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绪论1.什么是微生物?它包括哪些类群?在生物界的分类地位如何?微生物是所有形体微小、结构简单的低等生物的总称。微生物包括没有细胞结构的病毒和亚病毒,原核类的细菌、放线菌、蓝细菌、立克次氏体、支原体、衣原体、螺旋体、古生菌,真核类的酵母菌、霉菌和蕈菌、以及单细胞藻类和原生动物等。微生物分别属于病毒界、原核生物界、真核生物界和真菌界。2.微生物的特点是什么?试举例说明。个体小、结构简;种类多、分布广;胃口大、食谱广;繁殖快、易培养;数量大、级界宽;变异易、抗性强、休眠长;起源早、发现晚。3.举例说明微生物和人类的关系。微生物是人类的朋友:1)微生物是自然界物质循环的关键环节2)体内的正常菌群是人及动物健康的基本保证:帮助消化、提供必需的营养物质、组成生理屏障3)微生物可以为人类提供很多有用的物质:有机酸、酶、各种药物、疫苗、面包、奶酪、啤酒、酱油等等。4)在环境保护方面越来越多利用微生物处理污水、污物、毒物,消除污染,保护环境以及监测环境等方面。少数微生物也是人类的敌人:1、引起各种疾病:痢疾;伤寒;霍乱;感冒;乙肝;结核;2、引起工农业产品及生活用品的霉烂、腐蚀。4.什么是微生物学?其主要内容和任务是什么?微生物学是研究微生物及其生命活动规律和应用的科学。研究内容包括微生物的形态结构、分类鉴定、生理生化、生长繁殖、遗传变异、生态分布及其在工业、农业、医疗卫生、环境保护和生物工程等方面的应用。微生物学的主要任务是研究微生物及其生命活动规律,研究它们与人类的关系,发掘微生物资源,充分利用微生物的有益作用,消除其有害影响,造福人类。第一章:1.细菌细胞有哪些主要结构?他们的功能是什么?答:(1).细胞壁:①维持细胞外形②保护细胞免受外界因素的损伤③是鞭毛运动所必需的支点④阻挡有害物质进入⑤与细菌的抗原性、致病性以及噬菌体的敏感性有关⑵.细胞膜:①控制细胞内、外物质运输②维持细胞内正常渗透压的屏障作用③参与细胞壁和荚膜的合成④参与能量的产生⑤是许多酶的所在部位,是重要的代谢活动中心⑥与细胞的运动有关,细菌鞭毛的基体位于细胞上,提供运动所需的能量⑶.拟核和质粒:拟核是贮存和传递遗传信息;质粒不仅带有部分遗传信息,具有各种特定的表型效应,如致育性、抗药性和对多种金属的抗性及分解有毒物质等,而且能通过一定手段,克隆外源DNA片段。2.试图示革兰氏阳性细菌和革兰氏阴性细菌细胞壁的结构,并简要说明其特点及成分(图示看PPT)革兰氏阳性细菌的细胞壁特点:厚度大(20~80nm)化学组分简单,一般只含90%肽聚糖和10%磷壁酸组成成分:肽聚糖厚约20~80nm,由40层左右的网格状分子交织成的网套覆盖在整个细胞上。磷壁酸革兰氏阳性细菌细胞壁上特有的化学成分,主要成分为甘油磷酸或核糖醇磷酸。12
革兰氏阴性细菌的细胞壁肽聚糖埋藏在外膜层之内,是仅由1~2层肽聚糖网状分子组成的薄层(2~3nm),含量约占细胞壁总重的10%,故对机械强度的抵抗力较革兰氏阳性菌弱。外膜位于革兰氏阴性细菌细胞壁外层,由脂多糖、磷脂和脂蛋白等若干种蛋白质组成的膜,有时也称为外壁。外膜蛋白嵌合在LPS和磷脂层外膜上的蛋白。有20余种,但多数功能尚不清楚。周质空间又称壁膜间隙。在革兰氏阴性细菌中,一般指其外膜与细胞膜之间的狭窄空间(宽约12~15nm),呈胶状。3.试述革兰氏染色机理及其重要意义。革兰氏染色的机理与细菌细胞壁的化学组成和结构有关。细菌经出染和媒染后,在细胞膜或原生质体上染上了不溶于水的结晶紫与碘的大分子复合物。