海洋生物学实验讲义巩宁

海洋生物学实验讲义（环境科学与工程学院海洋科学、海洋生物资源与环境专业）巩宁2011.1051 一、本课程的性质和任务海洋生物学是海洋科学的一门重要的基础学科，为海洋科学、海洋生物资源与环境专业的必修课。共安排课堂理论教学和实验二个教学环节，通过实验环节的系统学习，使学生能够具备初步的分析相关问题和实验研究的能力，为将来的相关工作和进一步深造奠定良好的海洋生物学基础。二、课程简介本课程是高等学校海洋科学、海洋生物资源与环境专业本科三年级的学位课——“海洋生物学”的实验环节。与理论课内容同时或在其后开设。通过实验使学生获得感性认识，深入理解和应用“海洋生物学”课程的概念、理论，并能灵活运用所学理论知识指导实验。培养学生仔细观察进而分析判断实验现象的能力，能正确诚实记录实验现象与结果；在分析实验结果的基础上，能正确地、独立地撰写实验报告；具有解决实际问题的实验思维能力和动手能力。通过实验掌握海洋生物活体标本和固定标本的制作和观察方法，能够识别常见的海洋生物并对其生态适应的原理和方法进行初步的分析。51 目录实验一海洋生物的显微镜观察附显微镜基本知识4实验二海洋浮游植物形态观察10实验三海洋浮游动物形态观察15实验四海洋浮游生物调查方法19实验五潮间带实习及底栖海藻采集23实验六底栖海藻标本制作与保存25实验七底栖海藻形态观察27实验八海洋底栖动物形态观察33实验九海洋游泳动物形态观察36实验十海洋微生物宏基因组提取39附录大连沿海常见底栖海藻蜡叶标本图片………….……………….4251 实验一海洋生物的显微镜观察实验目的1、了解普通光学显微镜的构造。2、学习显微镜的正确使用维护。3、学习海洋生物形态的观察方法。材料和器具1、显微镜、载玻片、盖玻片、擦镜纸、香柏油、二甲苯、吸水纸、吸管。2、生物标本制片、海水水样实验内容（一）显微镜使用1、取镜打开镜箱、右手握住镜臂，取出显微镜，用左手托住镜座放于平稳的实验台上。镜检者姿势应端正，一般左眼观察，右眼便于绘图或记录。观察时两眼必须同时睁开，以减少疲劳。2、调光一般采用散射光，如光线弱时可用日光灯光作光源。（1）将低倍镜转至镜筒下方，旋转粗调节器，使镜头与载玻台相距0.5cm。（2）左眼看目镜，观察光源强弱，调节反光镜（一般用平面镜，若光线弱时可用凹面镜）、光圈与升降聚光镜使视野内光线均匀明亮。若用显微镜灯，则调节光源开关、光圈及升降聚光镜即可。3、低倍镜观察51 将待测标本置载物台上，用卡尺夹住，移动推动器，使观察标本处于物镜正下方。转动粗螺旋，使载物台上升（或镜筒下降）至距标本0.5cm处，由目镜观察，然后慢慢下降载物台（或上升镜筒）直至出现模糊像后，用细调节器调至物像清晰为止。4、高倍镜观察低倍镜观察至清晰物像后，将观察的部位移至视野中央，转换高低镜，然后用细调节器调至物像清晰。5、油镜观察（1）在玻片标本的镜检部位滴一滴香柏油，然后将油镜转至正下方（2）小心上升镜台（或下降镜筒），从侧面注视镜头慢慢浸在香柏油中，几乎与标本相碰。应特别小心不能将油镜镜头压在标本上，更不能用力过猛以免压碎玻片或损坏镜头。（3）由目镜观察，全开虹彩光圈，调节光源使视野光线达到最亮。（4）慢慢调节粗调节器，直至视野出现模糊物像为止，然后用细调节器调至清晰。如油镜头已离开油层而未见物像时，必须重复上述步骤。（5）观察完毕，下降载物台。先用擦镜纸擦去镜头上的油，然后再用一张擦镜纸沾少许二甲苯，擦去镜头上残留油迹，最后用一张擦镜纸擦去残留的二甲苯。切忌用手或其它纸擦镜头，沾有香柏油的载玻片用废纸将油擦干，放在指定的地方以便统一处理。