微生物检测室质控准则

微生物检测室质控准则质量控制相关定义：质量控制：满足质量要求的操作技术和活动。质量保证：为了满足实验室质量要求，制定相应的计划，实施证明（记录）所进行的一系列的系统活动。外部质量控制：通过互相校准和检验对实验室的操作和结果所进行的控制。内部质量控制：实验室内部采取的以对比分析、跟踪以及相关方法，对实验室工作的连续性控制计划。一、实验室要求1、人员要求相应岗位的人员，应具备相应的技术能力，相应的技术能力证明（证书及证件）。微生物检验室因有相应技术能力的人负责室内的技术工作。2、房屋条件要求房屋要求：具有适宜、足够宽敞、通风、有良好的照明。房屋内墙面及地等应采用易于清洁的材料，保持房间清洁。房间的设置，以其开展的工作内容加以分用，设立专用房间。房间的大小还应根据从事实验人员的进入数量上加以考虑。3、环境设施要求专用房间的温湿度控制与记录。 特殊环境的微生物指标控制与记录。专用工作室的标准操作规程和定期的检测校准程序。4、空气洁净度指标：检测频率及检测方法。一次/月；空气细菌检测（沉降法）。二、设备/仪器要求总则满足开展相关检测项目的要求，制定相关设备/仪器的作业指导，设备/仪器的检定校准，特别是新购仪器的检定。设备/仪器分别以送检、送校、自检、自校表示其所检定的状态，设备/仪器的运行检查计划，设备/仪器的运行状况及适用记录，维修后设备/仪器的再校准或检查，并具有完整的检查记录。微生物检验常用需监控的设备和仪器：培养箱、干燥箱、高压灭菌锅、冰箱、温度计、紫外灯、显微镜、天平。1、实验室必须要有工作温度计和参照温度计。工作温度计：用于日常温度检查。参照温度计：用于校正工作的温度计。温度计运行检查：一般可采用一次/半年的运行检查。日常检查、校准检查、运行检查等都应做好相应的技术记录。2、培养箱和冰箱的温度控制根据培养物性质及温度要求，培养箱应分别设置（以用途和温度分）。培养箱的温差要求，一般显示值与实测值相差不大于±1℃，箱体内各点温差（内部的温度衡性）以及温度波动同样不大于±1℃。 温度监控方法：可将工作温度计置甘油中，放入待测箱体内，观察工作温度计的温度，做好1-2次/天监控记录。3、高压灭菌锅控制生物指示菌法、化学变色纸片及高压灭菌锅温度计等方法进行检测。生物指示菌是一种高压灭菌锅的效果显示法。高压灭菌锅由专人按作业指导书操作，并做好每一次的作业记录。高压灭菌锅使用时，内置物品不能太多，单位体积内的内容物（每瓶内的培养基）不能太多。同时应注意内容物不同耐受温度。总的暴露时间最好不要超过45min。高压灭菌锅的温度控制：高压灭菌锅日常工作记录应包含以下信息：高压灭菌的材料、开始时间、压力/温度、取出时间、高压灭菌胶带的颜色变化（日常常用无菌培养代替）高压灭菌锅温度波动范围：110，115和121±2℃。高压灭菌锅校准周期一般在半年。4、干燥灭菌箱温度控制干燥灭菌箱日常工作记录中应包括以下信息：开始的时间、到达灭菌温度时的时间、取出的时间（或关闭时间）。干燥灭菌箱的温度校准：用参考温度计进行温度测试。干燥灭菌箱温度要求与精确度：160±5℃或180±5℃。前者为灭菌2h，后者为30min。干燥灭菌箱校准时间一般为一年。5、紫外线灯的控制检测方法：仪器测试法和生物测试法。前者是通过专用仪器检测紫外灯管发射的紫外光强度。国家消毒技术规范中表明在距离 照射1米处，要求其强度为90。生物测试法：采用一定的菌培养物，经一定比例稀释，菌量控制在200-250个/0.5ml，涂布平板在紫外灯光下照射2min，同时设置普通光源的对照组，后置37℃48h，计算其杀灭率。要求杀灭率达99%。6、显微镜的控制显微镜应制定作业指导书，日常维护记录及自校记录。显微镜应置于无振动，避免灰尘，防潮等要求的环境。7、天平的管理天平放置要求：无振动、无气流影响及水平台面上。天平要有使用及运行检查记录。天平作为计量仪器是列入国家强制检定的范围，一般1次/年进行检定。运行检查频率按运行计划或按产品（天平生产厂家）给出的标准重量单位进行对照三、培养基质量控制正确进行培养基质量控制，并作为一项经常性的工作，建立完整的检验资料，在整个检验质控制体系中所必须具备的文件资料。1、培养基的分类按其成分分类：有天然培养基和合成培养基。 按用途分类：基础培养基、增菌培养基、选择性培养基、鉴别培养基及厌氧培养基。按培养基的形态分类：液体培养基、流体培养基、半固体培养基及固体培养基。根据培养基的剂型不同分类：新鲜配制培养基和干燥培养基两种。2、常用培养基的质量控制检验项目与方法：1）对新批号的干燥培养基物理、化学及生物学指标鉴定A：感官（外观）研细程度和颜色（溶解前后），透明度，杂质等B：PH测定，按各种培养基要求的PH±0.2C：生物学指标检定，被检培养基相应细菌生长率测试；菌落大小及特征的检测。2）生长率测试：适用于液体和固体培养基，将菌培养液，用生理盐水做倍比稀释，取合稀释度进行平板计数或接种被检的培养基试管，同时以按相关的培养基国标配方新鲜配制的培养基进行对照。不低与10%。3）菌落大小测试：划线分离测试菌，取10个菌落测量直径大小，其直径均值与新鲜配制培养基无统计学差异。3、常用培养基质量标准外观和理化标准：干粉颜色：淡黄色粉末或呈现本培养基特有的颜色 溶解后培养基色泽：清晰透明（含琼脂除外）淡黄色或特有的色泽。灭菌后的培养基PH：7.2±0.2为多，个别弧菌检验用培养基pH值偏高为8.0±0.2。生物学指标：菌落特征及菌落大小。4、培养基保存环境制成的培养基保存环境为0-4℃冰箱，如制成平板则用塑料袋包装置冰箱保存，干燥培基干粉含有活性物质、遇热易分解的物质应仔细查看存放条件，多数也须放在2-8℃条件下保存。有的培养基则以存放于10-15℃条件为易。如含有高浓度胆盐的培养基。四、培养基配制用蒸馏水的控制检测要求：微生物检验用蒸馏水的特定电导率标准为＜10ms/m，未见细菌指标，蒸馏水的PH应在6.4-7.0之间。。检测频率：1次/每月。蒸馏水应做好相应的质量控制，记录检测结果。五、容积的控制通过一定的控制方法，保证高压灭菌后的稀释剂满足标准用量。采取称重法来测定蒸发量，体积100ml的稀释剂起始重量为101g。高压后体积偏差不得超过1%。采取先高压后定量分装，可避免因高压造成的体积误差。对保存的定量液体应在使用时，注意补充容积。 吸管的控制：通过小计量容器校准后使用。小计量容器吸管、容量瓶、量筒等玻璃器皿，校准周期一般为1-2次/一年。小计量容器日常使用检查可每周进行一次，包括容器的完整性。并做好相应的记录。