革兰氏阳性细菌细胞壁厚,肽聚糖含量高,交联度大,网孔小,乙醇脱色时,肽聚糖网孔会因脱水而明显收缩,加上它不含类脂,不会因乙醇处理使壁出现空隙,结果结晶紫与碘的复合物仍阻留在细胞壁内,使之呈紫色。相反,革兰氏阴性细菌染色时,结晶紫和碘的复合物就容易被抽提出来,细胞退去紫色,复染时染上了番红的红色。革兰氏染色的实际意义:(1)便于形态观察。(2)是鉴别细菌的重要染色方法。(3)作为选择治疗药物的依据。5.试就作用物质、作用机制、作用结果和作用对象比较溶菌酶与青霉素对细菌细胞壁的作用。P176.什么是伴胞晶体?它在何种细菌中产生?有何实践意义?少数芽孢杆菌,例如苏云金芽孢杆菌在其形成芽孢的同时,会在芽孢旁形成一颗菱形或双锥形的碱溶性蛋白晶体——δ内毒素,称为伴孢晶体。伴孢晶体对200多种昆虫尤其是鳞翅目的幼虫有毒杀作用,因而可将这类产伴孢晶体的细菌制成有利于环境保护的生物农药——细菌杀虫剂。7.什么叫放线菌?放线菌是主要呈菌丝状生长、以孢子进行繁殖的一类原核微生物,属于真细菌范畴。8.什么是原核微生物?主要有哪些种类?各有何特点?原核微生物:指核质和细胞质之间不存在明显核膜,其染色体由单一核酸组成的一类微生物。原核微生物主要有细菌、放线菌、支原体、立克次氏体、衣原体、蓝细菌和古细菌。12.比较各类原核微生物的异同。(PPT)试述放线菌的形态结构、繁殖方式与人类的关系。形态与结构特征:1、单细胞,大多由分枝发达的菌丝组成;2、菌丝直径与杆菌类似,约1mm;3、细胞的结构与细菌基本相同。4、细胞壁组成与细菌类似,革兰氏染色阳性(少数阴性);5、菌丝按形态和功能可分为营养菌丝、气生菌丝和孢子丝三种。与人类的关系:能产生大量的、种类繁多的抗生素(其中90%由链霉菌产生)有的放线菌可用于生产维生素、酶制制;此外,在甾体转化、石油脱蜡、烃类发酵、污水处理等方面也有应用。少数寄生型放线菌可引起人、动物(如皮肤、脑、肺和脚部感染)、植物(如马铃薯和甜菜的疮痂病)的疾病。繁殖方式:主要形成无性孢子的方式繁殖,也可借助菌丝断裂片段繁殖。比较放线菌、支原体、立克次氏体、衣原体的异同。(PPT)第二章:2.试述酵母菌的细胞结构及功能。12
3.酵母菌是如何进行繁殖的?1、无性繁殖1)芽殖主要的无性繁殖方式,成熟细胞长出一个小芽,到一定程度后脱离母体继续长成新个体。2)裂殖少数酵母菌可以象细菌一样借细胞横割分裂而繁殖,例如裂殖酵母。2、有性繁殖酵母菌以形成子囊孢子的形式进行有性繁殖1)以二倍体方式进行营养细胞生长繁殖,独立生活②进行减数分裂(下次有性繁殖前),形成4个或8个子囊孢子,而原有的营养细胞就成为子囊。子囊孢子萌发形成单倍体营养细胞。4.试述霉菌的形态结构及功能。(P50)5.霉菌的繁殖方式有哪几种?各类孢子是怎样形成的?(P51)6.毛霉与根霉、曲霉与青霉有哪些异同点?7.比较细菌、放线菌、酵母菌和霉菌的菌落特征。细菌:放线菌菌落能产生大量分枝基内菌丝和气生菌丝的菌种(如链霉菌):质地致密,与培养基结合紧密,小而不蔓延,不易挑起或挑起后不易破碎。不能产生大量菌丝体的菌种(如诺卡氏菌):粘着力差,粉质,用针挑起易粉碎酵母菌的菌落特征:与细菌菌落类似,但一般较细菌菌落大且厚,表面湿润,粘稠,易被挑起,多为乳白色,少数呈红色。此外,酵母菌的菌落,由于存在酒精发酵,一般还会散发出一股悦人的酒香味。霉菌菌落特征:由粗而长的分枝状菌丝组成,菌落形态较大,比细菌菌落大几倍到几十倍,有的没有固定大小。质地疏松,外观干燥,不透明,呈现或松或紧的蛛网状、绒毛状、棉絮状或毡状;与培养基的连接紧密,不易挑取;正面与反面的颜色、构造,以及边缘与中心的颜色构造常不一致等。8.举例说明酵母菌和霉菌在工农业中的应用。酵母菌:1)酿酒、制作面包等:是人类的第一种“家养微生物”。2)生产优良的单细胞蛋白(singlecellprotein,SCP):饲用、药用、食用。无毒,易消化吸收,必须氨基酸含量丰富,核酸含量低,口味好,制造容易,价格低廉。可利用无机氮源或尿素来合成蛋白质,生长速度快,细胞体积大,是目前最好的单细胞蛋白来源。3)生产生化药物和试剂:核酸、维生素、辅酶A、细胞色素A、麦角甾醇等。12