（二）生物标本制片分别在低倍镜、高倍镜和油镜下观察。青霉装片、酵母菌装片、枯草杆菌涂片（三）海水水样制片分别在低倍镜、高倍镜和油镜下观察。51 （四）显微镜复原：将光源调至最小，关闭电源，拔下插头，将连线折好收回，盖上防尘罩。做好使用登记后将显微镜放回。实验报告1、绘出你所观察的标本片生物示意图。2、为什么用油镜（100x）观察时要滴加香柏油？3、油镜观察后如何处理镜头？附显微镜基本知识显微镜是微生物研究的工具，显微镜种类繁多，有光学显微镜、相差、暗视野、荧光及电子显微镜等。但它们的原理和结构基本相同。下面以普通光学显微镜为例简要介绍其原理及结构。（一）原理一般显微镜的光学系统由两部分组成（图1-1）（1）成像系统由目镜（a）、棱镜(b)、物镜（c）组成。物镜将标本作第一次放大，然后目镜再将第一次放大的实像作第二次放大。棱镜是专为改变光路用的，物镜光束经棱镜后转向与垂直方向成45°角。（2）照明系统由聚光镜（d）、可变光栏（e）、集光镜（f）和光源（g）组成。光源可选用自然或人工光源，人工光源由钨卤素灯发出，经集光镜平行光，然后聚光镜将外来光线聚在标本上，从而照明了标本，便于观察。（二）结构51 由光学部分（反光镜、聚光器、物镜和目镜）和机械部分（镜座、镜筒、镜臂、转换器、镜台、推动器、粗动螺旋和微动螺旋）组成（图1-2），主要部分件有：（1）目镜通常备有5×、10×、16×，一般选用10×。（2）物镜它对分辩力有着决定性影响。一般有低倍镜（10×）、高倍镜（40×）和油镜（100×），通常按顺序安装在转换器上。（3）聚光镜具有使样品明亮的集光作用，同时还影响物像的分辩力和反差，若将聚光镜的光圈开放到超过物镜的数值孔径时，便产生光斑，若收扰光圈，分辩力下降但反差增大。常用聚光镜为二透镜，N.A=1.2，并带有可变光栏和滤光片架。（4）载物台又称镜台，载放样品用。一般都装有一个推进器，可由移动手轮作横向或纵向移动载玻片。（5）粗调旋转是调节载物台或镜筒上下移动的装置。细调旋扭转动一圈的升降值为0.2mm，刻值为0.002mm。（二）显微镜性能1、数值孔径显微镜分辩力的高低决定于光学系统的各种条件，但起决定性影响的是物镜。物镜的性能可用数值孔径（N.A来表示）。数值孔径又叫开口率，它与显微镜的分辩力成正比，与焦深成反比，与镜像亮度平方根成正比。N.A=n.sina2式中：n——物镜与标本间的介质折射率。a——物镜的镜口角，即光源投射到透镜上的光线和轴之间的最大夹角（图1-3）。51 事实上，a总是小于180°，所以sina的最大值小于1。由于空气的折射率为1所以，干燥物镜的数值也径总是小于1，一般为0.05-0.95，油镜物镜如用香柏油（折射率为1.515）作介质，则数值孔径最大可接近1.5。虽理论上数值孔径的极限等于所用介质的折射率，但实际上从透镜的制造技术看是达不到的。退常在实用范围内，高级油镜的最大数值孔径为1.4（图1-4）。2、分辨力分辨力系指分辨物体细微结构的能力。通常用（D）表示，D=λ，可见光波长为0.4-0.8μm，平均为0.55μm。若2N.A用数值孔径为0.65的物镜，则D=0.55=0.44μm这表明被检物体2×0.65或其上某结构在0.44或其上某结构在0.44μm以上时，以上时可被观察到，若小于0.44或其上某结构在0.44μm以上时，就看不清楚。若用数值孔径为1.25物镜，则D=0.22或其上某结构在0.44μm以上时，若被被检物大于此数值，即可视见，由此可见D值愈小，分辨力愈高，物像愈清晰。因此降低波长，增大折射和加大镜口角可提高分辨力。紫外光显微镜和电子显微镜就是利用短波光和电子波来提高分辨力以检视较小的物体。