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(金榜题库)2014届高考生物总复习课时提升作业(三十八)第1章第1节基因工程概述苏教版选修3(30分钟50分)一、选择题(包括6小题,每小题5分,共30分)1.在基因工程中用来修饰、改造基因的工具是( )A.限制性核酸内切酶和DNA连接酶B.限制性核酸内切酶和DNA酶C.限制性核酸内切酶和载体D.DNA连接酶和载体2.利用外源基因在受体细胞中表达,可生产人类所需的产品。下列选项中能说明目的基因完成表达的是( )A.棉花细胞中检测到载体上的标记基因B.山羊乳腺细胞中检测到人生长激素的基因C.大肠杆菌中检测到人胰岛素基因的mRNAD.酵母菌细胞内提取到人的干扰素3.下列关于基因工程的叙述,错误的是( )A.目的基因和受体细胞均来自动植物或微生物B.限制性核酸内切酶和DNA连接酶是两类常用的工具酶C.人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原无生物活性D.载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞和促进目的基因的表达4.基因工程中,需使用特定的限制性核酸内切酶切割目的基因和质粒,便于重组和筛选。已知限制性核酸内切酶Ⅰ的识别序列和切点是-G↓GATCC-,限制性核酸内切酶Ⅱ的识别序列和切点是-↓GATC-。据图判断下列操作正确的是( )A.目的基因和质粒均用限制性核酸内切酶Ⅱ切割-4-
B.目的基因和质粒均用限制性核酸内切酶Ⅰ切割C.质粒用限制性核酸内切酶Ⅱ切割,目的基因用限制性核酸内切酶Ⅰ切割D.质粒用限制性核酸内切酶Ⅰ切割,目的基因用限制性核酸内切酶Ⅱ切割5.(2013·苏州模拟)多聚酶链式反应技术(PCR技术)是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法,由高温变性、低温退火及适温延伸等几步反应组成一个周期,循环进行,使目的DNA得以迅速扩增,其简要过程如图所示。下列关于PCR技术叙述不正确的是( )A.PCR技术是在实验室中以少量DNA制备大量DNA的技术B.反应中新合成的DNA又可以作为下一轮反应的模板C.PCR技术中以核糖核苷酸为原料,以指数方式扩增D.应用PCR技术与探针杂交技术可以检测基因突变6.(多选)(2013·苏州模拟)关于DNA重组技术基本工具的说法不正确的是( )A.DNA连接酶只能连接双链DNA片段互补的黏性末端B.细菌细胞中含有的限制酶不能对自身DNA进行剪切C.限制性核酸内切酶切割DNA后一定能产生黏性末端D.天然的质粒可以直接用来作为载体二、非选择题(共20分)7.(2012·福建高考)肺细胞中的let-7基因表达减弱,癌基因RAS表达增强,会引发肺癌。研究人员利用基因工程技术将let-7基因导入肺癌细胞实现表达,发现肺癌细胞的增殖受到抑制。该基因工程技术的基本流程如下图甲所示。-4-
请回答:(1)进行过程①时,需用 酶切开载体以插入let-7基因。载体应有RNA聚合酶识别和结合的部位,以驱动let-7基因转录,该部位称为 。(2)进行过程②时,需用 酶处理贴附在培养皿壁上的细胞,以利于传代培养。(3)研究发现,let-7基因能影响癌基因RAS的表达,其影响机理如图乙所示。据图分析,可从细胞中提取 进行分子杂交,以直接检测let-7基因是否转录。肺癌细胞增殖受到抑制,可能是细胞中 (选填“RASmRNA”或“RAS蛋白”)含量减少引起的。答案解析1.【解析】选A。DNA酶的作用是使DNA水解为基本单位,基因工程中不用DNA酶;修饰、改造基因与载体无关。2.【解析】选D。基因完成表达是合成相应的蛋白质,酵母菌细胞内提取到人的干扰素说明人的干扰素基因在酵母菌细胞内完成了表达。3.【解析】选D。基因工程中目的基因和受体细胞均来自动植物或微生物;常用的工具酶是限制性核酸内切酶和DNA连接酶;人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原无生物活性,只有经过一定的物质激活以后,才有生物活性。载体上的抗性基因主要是有利于筛选含重组DNA的细胞,不能促进目的基因的表达,所以D错误。【易错提醒】对标记基因的作用认识不清。标记基因的作用是筛选、检测目的基因是否导入受体细胞,常见的有抗生素抗性基因、发光基因,表达产物为带颜色的物质等。4.【解题指南】(1)知识储备:①限制性核酸内切酶的作用;②限制性核酸内切酶识别序列的特点。(2)解题关键:①明确限制性核酸内切酶切割后目的基因的黏性末端和载体质粒的黏性末端必须相同;②目的基因插入质粒时,不能破坏标记基因。【解析】选D。两种限制性核酸内切酶切割各自的识别序列后会产生相同的黏性末端,能用DNA连接酶进行连接。质粒上有限制性核酸内切酶Ⅱ的两个切点,单独使用限制性核酸内切酶Ⅱ时,会把两种标记基因都破坏掉,所以质粒应用限制性核酸内切酶Ⅰ切割;目的基因的两侧都有限制性核酸内切酶Ⅱ的识别位点,可用限制性核酸内切酶Ⅱ切割,目的基因只有一侧有限制性核酸内切酶Ⅰ的识别位点,不能单独使用限制性核酸内切酶Ⅰ切割。-4-
5.【解析】选C。PCR技术是在实验室中以少量DNA制备大量DNA的技术,所以应以脱氧核苷酸为原料,A项正确,C项错误。新合成的DNA可以作为下一轮反应的模板,B项正确。应用PCR技术与探针杂交技术可以检测基因突变,D项正确。6.【解析】选A、C、D。DNA连接酶分为两类,一类是E·coliDNA连接酶,另一类是T4DNA连接酶,前者只能连接双链DNA片段互补的黏性末端,后者还可以连接DNA片段的平末端;细菌细胞中含有的限制性核酸内切酶不能对自身DNA进行剪切;限制性核酸内切酶切割DNA后可能产生黏性末端,也可能产生平末端;天然的质粒要用来作为载体必须进行人工改造。7.【解题指南】(1)知识储备:①限制性核酸内切酶的作用;②基因的表达过程。(2)解答本题的关键是:①注意目的基因和载体需用同一种限制性核酸内切酶切割;②注意题干信息“let-7基因导入肺癌细胞实现表达,发现肺癌细胞的增殖受到抑制”,由此推出肺癌细胞增殖受到抑制的原因是let-7基因的翻译。【解析】(1)基因工程中目的基因和载体需要同一种限制性核酸内切酶切割产生相同的黏性末端,使目的基因与载体结合,载体中与RNA聚合酶识别和结合的部位是启动子。(2)原代培养产生的细胞需用胰蛋白酶处理,分散成单个细胞以进行传代培养。(3)检测目的基因是否转录需提取受体细胞中的RNA进行分子杂交;由图乙可知let-7基因翻译抑制则不能产生RAS蛋白,因此RAS蛋白减少,肺癌细胞的增殖就受到抑制。答案:(1)限制性核酸内切 启动子 (2)胰蛋白(3)RNA RAS蛋白-4-