霉菌在工业方面:生产风味食品、酒精、抗生素(青霉素、灰黄霉素)、有机酸(柠檬酸、葡萄糖酸、延胡索酸等)、酶制剂(淀粉酶、果胶酶、纤维素酶等)、维生素、甾体激素等。在农业方面:用于饲料发酵、植物生长刺激素(赤霉素)、杀虫农药(白僵菌剂)等。10.试述原核微生物与真核微生物的主要区别。真核微生物的特征1.细胞核具有核膜、核仁;2.能进行有丝分裂、减数分裂;3.细胞质中存在线粒体或同时存在叶绿体等其它细胞器。核糖体为80S。4.出现有性繁殖。原核微生物同特征:(1)个体微小(测量单位为μm,即10-6m)、结构简单(单细胞个体);(2)细胞壁含肽聚糖或假肽聚糖;(3)除核糖体(70S)外,无其它细胞器。(4)原始细胞核(无核膜包裹、无核仁、无固定形态)。原核微生物与真核微生物共同特征:具细胞结构,即均是细胞型微生物。第三章:1.什么是病毒?病毒与其他微生物有何区别?病毒是一类体积非常微小、结构极其简单、性质十分特殊的生命形式。与其它生物相比,它们具有一下特征:个体极小,缺乏独立代谢能力,没有细胞结构,对一般抗生素不敏感,而对干扰素敏感,具有双重存在方式,2、试述病毒的主要化学组成与结构。病毒核酸有何特点?病毒蛋白质有何功能?多数病毒只含蛋白质和核酸,少数大型病毒还含有脂类和糖类。结构:主要由核酸和蛋白质衣壳构成。核酸是病毒的遗传物质;一种病毒只含有一种核酸:DNA或是RNA;功能:1)构成蛋白质外壳,保护病毒核酸免受核酸酶及其它理化因子的破坏2)决定病毒感染的特异性,与易感细胞表面存在的受体具特异性亲和力,促使病毒粒子的吸附和入侵3)构成病毒的酶,或参与病毒对宿主细胞的入侵(如T4噬菌体的溶菌酶等),或参与病毒复制过程中所需要病毒大分子的合成(如逆转录酶等)。3.病毒有哪些对称类型?每种对称类型病毒的形态是什么?试试各举一例。(P66)4.病毒增殖的一般过程:吸附、侵入、合成、装配、释放5.什么是病毒的一步生长曲线?它包括哪几个时期?每个时期的特点是什么?定量描述烈性噬菌体增殖规律的实验曲线是一步生长曲线。包括:1、吸附期游离的噬菌体吸附到宿主细胞。2、潜伏期从噬菌体吸附到细胞到释放出新噬菌体的最短时期3、裂解期(成熟期)随着菌体不断破裂,新噬菌体数目增加,直到最高值4、平稳期(稳定期)8.按寄主范围,病毒可分为哪几种?病毒分类的主要证据是什么?通常根据寄主范围将病毒分为:脊椎动物病毒、无脊椎动物病毒、植物病毒、微生物病毒病毒分类主要依据包括病毒的形态、结构、基因组、复制、化学组成在内的毒粒性质及病毒的抗原性、生物学性质。P82名词解释:病毒病毒是一类超显微的、结构极简单的、专性活细胞内寄生的、在活体外能无生命的化学大分子状态长期存在并保持其侵染性的非细胞生物。病毒粒子成熟的具有侵染力的病毒个体称病毒粒子噬菌体烈性噬菌体感染宿主细胞后能在细胞内正常复制并最终杀死细胞,形成裂解循环(lyticcycle)的噬菌体,称为~。温和噬菌体感染宿主细胞后不能完成复制循环,噬菌体基因组长期存在于宿主细胞内,没有成熟噬菌体产生的噬菌体,称为~。溶源性细菌细胞中含有以原噬菌体状态存在的温和噬菌体基因组的细菌称做溶源性细菌噬菌斑亚病毒是一类比一般病毒更小更简单的非细胞生物,与一般病毒有显著差别,有的仅是核酸或仅有蛋白质的感染性活体。第四章:1.微生物利用营养物质有哪六大类?它们的主要生理功能是什么?12