3、放大倍数显微镜放大倍数（V）等于物镜放大率（V1）和目镜放大率（V2）的乘积V=V2×V2。51 4、焦深在显微镜下观察一个标本时，焦点对在某一像面时，物像最清晰，这像面为目的面。在视野内除目的面外，还能在目的面的上面和下面看见物像，这两个面之间的距离称为焦深。物镜的焦深和开口率及放大率成反比，即开口率和放大率愈大，焦深愈小。因此调节高倍镜比调节低倍镜要仔细，否则容易使物像滑过而找不到。图1-1显微镜基本结构51 实验二海洋浮游植物形态观察预习报告1、蓝藻门、硅藻门、甲藻门、绿藻门的主要特征有哪些？2、海洋微藻有哪些形态特征与其浮游生活相适应？实验目的了解常见海洋微藻种类，掌握其分类特征材料和器具1、显微镜、载玻片、盖玻片、擦镜纸、香柏油、二甲苯、鲁哥氏液、吸水纸。2、螺旋藻、新月菱形藻、塔玛亚历山大藻、青岛大扁藻实验内容分别用低倍镜、高倍镜观察各门藻类结构（一）蓝藻门钝顶螺旋藻SpirulinaPlatensis：蓝藻门、蓝藻纲、藻殖段目、颤藻科、螺旋藻属Spirulina。藻体丝状，有规则螺旋，螺距的大小因种而异。藻体呈蓝绿色。细胞侧壁外胶质鞘不明显。常与丝状藻如颤藻混生，主要鉴别特征是藻体有规则的螺旋。常见形态如图：51 图2-1螺旋藻形态（一）硅藻门新月菱形藻Nitzschiaclosterium：隶属硅藻门、羽纹硅藻纲、管壳缝目、菱形藻属，中文名新月菱形藻，俗称小硅藻。暖温性海洋硅藻类，分布于世界各海水、半咸淡水水域，我国各海区均有出现。藻体为单个细胞。细胞壁壳面中央膨大，纺锥形，两端渐尖，都朝同一方向弯曲，呈月牙状；细胞中央具一细胞核，有色素体2个，位于细胞中央细胞核两侧：细胞体褐色。细胞体长12～23微米、体宽2～3微米。51 图2-2新月菱形藻1000X（一）甲藻门塔玛亚历山大藻Alexandriumtamarense：甲藻门，膝沟藻目，屋甲藻科，亚历山大藻属。细胞球形，长略大于宽。细胞长20-42μm，宽18-40μm。此种常形成有毒赤潮。该藻分布较广，在较暖的海域里发生赤潮的频率较高，我国海域在南海大鹏湾、厦门海域和胶州湾均有发现。图2-3塔玛亚历山大藻1000X（二）绿藻门青岛大扁藻Platymonashelgolandica：51 绿藻门，绿藻纲，团藻目，衣藻科，扁藻属，体长在16-30微米之间，宽12-15微米，厚7-10微米。单细胞椭球形，杯状色素体，4条鞭毛分成两组。图2-4青岛大扁藻1000X，右：鲁哥氏液染色，示鞭毛杜氏盐藻(Dunaliellasalina),属于绿藻门,绿藻纲,团藻目。是一种单细胞绿藻,能在0.5～5.5mol/LNaCl的盐浓度中生存。藻体单细胞，具有2条等长的鞭毛，顶生于藻体的前端，比体约长1/3。叶绿体杯形，近基部有一个较大的淀粉核。有一个大的眼点，位于藻体的上部。盐藻因无固定的纤维质细胞壁包裹，在活动时，形状梨形、椭圆形、长颈形等变化不一。图2-5杜氏藻属Dunaliellaqh外形51 实验报告1、绘出你所观察的各门代表物种的示意图（至少2种），并写出其分类地位。51 实验三海洋浮游动物形态观察预习报告栉水母门、毛颚动物门主要结构特征实验目的了解常见海洋浮游动物种类，掌握其分类特征材料和器具1、显微镜、小烧杯、载玻片、盖玻片、擦镜纸、香柏油、二甲苯、放大镜、吸管、镊子。2、箭虫、球形侧腕水母浸制标本3、大型水蚤活体实验内容在放大镜下观察各浮游动物标本，在显微镜下观察外部结构。强壮箭虫（Sagittacrassa）：毛颚动物门(Chaetognatha)、箭虫属(Sagitta)。