。【方法】理论讲授结合教具示范，要求学生亲自操作。【参考资料】王金发编，细胞生物学实验教程，科学出版社出版，2003年第一版实验八、抗癌药物诱导HL-60细胞凋亡的形态和生化特征观察（14学时）【目的要求】掌握细胞凋亡的形态特征；学会根据染色质的凝集程度、是否形成凋亡小体和细胞膜通透性变化，鉴别凋亡细胞、坏死细胞、正常细胞；了解凋亡细胞的生化特征，学会制作DNAladdered的一种方法；掌握鉴别凋亡细胞、坏死细胞和正常细胞的原理；掌握诱导细胞凋亡的方法。【内容】培养细胞；样品处理；镜检观察凋亡细胞、坏死细胞、正常细胞；从凋亡细胞、坏死细胞、正常细胞中提取细胞DNA，进行琼脂糖凝胶电泳并观察和摄影。【方法】理论讲授结合教学工具示范，学生亲自操作。【参考资料】王金发编，细胞生物学实验教程，科学出版社出版，2003年第一版实验九、动植物染色体标本的制备与观察（8学时）【目的要求】学习动植物染色体标本的制备技术，掌握染色体计数和分析的方法。【内容】取材；0.1％秋水仙素液室温预处理；Carnoy固定；70％酒精保存；盐酸酒精离析液，60℃水解；清水漂洗两次；1%醋酸洋红染色（植物细胞）和姬姆萨染色（动物细胞），压片观察。【方法】理论讲授结合教学工具示范，学生亲自操作。【参考资料】王金发编，细胞生物学实验教程，科学出版社出版，2003年第一版五、实验考核方式(报告)及成绩评定实验总成绩：实验过程表现成绩40%、实验报告成绩占60%。3 西南科技大学本科实践教学大纲实验过程表现成绩：包括学习态度是否认真、实验操作是否正确规范、实验结果是否正确、是否具有创新意识、打扫卫生等方面。实验报告成绩：包括实验报告的格式是否正确、原理是否论述清楚、实验结果分析讨论是否符合逻辑，报告字迹是否清楚等方面。六、参考资料1、杨汉民编，细胞生物学实验，高等教育出版社出版，1997年第二版；2、王金发编，细胞生物学实验教程，科学出版社出版，2003年第一版编写负责人：刘文静审核人：部门主管领导：3