碳源生理功能:提供碳元素,合成细胞物质(如糖类、脂类、蛋白质等)和代谢产物;同时也提供氢原子、氧原子;提供能源(维持生命活动所需的)。氮源生理功能:提供氮素,合成细胞中的含氮物质(氨基酸、嘌呤、嘧啶等能源为微生物的生命活动提供最初能量来源的营养物质或辐射能。无机盐P89生长因素维生素主要作为酶的辅基或辅酶参与新陈代谢。氨基酸用于蛋白质合成。嘌呤与嘧啶作为酶的辅酶或辅基及用于核甘、核甘酸、核酸合成。水1)是细胞中生化反应的良好介质;营养物质和代谢产物都必须溶解在水里,才能被吸收或排出体(细胞)外。(2)水的比热和气化热高,能有效的吸收代谢过程中放出的热量,不致使细胞的温度骤然上升。(3)维持细胞的膨压(控制细胞形态)。2.微生物利用的资源有哪些种类?与动植物相比有何不同?(PPT)3.根据能源、氢供体、基本碳源,微生物的营养类型可划分为哪几类?试列表比较说明各营养类型基本特点及代表微生物(列表PPT)据能源、碳源划分光能自养型:以光为能源,以CO2为唯一或主要碳源。光能异养型:以光为能源,以有机物为碳源。化能自养型:以无机物的氧化获得能量,以CO2为唯一或主要碳源。化能异养型:以有机物的氧化获得能量,以有机物为碳源。4.什么是微生物的营养?什么是碳源?什么是氮源?什么是生长因子?什么叫培养基?生长因子:是一类调节微生物的正常代谢所必需且需求量很小,但不能自行合成或合成量不足的有机物。氮源:凡是构成微生物细胞物质和代谢产物中氮素来源的营养物质称为~碳源:凡是构成微生物细胞物质和代谢产物中碳素来源的营养物质称为~培养基是人工配制的,适合微生物生长繁殖或产生代谢产物的营养基质(混合营养料)。名词解释:微生物营养,微生物获得和利用营养物质的过程,称为~微生物营养物质凡能满足微生物机体生长繁殖和完成各种生理活动所需要的物质,称为~。固体培养基、一般采用天然固体营养物质,如马铃薯块、麸皮等作为培养微生物的营养基质。亦有在液体培养基中加入一定量的凝固剂(琼脂1.5%~2.0%)煮沸冷却后,使凝成固体状态。液体培养基把各种营养物质溶解于水中,混合制成水溶液,调节适宜的pH,成为液体状态的培养基(不加琼脂)选择培养基它是根据某一种或某一类微生物的特殊营养要求或对某种化合物的敏感性不同而设计的一类培养基。鉴别培养基是一类在成分中加有能与目的菌的无色代谢产物发生显色反应的指示剂,从而达到只须用肉眼辨别颜色就能方便地从近似菌落中找出目的菌落的培养基。1、比较微生物吸收营养物质主要方式的特点。单纯扩散特点1、由高浓度向低浓度运送;2、无特异载体蛋白;3、不需消耗能量;4、运送速度慢;5、物质在运送过程中不发生化学变化等。促进扩散1、由高浓度向低浓度运送;2、需特异载体蛋白;3、不需消耗能量;4、运送速度快;5、物质在运送过程中不发生化学变化等。主动运送1、由低浓度向高浓度运送;2、需特异载体蛋白3、需消耗能量;4、运送速度快;5、物质在运送过程中不发生化学变化等。基团转位1、由低浓度向高浓度运送;2、需特异载体蛋白;3、需消耗能量;4、运送速度快;5、物质在运送过程中发生化学变化等2、简述微生物培养基的配制原则。1、目的明确(明确培养对象等)2、营养协调(营养物的浓度及配比合适)3、理化条件适宜4、经济节约5、灭菌处理3、培养不同种类微生物能否用同一种培养基,培养四大类微生物通常采用何种培养基?12