51 体细长，雌雄同体，生活时透明，固定后一般呈乳白色，身体被体腔内的横膈膜分成头部、躯干部及尾部。头部被一层可以伸缩的表皮称为头巾包围。头部左右两侧长有4-12根强大的几丁质呈镰刀状的颚毛。眼一对，位于头部中央。纤毛环位于头部背面脑的后方或向后方延伸至躯干部的前部，是由数列纤毛细胞形成的环状构造。触毛斑是体表有成堆的许多支持细胞及位于其中的纤毛细胞形成的略呈圆形或椭圆形的斑状点，分布于躯干背面，对称。纤毛环和触毛斑很容易染色。从头颈部横膈膜至肛门为其躯干部。从头颈部开始至躯干部，其表皮组织通常有一层扁平的细胞组成，在一定的部位增厚为许多层，形成泡状组织。左右两侧有侧鳍，鳍内分布有鳍条。鳍条没有达到鳍的基部，形成无鳍条带。若有两对侧鳍，则前面的称前侧鳍，后一对横跨于躯干部及尾部之间，成后侧鳍。无游泳功能，仅有平衡身体的作用。尾末端有三角形尾鳍，也有鳍条为两侧有不同形状的突起，是贮精囊，仅在个体性成熟的时候才发达。图3-1强壮箭虫，右：头部400X图3-2箭虫的形态（仿各作家）A.背面观；B.头部腹面观；C躯干部横切面51 球形侧腕水母（Pleurobrachiaglobosa）：栉水母门，触手纲，球栉水母目，体呈球形，具有细长分枝且能所如触手鞘中的触手。图3-3球形侧腕水母触手面大水蚤（Daphniamagna）：节肢动物门甲壳纲枝角目。躯体包被于两壳瓣中，体不分节，头部具一个大复眼。第二触角强大为双肢型，后腹部结构、功能复杂，胸肢４－６对兼具滤食、呼吸功能。对毒物十分敏感，是污水毒性试验的合适动物，同时可做污染水体的监测生物。此外，在药物微量测定、繁殖、育种与变异等科学研究以及生物学教学上被广为利用。是池塘、湖泊中的常见种。在低盐度（<5‰）水体中也有分布。51 图3-4大型水蚤（上：外形；下：结构）实验报告绘观察到的任意一种浮游动物外形图并写出其拉丁名51 实验四海洋浮游生物调查方法（认知实验）实验目的了解并初步掌握海洋浮游生物的调查方法掌握常用海上样品采集工具的使用方法材料和器具2.5升球盖式采水器、浅水I～III型浮游生物网、显微镜、解剖镜、载玻片、盖玻片、标本瓶、培养皿、吸管、镊子、解剖工具、甲醛溶液、碘液实验内容1、海洋浮游生物调查简介海洋浮游生物调查的主要目的是查明海洋中浮游生物的种类组成、数量分步和变化规律，为研究海洋生态系统的组成、物质循环和能量流动，合理开发和利用海洋资源、保护海洋环境提供基本资料。浮游生物调查的内容包括浮游植物的种类组成、数量分布以及浮游动物的生物量、种类组成和数量分布；调查分为定性和定量调查，前者是调查海区中浮游生物的种类组成和分布状况，后者是调查海区中浮游生物的数量、季节变化和昼夜吹着移动等情况，特别是海区优势种类的数量和分布状况的变化。从方法来看，浮游生物调查有大面观测（掌握浮游生物的水平分布及变化规律）、断面观测（掌握浮游生物的垂直分布情况）和定点连续观测（昼夜连续观测）几种。2、球盖式采水器的使用51 球盖式采水器按照Niskin型采水器设计，适用于河流、湖泊和海洋等任意深度采样。实验时按照需要采集的层次，逐一挂好采水器和使锤，通过绳索将采水器（两端卡盖打开）放入水中，入水后水流将贯穿瓶体，待沉入指定深度后，下放使锤令卡盖关闭，封闭水样。将采水器提出水面，完成采样过程。开动绞车提出采水器，将采到的水样装入标本瓶中。