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选修内容基因工程1(10浙江卷)2.在用基因工程技术构建抗除草剂的转基因烟草过程中,下列操作错误的是A.用限制性核酸内切酶切割烟草茶叶病毒的核酸B.用DNA连接酶连接经切割的抗除草剂基因和载体C.将重组DNA分子导入原生质体D.用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞2(11天津理综卷)6、某致病基因h位于X染色体上,该基因和正常基因H中的某一特定序列BclI酶切后,可产生大小不同的片段(如图1,bp表示碱基对),据此可进行基因诊断。图2为某家庭病的遗传系谱。下列叙述错误的是Ah基因特定序列中Bcl1酶切位点的消失是碱基序列改变的结果BII-1的基因诊断中只出现142bp片段,其致病基因来自母亲CII-2的基因诊断中出现142bp,99bp和43bp三个片段,其基因型为XHXhDII-3的丈夫表现型正常,其儿子的基因诊断中出现142bp片段的概率为1/2.3(10江苏卷)18.下列关于转基因植物的叙述。正确的是A.转入到油菜的抗除草剂基因,可能通过花粉传人环境中B.转抗虫基因的植物.不会导致昆虫群体抗性基因频率增加C.动物的生长激素基因转人植物后不能表达D.如转基因植物的外源基因来源于自然界,则不存在安全性问题4(11天津理综卷)5.土壤农杆菌能将自身Ti的质粒的T-DNA整合到植物染色体DNA上,诱发植物形成肿瘤。T-DNA中含有植物生长素合成酶基因(S)和细胞分裂素合成酶基因(R),它们的表达与否能影响相应植物激素的含量,进而调节肿瘤组织的生长与分化。据图分析,下列叙述错误的是A.当细胞分裂素与生长素的比值升高时,诱发肿瘤生芽B.清除肿瘤中的土壤农杆菌后,肿瘤不再生长与分化C.图中肿瘤组织可在不含细胞分裂与生长的培养基上生长D.基因通过控制酶的合成控制代谢,进而控制肿瘤组织生长与分化5(11年四川卷)5.北极比目鱼中有抗冻基因,其编码的抗冻蛋白具有11个氨基酸的重复序列,该序列重复次数越多,抗冻能力越强,下图是获取转基因抗冻番茄植株的过程示意图,有关叙述正确的是7
A过程①获取的目的基因,可用于基因工程和比目鱼基因组测序B多个抗冻基因编码区依次相连成能表达的新基因,不能得到抗冻性增强的抗冻蛋白,C过程②构成的重组质粒缺乏标记基因,需要转入农杆菌才能进行筛选D应用DNA探针技术,可以检测转基因抗冻番茄植株中目的基因的存在及其完全表达6(2011年浙江卷)6、ada(酸脱氨酶基因)通过质粒pET28b导入大肠杆菌并成功表达腺苷酸脱氨酶。下列叙述错误的是A.每个大肠杆菌细胞至少含一个重组质粒B.每个重组质粒至少含一个限制性核酸内切酶识别位点C.每个限制性核酸内切酶识别位点至少插入一个adaD.每个插入的ada至少表达一个腺苷酸脱氨酶分子答案:C若选择同尾酶分别切割目的基因和质粒,再由DNA连接酶作用形成重组质粒,可能无法被限制性核酸内切酶识别。但实际上在构建重组质粒时,要求连接形成的“接点”序列,必须能被特定的限制性核酸内切酶识别、切割,以便回收插入质粒的目的基因。如出现目的基因不表达、表达水平过低或过高、表达产物的氨基酸序列差错等情况,需要回收目的基因,并进行加工修饰,最终使目的基因表达出人们所预期的效果。因此B选项正确。当然准确地说应该至少含有两个限制性核酸内切酶识别位点。7(10江苏卷)27.(8分)下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点,圈l、圈2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题:(1)一个图1所示的质粒分子经SmaⅠ切割前后,分别含有____个游离的磷酸基团。(2)若对图中质粒进行改造,插入的SmaⅠ酶切位点越多,质粒的热稳定性越____。(3)用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒,不能使用SrnaⅠ切割,原因是____。