4、有一种细菌,在黑暗条件下能在如下培养基上很好地生长繁殖:蔗糖(或葡萄糖)10g,KH2PO40.2g,MgSO4.7H2O0.2g,琼脂20g,蒸馏水1000ml,pH自然(或7.4)请回答问题:(1)这种菌生长需要的碳源、氮源是什么?是什么菌?这种菌是什么营养类型?(2)这种培养基按化学组成、物理状态和特殊用途又分别属于什么培养基?5.营养物质进入微生物细胞的方式(看第一题)6.第五章:异养微生物的产能方式有哪几种?呼吸:有氧呼吸和无氧呼吸发酵1.微生物的代谢有哪些特点?2.什么叫Stickland?Stickland反应它是微生物在厌氧条件下将一个氨基酸的氧化脱氨与另一个氨基酸的还原脱氨相偶联的一类特殊发酵。6.列表比较有氧呼吸、无氧呼吸和发酵和异同。相同点:氧化分解有机物、产生(释放)能量。不同点:无氧呼吸发酵有氧呼吸底物被氧化分解的条件电子受体/氢受体底物被氧化分解的程度产生反应产生能量8.什么是生物固氮作用?它对生物圈的繁荣发展有何重要意义?能固氮的微生物有哪几类?微生物将大气中的分子氮通过固氮酶的催化还原成氨的过程称为生物固氮。根据它们与高等植物之间的关系,将其分为自生固氮菌、共生固氮菌、联合固氮菌及内生固氮菌。9.固氮酶作用的条件是什么?简述固氮作用的生化过程。固氮酶作用的必要条件:组分Ⅰ(固二氮酶,钼铁蛋白):含4个亚基,铁原子和钼原子。功能是还原N2成NH3。组分Ⅱ(固二氮酶还原酶,铁蛋白):含2个亚基,铁原子、不含钼原子。功能是传递电子到组分Ⅰ上。固氮生化过程:P13010.简述肽聚糖的生物合成过程。根据反应部位的不同,可分成三个合成阶段(一)在细胞质中的合成1.由葡萄糖合成N-乙酰葡糖胺和N-乙酰胞壁酸2.由N-乙酰胞壁酸合成“Park”核苷酸(二)在细胞膜中(上)的合成(三)在细胞膜外的合成(1)转糖基化作用(横向连接):形成B-1,4糖甘键(2)转肽作用(纵向连接)11.试述微生物代谢的多样性。而且微生物的代谢方式多样,既可以CO2为碳源进行自养型生长,也可以有机物为碳源进行异养型生长;既可以光能为能源,也可以化学能为能源。既可在有O2条件下生长,又可在无O212
条件下生长。代谢的中间体和产物更是多种多样,有各种各样的酸、醇、氨基酸、蛋白质、脂类、糖类等等。代谢产物更是多种多样,蛋白质、多糖、核酸、脂肪、抗生素、维生素、毒素、色素、生物碱,CO2、H2O、H2S、NO2-1、NO3-1、SO4-2等等都可是微生物的代谢产物。无氧呼吸是除氧以外的多种物质可被各种微生物用作最终电子受体,充分体现了微生物代谢类型的多样性。12.什么叫次生代谢?次生代谢的产物对人类有何重要意义?次级代谢:某些生物为了避免在初级代谢过程某种中间产物积累所造成的不利作用而产生的一类有利于生存的代谢类型。可以认为是某些生物在一定条件下通过突变获得的一种适应生存的方式。名词解释:微生物固氮作用、次级代谢(见上面题目)初级代谢微生物从外界吸收各种营养物质,通过分解代谢和合成代谢,生成维持生命活动所必需的物质和能量的过程,称为初级代谢。呼吸是多数微生物产能的重要方式,是指基质在氧化中释放出电子,通过呼吸链,交给最终电子受体氧或其他无机物,并在传递电子过程中产生ATP的生物化学过程。有氧呼吸是指以分子氧作为最终电子受体的生物氧化过程。无氧呼吸是指以无机氧化物或有机物代替分子氧作为最终电子受体的生物氧化过程。发酵有机物氧化释放的电子直接交给本身未完全氧化的某种中间产物(小分子有机物),同时释放能量并产生各种不同的代谢产物。第六章:3.什么是生长曲线?指出细菌生长曲线各时期的形态和生理特点及其实际应用。细菌接种到定量的液体培养基中,定时取样测定细胞数量,以培养时间为横坐标,以菌数为纵坐标作图,得到的一条反映细菌在整个培养期间菌数变化规律的曲线,称为细菌生长曲线。一条典型的生长曲线至少可以分为延迟期特点:代谢活跃、分裂迟缓对数期特点:细菌个体形态、化学组成和生理特性等均较一致,代谢旺盛、生长迅速、代时稳定。