1-内侧拉钩；2-球盖；3-金属环；4-金属活页；5-把手；6-弹簧；7-固定夹螺丝；8-气门；9-触杆；10-上挂钩；11-弹簧片；12-下挂钩；13-钢丝绳；14-橡皮拉筋；15-采水筒；16-出水嘴；17-钢丝绳槽；18-使锤图4-1球盖式采水器51 1、浅水Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型浮游生物网的使用（垂直拖网）浅水Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型浮游生物网适用于30m以内浅海域浮游生物样品的采集。浅水Ⅰ型网主要用于采集大、中型浮游动物及鱼卵、仔稚鱼等；Ⅱ型网主要用于采集中、小型浮游动物和夜光虫等；Ⅲ型网主要用于采集小型浮游生物，如硅藻、原生动物、小型浮游幼虫等。（1）下网：每次下网前应检查网具有否破损(发现破损应及时修补或更换网衣)，检查网底管是否关闭。放网入水，网口入水后(下网速度一般不能超过1m/s，以钢丝绳保持紧直为准，当网具接近海底时(绞车应减速，当沉锤着底，钢丝绳出现松弛时，应立即停车，记下绳长。（2）起网：网具到达海底后可立即起网。速度保持在0.5m/s左右。网口未露出水面前不可停车，网口离开水面时应减速并及时停车，谨防网具碰刮船底或卡环碰撞滑轮，使钢丝绳绞断，网具失落。（3）样品的收集：把网升至适当高度，用冲水设备自上而下反复冲洗网衣外表面（切勿使冲洗的海水进入网口），使粘附于网上的标本集中于网底管内；将网收入甲板，开启网底管活门，把标本装入标本瓶，再关闭网底管活门，用洗耳球吸水冲洗筛绢套，如此反复多次，直至残留标本全部收入标本瓶中。（4）样品固定：按样品体积的5%量加入甲醛溶液。51 浅水Ⅰ型浮游生物网浅水Ⅱ型浮游生物网浅水Ⅲ3型浮游生物网1-过滤部（细帆布）1-头锥部1-过滤部（细帆布）2-过滤部（筛绢）2-过滤部2-过滤部（筛绢）3-网底部3-网底部3-网底部图4-2浅水浮游生物网51 实验五潮间带实习及大型海藻采集预习报告阅读“marinebiology”chapter11“Betweenthetides”ANDCAGINGEXPERIMENTS实验目的1、熟悉大连海滨的自然环境，理解潮汐现象和潮汐活动规律，了解潮间带常见的动植物种类及其形态特征、生活习性、分布特点、环境的适应等；掌握观察海滨生物的基本方法并记录观察结果；了解采集动植物标本、鉴定和制作标本的方法。2、 培养科学态度，注重理论知识与实践结合；锻炼和培养观察问题、分析问题和解决问题的能力。3、 锻炼和培养学习毅力和组织工作能力，吃苦耐劳的工作作风和严明的组织纪律性附录实习报告模板专业班级姓名学号成绩实习地点：实习时间（阳历/阴历）：实习目的：51 实习地点水文要素分析：水温：潮时：浪高：经纬度：海岸基底：预习内容及问题：实习记录：实习总结：1、提交预习报告及实习报告。2、请认识、总结出大连海滨至少1条3个营养级以上的食物链实验六底栖海藻标本制作与保存51 预习报告熟悉底栖海藻标本制作的方法，阅读文献：《海藻标本的采集、制作和保存》并写出文献记录实验目的学习底栖海藻蜡叶标本的制作方法材料工具1、潮间带采集的完整的底栖海藻2、标本盘及沥水板、道林纸、医用纱布（裁剪成4开，即长78cm，宽54cm）、吸水纸（4开的粗糙草纸）、长镊子、解剖针、标本夹、绳子、大、小搪瓷盘、清洁海水、水桶等每组：托盘（1个），镊子（1把），纱布（32开，2块），道林纸（16开，4张），吸水纸（50张），铅笔公用：水桶（海水：淡水=1:1）1桶，标本夹1套，绳子实验内容（一）蜡叶标本的制作将采来的标本倒入大白搪瓷盘中，用海水洗净。51 放入标本盘中的托盘上，盘内之水大约放到盘高的1/2-2/3。水为一半海水一半淡水。为了避免腐烂或有盐析出，先把标本纸两面都湿润，放在滤水板上，取海藻藻体放置于标本纸上，用镊子及解剖针尽量使其伸展，分枝自然，接近自然状况。