(4)与只使用EcoRI相比较,使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止____。(5)为了获取重组质粒,将切割后的质粒与目的基因片段混合,并加入____酶。(6)重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了____。(7)为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因,将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体,然后在____的培养基中培养,以完成目的基因表达的初步检测。【答案】(1)0、2(2)高(3)SmaⅠ会破坏质粒的抗性基因、外源DNA中的目的基因(4)质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化(5)DNA连接(6)鉴别和筛选含有目的基因的细胞(7)蔗糖为唯一含碳营养物质8(2011年安徽卷)31.(21分)Ⅱ.(9分)家蚕细胞具有高效表达外源基因能力。将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养,可以提取干扰素用于制药。(1)进行转基因操作前,需用___________酶短时处理幼蚕组织,以便获得单个细胞。(2)为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达,需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的_________和___________之间。(3)采用PCR技术可验证干扰素基因是否已经导入家蚕细胞。改PCR7
反应体系的主要成分应该包含:扩增缓冲液(含Mg2+)、水,4种脱氧核糖苷酸、模板DNA、_____________和_________________。(4)利用生物反应器培养家蚕细胞时,的细胞会产生接触抑制。通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反应器中,这样可以_________________增加培养的细胞数量,也有利于空气交换。答案:(1)胰蛋白酶(或胶原蛋白酶)(2)启动子终止子(3)TaqDNA聚合酶对干扰素基因特异性的DNA引物对(4)增大细胞贴壁生长的附着面积9(11年北京卷)31.(16分)T-DNA可能随机插入植物基因组内,导致被插入基因发生突变。用此方法诱导拟南芥产生突变体的过程如下:种植野生型拟南芥,待植物形成花蕾时,将地上部分浸入农杆菌(其中的T-DNA上带有抗除草剂基因)悬浮液中以实现转化。在适宜条件下培养,收获种子(称为T1代)。(1)为促进植株侧枝发育以形成更多的花蕾,需要去除,因为后者产生的会抑制侧芽的生长。(2)为筛选出已转化的个体,需将T代播种在含的培养基上生长,成熟后自交,收获种子(称为T代)。(3)为筛选出具有抗盐性状的突变体,需将T代播种在含的培养基上,获得所需个体。(4)经过多代种植获得能稳定遗传的抗盐突变体。为确定抗盐性状是否由单基因突变引起,需将该突变体与植株进行杂交,再自交代后统计性状分离比。(5)若上述T-DNA的插入造成了基因功能丧失,从该突变体的表现型可以推测野生型基因的存在导致植物的抗盐性。(6)根据T-DNA的已知序列,利用PCR技术可以扩增出被插入的基因片段。其过程是:提取植株的DNA,用限制酶处理后,再用将获得的DNA片段连接成环(如右图)以此为模板,从图中A、B、C、D四种单链DNA片断中选取作为引物进行扩增,得到的片断将用于获取该基因的全序列信息。答案:31(16分)(1)顶芽生长素(2)(一定浓度的)除草剂(3)(一定浓度的)盐(4)野生型1(5)降低(6)突变体DNA连接酶B、C10(11年重庆卷)31.(16分)拟南芥是遗传学研究的模式植物,某突变体可用于验证相关的基因的功能。野生型拟南芥的种皮为深褐色(TT),某突变体的种皮为黄色(tt),下图是利用该突变体验证油菜种皮颜色基因(Tn)功能的流程示意图。(1)与拟南芥t基因的mRNA相比,若油菜Tn基因的mRNA中UGA变为AGA,其末端序列成为“-AGCGCGACCAGACUCUAA”,则Tn比t多编码____个氨基酸(起始密码子位置相同,UGA、UAA为终止密码子)。(2)图中①应为____。若②不能在含抗生素Kan的培养基上生长,则原因是____。若③的种皮颜色为____,则说明油菜基因与拟南芥T基因的功能相同。7