稳定期特点:细菌代谢活性降低,细菌衰老并出现自溶,产生或释放出一些产物,如氨基酸、转化酶、外肽酶或抗生素等。细胞呈现多种形态,有时产生畸形,细胞大小悬殊,有些革兰氏染色反应阳性菌变成阴性反应等。衰亡期特点:营养物质耗尽和有毒代谢产物的大量积累,细菌死亡速率超过新生速率,整个群体呈现出负增长。4.测定微生物群体生长的方法有哪些?试比较这些方法的优缺点。数量变化的测定:平板菌落计数法薄膜过滤计数法显微镜直接计数法缺点:不能区分死菌与活菌;不适于对运动细菌的计数;需要相对高的细菌浓度(6×108个/mL);个体小的细菌在显微镜下难以观察。生物量变化的测定:比浊法、重量法、DNA含量测定法、生理指标法8.什么叫防腐、消毒、灭菌和化疗?举例说明。消毒:杀死或灭活所有病原微生物(营养体细胞)。灭菌:杀死包括芽孢在内的所有微生物。防腐:防止或抑制霉腐微生物在食品等物质上的生长。化疗:杀死或抑制宿主体内的病原微生物或病变细胞。9.影响高温灭菌效果的主要因素有哪些?在实践中如何处理?12
10.治疗外伤使用的红汞、紫药水、碘酒、双氧水等药物的杀菌机制是什么?12.抗生素的抗菌机理是什么?举例说明。抑制细菌细胞壁合成;破坏细胞质膜;作用于呼吸链以干扰氧化磷酸化;抑制蛋白质和核酸合成等,抑制微生物的生长或杀死微生物13.微生物抗药性的主要表现在哪方面?细胞质膜透性改变,使抗生素不进入细胞或进入细胞后被细胞主动排出。药物作用靶改变。合成了修饰抗生素的酶(如:Fig.20.9)。菌株发生遗传变异,导致合成新的多聚体,以取代或部分取代原来的多聚体。14.为避免微生物出现抗药性,使用抗生素应注意什么?(1)第一次使用的药物剂量要足;(2)避免在一个时期或长期多次使用同种抗生素;(3)不同的抗生素(或与其他药物)混合使用;(4)对现有抗生素进行改造;(5)筛选新的更有效的抗生素。名词解释:巴斯德消毒法就是采用温和加热处理牛奶和其他对热特别敏感的食品的方法,既可以杀死其中可能存在的病原菌,又不损坏食品的营养和风味,以其发明者巴斯德命名。化学治疗剂、抗代谢物有些化合物在结构上与生物体所必需的代谢物很相似,以至可以和特定的酶结合,从而阻碍了酶的功能,干扰了代谢的正常进行,这些物质称为抗代谢物。抗生素是由某些生物合成或半合成的一类次级代谢产物或衍生物,它们在很低浓度时就能抑制或影响它种生物的生命活动,如杀死微生物或抑制其生长。高压灭菌利用密闭的高压蒸汽锅加热灭菌第七章:1.证明核酸是遗传物质基础的经典实验有哪几个?举出其中之一加以说明。一、DNA作为遗传物质:转化实验分别用降解DNA、RNA、蛋白质的酶作用于有致病性的S型菌细胞抽提物只有DNA被酶降解破坏的抽提物无转化活性DNA是转化所必需的转化因子大肠杆菌T2噬菌体感染实验二、RNA作为遗传物质生化提取分别获得含RNA的烟草花叶病毒蛋白质外壳(病毒1)和核酸(病毒2抗血清处理,证明杂种病毒的蛋白质外壳来自病毒1,而非病毒2,遗传物质是核酸(RNA)而非蛋白质2.基因突变有何特点?试用变量实验说明其随机性。P173特点:1)自发性2)随机性*3)稀有性4)独立性5)可逆性(回复性)6)稳定性7)可诱变性实验证据:三个经典实验(1)变量实验(2)涂布实验(3)影印实验5.转化和转导有何区别?接合和转导又有何区别?接合细胞与细胞的直接接触(由F因子介导)转导:由噬菌体介导a)外源DNA的来源及进入途径有差异b)决定因素也各有不同。12