若分枝过多过繁，可以适当除去一些。整理就绪后，慢慢将沥水板抬高，离开水面，然后将标本自托盘上取下，晾去水分，按一定方向（即大小纸张放置合理以节省地方）放置于下面垫有一只标本夹的吸水纸上，全部放好（即标本盖满吸水纸）后，盖上一张纱布，然后再放几张吸水纸，可继续进行制作。当制作的标本及所用的吸水纸达到一定厚度时，盖上另一只标本夹，施以一定压力，两只标本夹的两头用绳子绑起来，在标本夹上面加一重物以加快水分吸收。头两三天，每天换吸水纸1-2次，以后每天换一次，一般情况下5、6天就完全干了。换下的吸水纸在阳光下晒干后以备再用。（二）蜡叶标本的整理和保存1、标签的制作：按照以下格式书写制作标签编号：学名：采集地点：采集时间：采集者：蜡叶标本干后一般可粘在纸上，对于干后粘不牢的标本需用胶条粘贴其主要部分，以免标本脱落。标本经分类鉴定后制作标签贴于标本右下角。可采用塑封长期保存。保存柜中应防潮并放置少量樟脑球以防霉，室内应保持干燥和清洁。实验报告写出所制作标本的分类地位，提交1-2个认为制作精美的标本实验七底栖海藻形态观察51 预习报告熟悉红藻门、褐藻门及绿藻门底栖海藻的主要特征实验目的通过对潮间带主要大型底栖海藻形态和结构的观察，了解各门海藻的主要形态特征材料和器具1、实验材料：红藻门、褐藻门及绿藻门大型底栖海藻液浸标本2、实验器具：显微镜、小烧杯、载玻片、盖玻片、解剖工具、纱布、吸水纸、香柏油、二甲苯、吸管实验内容（一）绿藻门石莼目石莼科石莼属Ulva孔石莼U.pertusa藻体为多细胞叶状体，由2层细胞组成，基部由营养细胞延伸成假根丝，形成固着器，固着于岩石上。细胞内有1个细胞核和1个杯状色素体，其中含有淀粉核。表面观（左）与切面观（右）如下图：图7-1石莼显微结构（左、中：表面观；右：切面观）（二）红藻门(1)石花菜目石花菜科石花菜属Gelidium51 藻体直立，具有圆柱状至扁平状两侧羽状分枝的主干。等世代交替，四分孢子呈十字形分裂。图7-2石花菜显微结构1部分藻体横切面；2囊果切面观;3四分孢子囊表面观;4四分孢子囊切面观;5精子囊小枝(2)隐丝藻目蜈蚣藻科蜈蚣藻属Grateloupia藻体直立，直立枝扁平，两缘生羽状分枝，基部为盘状固着器，整个藻体表面平滑，柔软，紫红色。四分孢子囊十字形分裂，埋藏于藻体皮层内，包被囊果的皮层细胞上开一孔51 图7-3蜈蚣藻显微结构A藻体的一部分;B四分孢子囊;C藻体下部分枝的横切面(3)杉藻目海头红科海头红属Plocamium藻丝直立，由盘形固着器或匍匐枝生出直立枝。直立枝自由分支，呈亚柱形或稍扁，合轴分支。双叉分支栉齿状，在分支的近轴或远轴上有连续互生栉齿，（四分孢子囊带形分裂，生于最末小枝的中肋两旁，形成扁平的小孢子囊枝，成熟囊果无柄，膨大突出于藻体的一边，无囊孔。）图7-4海头红显微结构51 A部分藻体外形;B小枝放大;C小枝末端生长点;D枝的内部构造(纵切面示中肋);E合轴分枝示意图;F果胞枝;G四分孢子囊枝;H四分孢子囊枝横切面;I囊果纵切面2.褐藻门（1）墨角藻目马尾藻科马尾藻属Sargassum马尾藻分为固着器、主干、“叶”三部分。固着器为圆锥状、盘状、瘤状、假盘状假根状等：主干圆柱状，向两侧或四周分枝，“叶”扁平或棍棒状，全缘或有锯齿。气囊和生殖托都生在叶腋处。气囊球形，椭球形或管形。生殖托纺锤形或圆锥形。海蒿子Sargassumconfusum：藻体褐色，高一般30~60cm，可达1m。固着器盘状，上生圆柱形的主干。主干单生，偶有双生或三生的现象。多年生。藻叶的形状初生时为披针形、倒卵形或倒披针形，长5~7cm，宽2~12m，革质全缘，生长不久即凋落。