(3)假设该油菜基因连接到拟南芥染色体并替换其中一个t基因,则③中进行减数分裂的细胞在联会时的基因为____;同时,③的叶片卷曲(叶片正常对叶片卷曲为显性,且与种皮性状独立遗传),用它与种皮深褐色、叶片正常的双杂合体拟南芥杂交,其后代中所占比例最小的个体表现为____;取③的茎尖培养成16颗植珠,其性状通常____(填不变或改变)。(4)所得的转基因拟南芥与野生型拟南芥____(填是或者不是)同一个物种。答案:31.(16分)(1)2(2)重组质粒(重组DNA分子)重组质粒未导入深褐色(3)TnTntt;黄色正常、黄色卷曲;不变(4)是PCR12(2011年江苏卷)33.请回答基因工程方面的有关问题:(1)利用PCR技术扩增目的基因,其原理与细胞内DNA复制类似(如下图所示)。图中引物为单链DNA片段,它是子链合成延伸的基础。①从理论上推测,第四轮循环产物中含有引物A的DNA片段所占的比例为▲。②在第▲轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段。(2)设计引物是PCR技术关键步骤之一。某同学设计的两组引物(只标注了部分碱基序列)都不合理(如下图),请分别说明理由。①第1组:____;②第2组:____。(3)PCR反应体系中含有热稳定DNA聚合酶,下面的表达式不能正确反映DNA聚合酶的功能,这是因为____________。(4)用限制酶EcoRV、Mbol单独或联合切割同一种质粒,得到的DNA片段长度如下图(1kb即1000个碱基对),请在答题卡的指定位置画出质粒上EcoRV、Mbol的切割位点。33.(8分)(1)①15/16②三7
(2)①引物I和引物Ⅱ局部发生碱基互补配对而失效②引物I’自身折叠后会出现局部碱基互补配对而失效(3)DNA聚合酶只能将单个脱氧核苷酸连续结合到双链DNA片段的引物链上(4)见右图细胞工程13(2011年江苏卷)16.下列有关植物组织培养的叙述,正确的是A.愈伤组织是一团有特定结构和功能的薄壁细胞B.二倍体植株的花粉经脱分化与再分化后得到稳定遗传的植株C.用人工薄膜将胚状体、愈伤组织等分别包装可制成人工种子D.植物耐盐突变体可通过添加适量NaCl的培养基培养筛选而获得14(2011年江苏卷)14.关于现代生物技术应用的叙述,错误的是A.蛋白质工程可合成自然界中不存在的蛋白质B.体细胞杂交技术可用于克隆动物和制备单克隆抗体C.植物组织培养技术可用于植物茎尖脱毒D.动物细胞培养技术可用于转基因动物的培育15(2010安徽理综)II.(9分)草莓生产上传统的繁殖方式易将所感染的病毒传播给后代,导致产量降低。品质变差。运用微型繁殖技术可以培育出无病毒幼苗。草莓微型繁殖的基本过程如下:外植体愈伤组织芽、根植株请回答:(1)微型繁殖培育无病毒草莓苗时,一般选取_________作为外植体,其依据是____。(2)在过程①中,常用的MS培养基主要成分包括大量元素、微量元素和______,在配制好的培养基中,常常需要添加________,有利于外植体启动细胞分裂形成愈伤组织。接种后2~5d,若发现外植体边缘局部污染,原因可能是__________。(3)在过程②中,愈伤组织在诱导生根的培养基中未形成根,但分化出了芽,其原因可能是_____________。答案:Ⅱ⑴茎尖、根尖不含病毒⑵有机物植物激素外植体消毒不彻底⑶培养基中生长素类物质和细胞分裂素类物质用量的比值偏低16(10新课标)38.