6.F+、F-、Hfr和F’菌株有什么区别?F-菌株,雌性菌株:不含F因子,没有性菌毛,但可以通过接合作用接收F因子而变成雄性菌株(F+);F+菌株:F因子独立存在,细胞表面有性菌毛。Hfr菌株:F因子插入到染色体DNA上,细胞表面有性菌毛F′菌株:Hfr菌株内的F因子因不正常切割而脱离染色体时,形成游离的但携带一小段染色体基因的F因子,特称为F′因子。细胞表面同样有性菌毛。7.普遍性转导和局限性转导有什么区别?a)局限性转导被转导的基因与噬菌体DNA连接,与噬菌体DNA一起进行复制、包装以及被导入受体细胞中。而普遍性转导包装的可能全部是宿主菌的基因。b)局限性转导颗粒携带特定的染色体片段并将固定的个别基因导入受体,故称为局限性转导。而普遍性转导携带的宿主基因具有随机性。10.何谓菌种退化、复壮?如何防止菌种退化?菌种退化:菌种复壮:防止衰退措施:1)减少传代次数2)创造良好的培养条件;3)经常进行纯种分离,并对相应的性状指标进行检查;4)采用有效的菌种保藏方法11.简述常用的菌种保藏方法及其原理。保藏原理(1)要选典型菌种的优良纯种。(2)创造休眠的环境条件:低温、缺氧、干燥、缺营养等。保藏方法:名词解释:诱发突变人为地用某些物理、化学因素对生物体的DNA进行直接作用,突变以较高的频率产生。转化同源或异源的游离DNA分子(质粒和染色体DNA)被自然或人工感受态细胞(受体细胞)摄取,并得到表达的基因转移过程。转导由噬菌体介导的细菌细胞间进行遗传交换的一种方式,是指一个细胞的DNA通过病毒载体的感染转移到另一个细胞中。接合通过细胞与细胞的直接接触而产生的遗传信息的转移和重组过程。野生型营养缺陷型变异前的原始菌株称为野生型菌株。营养缺陷型一种缺乏合成其生存所必须的营养物(包括氨基酸、维生素、碱基等)的突变型,只有从周围环境或培养基中获得这些营养物或其前体物才能生长。原样型一般指营养缺陷型突变株经回复突变或重组后产生的菌株,其营养要求在表型上与野生型相同(即在基本培养基上能生长)。完全培养基凡可满足一切营养缺陷型菌株营养需求的天然或半组合培养基,称为~。基本培养基:仅能满足某微生物的野生型菌株生长所需要的最低组分的组合培养基,称为~。基因突变一个基因内部遗传结构或DNA序列的任何改变。质粒一种独立于染色体外,能进行自主复制的细胞质遗传因子,主要存在于各种微生物细胞中。1、如果两个不同营养缺陷标记(a-b-c+d+和a+b+c-d-)的菌株经混合后能产生在基本培养基平板上生长的原养型重组菌株,请设计一个实验来决定该遗传转移过程是转化、转导还是接合?12
2.质粒有哪些特点?1、可复制。2、少数可在不同菌株间发生转移。如F因子、R因子。3、受理化因素影响。4、某些具有与染色体整合与脱离的功能。如F因子。5、具有重组功能:可在质粒与质粒间、质粒与核染色体间发生基因重组3、自然遗传转化与人工转化之间有什么关系?为什么在一般情况下它们转化质粒的成功率有如此大的差别?1)在自然转化的基础上发展和建立的一项细菌基因重组手段,是基因工程的奠基石和基础技术。2)转化是否成功及转化效率的高低主要取决于转化(DNA)给体菌株和转化受体菌株之间的亲缘关系。通常情况下质粒的自然转化效率要低得多,人工转化质粒的转化效率高。第八章:2.为什么饮用水源必须检测大肠杆菌群?我国卫生部门对饮用水的细菌总数及大肠杆菌群量有何规定?我国卫生部门规定饮用水的标准:细菌总数:﹤100个/mL(37℃,培养24h)大肠菌群:﹤3个/L(37℃,培养48h)5.粮食、油料及食品上的微生物对人体有何危害?如何防止?对人体的危害:1)由于微生物的生长繁殖而腐烂、变质,不能再食用或使用;2)病原微生物进入人体的重要途径,引起传染性疾病3)很多微生物在食品、农产品上生长后会产生对人有害的毒素;防止微生物对食品等破坏的方法:1、严格杀灭有害微生物;2、添加少量无害的防腐剂;3、低温保藏;4、干燥保藏;5、密封除氧保藏等。6.