次生叶线形、披针形、倒披针形、倒卵形、狭匙形或羽状分裂的叶。气囊多生在末端小枝上。雌雄同株。生殖托或生殖枝从丝状叶腋间生出。示意图如下：51 图7-5海蒿子Sargassumconfusum藻体;b.藻叶、气囊和生殖托；c.幼藻体分枝海黍子sargassummuticum:藻体暗褐色，高50~100cm。固着器为盘状，主干圆柱状。初生叶倒披针形或倒卵圆形，全缘或稍有粗齿，无中肋。次生分枝自初生叶腋间生出，上生有三生叶，为楔形或亚楔形，有的接近亚匙形或倒披针形，是典型藻叶。气囊生于次生分枝与三生末端小枝上，幼囊为纺锤形或长椭圆形，成熟时为亚球形或倒梨形。雌雄同株。生殖托圆柱形。雌窝在托的上部，雄窝在托的下部。图7-6海黍子Sargassummuticuma.藻叶；b.分枝；c.生殖托；d.气囊（2）墨角藻目马尾藻科羊栖菜属Hizikia藻体黄褐色，肥厚多汁，多数高约40~100cm51 。固着器为圆柱形的假根状，长短不一。主干为直立圆柱形，分枝圆柱形，表面光滑。初生叶扁平，肉质，具有不明显的中肋。叶的变异很大，形状也多，长短不一，细匙形或线形，匙形叶的两缘常有粗的锯齿或波状缺刻，上有许多须借放大镜才能看到的毛窝。气囊的形状变化较大，纺锤形或梨形长达15mm，直径达4mm。枝、叶和气囊不一定同时存在于同一藻体上，有些类型终生只有三者之一或二，这是由于生长环境不同而引起体型变异的结果。雌雄异株。生殖托圆柱状顶端钝，表面光滑，基部具有柄，单条或偶有分枝，一般雄托长约4~10mm，直径1~1.2mm；雌托长2~4mm，直径1.5~2mm。图7-7羊栖菜Hizikiafusiformea.藻体；b.气囊和生殖托`实验报告绘制孔石莼表面观及横切面观结构图51 实验八海洋底栖动物形态观察预习报告软体动物门双壳纲的主要特征实验目的了解贝类外部形态熟悉长牡蛎的外部形态和内部各器官、系统材料和器具实验内容（一）贝类标本观察（外部形态）（二）长牡蛎的形态解剖1、外部形态（1）贝壳：牡蛎的贝壳分为左右两壳。左右两壳不等，左壳稍大而深，固着于岩石表面，右壳平，稍小，可以向上张开、关闭。贝壳表面有放射肋和鳞片。壳内面有闭壳肌痕和外套痕。（2）外套膜：包在软体部的外面，左右各一片。背面彼此相连并与内脏囊表面的上皮细胞相愈合。2、内部器官（1）呼吸系统：牡蛎主要依靠鳃进行气体交换。鳃位于鳃腔中，左右各一对相互对称。每一片鳃均由一排下行鳃和一排上行鳃构成。鳃由许多鳃丝组成，鳃丝上生有短小的纤毛。鳃除了呼吸之外，在摄取食物过程中也起重要作用。（2）51 消化系统：牡蛎消化系统主要包括唇瓣、口和食道、胃、消化盲囊、晶杆和晶杆囊以及肠和肛门。（1）循环系统：牡蛎的围心腔位于后闭壳肌的背面，心脏位于围心腔中。围心腔中充满围心腔液。心脏由一个心室两个心耳构成。（2）生殖系统：在繁殖季节，可以看到牡蛎的内脏囊周围，充满了乳白色物质，这就是生殖腺。成熟的生殖腺，雌性呈乳白微带红或黄色，外观上看来比较粗。雄性呈乳白色，外观较光滑。（3）神经系统：牡蛎的幼虫阶段具有脑、足、脏三对神经节。但在附着后由于营固着生活，足部退化足神经节也随着退化，脏神经节合并成一个。图8-1牡蛎解剖图51 实验报告1、绘长牡蛎的解剖图（去右壳、右外套膜，呼吸、消化、循环、生殖等各系统）2、写出长牡蛎的分类地位51 实验九海洋游泳动物形态观察预习报告硬骨鱼的主要结构特征实验目的1、通过对鲈鱼的结构观察，了解硬骨鱼类的主要特征以及鱼类适应于水生生活的形态结构特征；2、学习硬骨鱼内部解剖的基本操作方法。