(1)植物微型繁殖技术属于植物组织培养的范畴。该技术可以保持品种的,繁殖种苗的速度。离体的叶肉细胞在适宜的条件下培养,最终能够形成完整的植株,说明该叶肉细胞具有该植物的全部。(2)把试管苗转接到新的培养基上时,需要在超净工作台上进行,其原因是避免的污染。(3)微型繁殖过程中,适宜浓度的生长素单独使用可诱导试管苗,而与配比适宜时可促进芽的增殖。若要抑制试管苗的生长,促使愈伤组织产生和生长,需尊使用的生长调节剂是(脱落酸、2,4-D)。(4)将某植物试管苗培养在含不同浓度蔗糖的培养基上一段时间后,单株鲜重和光合作用强度的变化如图。据图分析,随着培养基中蔗糖浓度的增加,光合作用强度的变化趋势是,单株鲜重的变化趋势是。据图判断,培养基中不含蔗糖时,试管苗光合作用产生的有机物的量(能、不能)满足自身最佳生长的需要。7
(5)据图推测,若要在诱导试管苗生根的过程中提高其光合作用能力,应(降低,增加)培养基中蔗糖浓度,以便提高试管苗的自养能力。【答案】⑴遗传性、快、遗传信息;(2)微生物;(3)下生根、细胞分裂素、2,4-D;(4)逐渐减小先增加后下降、不能;(5)降低17(2011年浙江卷)31.(12分)(1)实验分组:甲组:培养液+Y细胞+-TdR(标记的胸腺嘧啶脱氧核苷)+生理盐水乙组:培养液+Y细胞+-TdR+X(生理盐水配制)每组设置若干个重复样品。(2)分别测定两组的CRD(细胞内的放射性强度),求每组的平均值。(3)将各样品在适宜条件下培养合适时间后,测定其CRD,求每组平均值并进行统计分析。(与说明,答题时用X、CRD、3H-TdR表示相关名词;Y细胞是能增殖的高等动物体细胞)请回答:(1)实验目的:(2)预测实验结果集结论:__________。(3)实验中采用3H-TdR的原因:_____________。答案:31.(13分)(1)探究X对Y细胞增殖(DNA合成)的影响(2)如果乙组CRD明显高于甲组,说明X对Y细胞增殖(DNA合成)有促进作用。如果乙组CRD与甲组基本相同,说明X对Y细胞增殖(DNA合成)无影响。如果乙组CRD明显低于甲组,说明X对Y细胞增殖(DNA合成)有抑制作用。(3)3H-TdR是DNA合成的原料之一,可根据CRD变化来判断细胞增殖(DNA合成)情况胚胎工程19(10江苏卷)17.老年痴呆症患者的脑血管中有一种特殊的β一淀粉样蛋白体,它的逐渐积累可能导致神经元损伤和免疫功能下降.某些基因的突变会导致β一淀粉样蛋白体的产生和积累。下列技术不能用于老年痴呆症治疗的是A.胚胎移植技术B.胚胎干细胞技术C.单克隆抗体技术D.基因治疗技术20(10海南卷)26.(18分)(1)应用胚胎工程技术可以培育出“试管牛”。试管牛的培育需经过体外受精、____、_____以及在母体中发育和产出等过程。(2)在“试管牛”的培育过程中,要使精子和卵母细胞在体外成功结合,需要对精子进行处理,使其_____。另外,培养的卵母细胞需要发育至减数第二次分裂的中期,该时期在显微镜下可观察到次级卵母细胞和_____。(3)通常奶牛每次排出一枚卵母细胞,采用激素处理可使其一次排出多枚卵母细胞,常使用的激素是_________。26.(1)早期胚胎培养 胚胎移植(2)获能 第一极体(3)促性腺激素(其他合理答案也给分)细胞分裂1.(6分)下图表示某种生物的细胞内染色体及DNA相对量变化的曲线图。根据此曲线图回答下列问题:(注:横坐标各个区域代表细胞分裂的各个时期,区域的大小和各个时期所需的时间不成比例)7
(1)图中8处发生的生理过程叫________,(2)若该生物体细胞中染色体数为20条,则一个细胞核中的DNA分子数在4—6时期为____。(3)以该生物体细胞中的两对同源染色体为例,请画出该生物细胞处于6—7时期的细胞分裂示意图。受精作用20图略2(2011上海)28.右图表示雄果蝇进行某种细胞分裂时,处于四个不同阶段的细胞(Ⅰ-Ⅳ)中遗传物质或其载体(①-③)的数量。下列表述与图中信息相符的是A.Ⅱ所处阶段发生基因自由组合 B.Ⅲ代表初级精母细胞C.②代表染色体D.Ⅰ-Ⅳ中③的数量比是2:4:4:17