什么是生物体的正常菌群?试分析肠道正常菌群与人体的关系。正常菌群:生活在健康生物体各部位,数量、种类较稳定,一般是有益无害的微生物,称为生物体的~关系:正常菌群通过肠道获取营养,通过排阻、抑制外来致病菌;提供许多人体所必不可少的维生素、氨基酸等营养物对人体作出贡献;肠道中的正常菌群,如大肠杆菌一旦进入泌尿系统,引起尿路感染。人体表面的正常菌群,一旦它们进入伤口也会引起感染。8.氮素在自然界中是如何循环的?微生物在其循环中有何作用?12.举例说明微生物之间的6种类型的相互关系。一、互生关系土壤中的纤维素分解菌与固氮菌:双方有利金黄色葡萄球菌与嗜血流感菌:一方得利人体肠道正常菌群与人的互生关系二、共生关系细菌与原生动物间的共生根瘤菌与豆科植物间的共生三、寄生关系噬菌体—细菌四、拮抗关系如制作泡菜、青贮饲料:乳酸细菌抑制腐败菌五、竞争关系如各种霉菌与野生大型真菌六、捕食关系原生动物吞食细菌和藻类13.试述微生物与水体富营养化作用,你认为此类污染如何防治?水的富营养化藻类等过量生长,产生大量的有机物。异养微生物氧化这些有机物,耗尽12
水中的氧,使厌氧菌开始大量生长和代谢。分解含硫化合物,产生H2S,从而导致水有难闻的气味。鱼和好氧微生物大量死亡,水体出现大量沉淀物和异常颜色。引起水体富营养化的藻类除通过消耗水中的氧气危害养殖业外,很多藻类还能产生各种毒素,使动物得病或死亡,防治:14.试用一些典型例子说明微生物与环境之间的相互关系。15.微生物在生态系统中的地位怎样?微生物可以在多个方面但主要作为分解者而在生态系统中起重要作用1、微生物是有机物的主要分解者;2、微生物是物质循环中的重要成员;3、微生物是生态系统中的初级生产者;4、微生物是物质和能量的贮存者;5、微生物在地球生物演化中的作用。16.试述微生物在碳氮循环中的作用?名词解释:微生物生态微生物群体与其周围生物和非生物环境之间相互关系。正常菌群(见上面题目)正常菌群失调症正常菌群→条件致病菌→正常菌群失调症(疾病)指外界条件的改变使正常菌群内部的相互制约关系被破坏。互生两种可以单独生活的生物,当它们生活在一起时,通过各自的代谢活动而有利于对方,或偏利于一方的一种生活方式。共生两种生物共居在一起,相互分工协作、相依为命,甚至形成在生理上表现出一定的分工,在组织和形态上产生了新的结构的特殊的共生体。拮抗关系某种生物产生的代谢产物可抑制它种生物的生长发育,甚至将后者杀死。第十章:2.微生物的分类单位是什么?微生物的种是怎样命名的,举例说明之。分类单位:命名:双名法:学名=属名+种名加词+(首次定名人)+现名定名人+现名定名年份种名加词:又称种加词,表示一个物种的次要特征,常用拉丁文形容词表示,全部小写。如:大肠杆菌Escherichiacoil(Migula)CastellaniChalmers19193.微生物分类的经典方法主要有哪些?新技术和新方法又有哪些?12
4.用于微生物分类的遗传特征有哪些?其基本原理是什么?6.目前主要的细菌分类系统有哪些?7.为什么选用16SrRNA或18SrRNA进行生物进化和系统分类研究?16SrRNA被普遍公认为是一把好的谱系分析的“分子尺”:1)rRNA具有重要且恒定的生理功能(参与生物蛋白质的合成过程);2)rRNA在细胞中含量大(约占细胞中RNA的90%),也易于提取;3)16SrRNA分子量大小适中,便于序列分析;4)在16SrRNA分子中,具有高度保守的序列区域。5)16SrRNA普遍存在于原核生物中(真核生物中其同源分子是18SrRNA)。因此它可以作为测量各类生物进化的工具。名词解释:生物系统学通过追溯系统发育,推断进化谱系,这样的分类学称为生物系统学。12