材料和用具活鲈鱼、解剖工具、解剖盘、放大镜、棉花、培养皿实验内容1、鲈鱼，别名鲈、花鲈、鲈板、鲈子鱼、鲈鸡、花寨、寨花、四肋鱼、四鳃鱼、鲈鲛、鲈子等。硬骨鱼纲、鲈形目、鮨科。系暖温性近海中下层鱼类。2、观察鲈鱼外形：51 体延长呈长椭圆形或近纺锤形，侧扁。头中大，后部背面微隆起，吻端较尖。口大，前下位，斜裂。下颌长于上颌。两颌有绒毛状细齿。眼中大，侧上位;眼间隔微凹，宽大于眼径，其间有4条隆起线。前鳃盖骨后缘有细锯齿，后角和下缘有棘3—5个，鳃盖骨向后延伸呈三角形，有1长尖棘。鳃孔大。尾柄较粗，长为高的2—2.6倍。背鳍2个，基底相连。第1背鳍基底长，始于胸鳍起点稍后背上，由12根粗壮鳍棘组成，第5棘最长;第2背鳍稍小，似方形，由13根鳍条组成，前缘有1棘。胸鳍较小，侧下位，鳍条中部长，向下渐短。腹鳍较大，位于胸鳍末基稍后下方，有1棘。臀鳍始于第2背鳍第7鳍条下方，两鳍近同形，末基近相对，前缘有3棘，第1棘短小，第2棘粗壮。尾鳍浅叉形。体被小栉鳞，不易脱落。有侧线。体背部青灰色，腹部灰白色。体侧及背鳍有许多黑色斑点，随个体的增长体侧斑点逐渐消失，3、鲈鱼的解剖与观察：将新鲜鲈鱼置解剖盘，使其腹部向上，用剪刀在肛门前与体轴垂直方向剪一小口，将剪刀尖插入切口，沿腹中线向前经腹鳍中间剪至下颌；使鱼侧卧，左侧向上，自肛门前的开口向背方剪到脊柱，沿脊柱下方剪至鳃盖后缘，再沿鳃盖后缘剪至下颌，除去左侧体壁肌肉，使心脏和内脏暴露。用棉花拭净器官周围的血迹及组织液，置入咸水的解剖盘内观察。　51 实验报告根据原位观察，绘鲈鱼的内部解剖图，注明各器官名称51 实验十海洋微生物宏基因组提取（演示为主）预习报告查阅有关海洋微生物宏基因组的相关中英文文献各一篇，阅读后按下表格填写阅读记录文献阅读记录表格题目作者摘录（出处，年份，卷号等）关键词主要研究背景及目前存在问题研究目的主要研究内容受试因素受试生物检测指标所用方法主要研究结果需要进一步阅读的参考文献主要启示和参考价值实验目的1、了解宏基因组研究的目的、意义和方法2、学习CTAB法提取海洋微生物宏基因组的方法实验所需药品：2×CTAB：CTAB2gTris-HCl(pH8.0)1M/L10ml51 NaCl5M/L28mlEDTA0.1M/L20ml加去离子水至100ml实验内容1.用300目的尼龙网过滤1L的海水，然后过0.2um的微孔滤膜。2.过滤后将滤膜放入15ml的tube管中，加入3ml的2%CTAB溶液（要提前在65℃水浴锅中预热5min），0.3ml的20%SDS溶液，在65℃水浴35分钟，中间轻轻混匀一次。3.水浴完后，置于-80℃冰箱冻10min后65℃融化5min。反复进行三次。4.将tube管中的滤膜取出，加入等体积的V氯仿：V异戊醇=24:1的混合液（在4℃冰箱保存），微微混匀，10000r/min离心10min。5.取上清与2ml的tube管中，加入0.6倍体积的异丙醇（在4℃冰箱中预冷至少一天），混匀。-20℃沉淀1~2h,然后室温12000r/min，离心20min，弃上清。6.用冷70%的乙醇（在4℃冰箱中预冷至少一天）洗沉淀2遍，每次7500r/min，离心5min。7.洗完后干燥5~10min。8.加入20ul灭菌的去离子水。9.1%琼脂糖凝胶电泳。51 1234图10-1海洋微生物宏基因组DNA凝胶电泳图1：DL2000DNAmarker;2-4:基因组DNA实验报告1、提取宏基因组应注意什么？2、裂解液为什么要预热？3、异丙醇、乙醇为什么要预冷？4、造成DNA降解的物理因素？5、如何预防DNA的生物降解？51 附录大连沿海常见底栖海藻蜡叶标本51 51 51 51 51 51 51 51 51 51