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六味地黄汤生物制剂对肾阴虚小鼠脾T淋巴细胞亚群的影响论文胡旭光,臧建伟,唐春萍,杨超燕,赵越【摘要】目的观察六味地黄汤生物制剂对实验肾阴虚小鼠脾T淋巴细胞亚群的影响,并与传统六味地黄汤进行比较。方法用甲状腺素和利血平建立肾阴虚小鼠模型,模型小鼠在服用药物1周后,称体重和计算脾脏指数.freelice.MethodsNIHmiceg/kgdosageofthyroxin,and1mg/kgdosageofreserpine,onceadayforcontinuingsevendays.Fivegroupsofmicealgroupandmodelgroup.ThechangesofbodyandspleenindexeseasuredandtheexpressionofCD4andCD8onTcellsurfaceinspleencellsetry.ResultsLiumuneregulationeffectandissuperiortothetraditionalLiuouseCD3-APC,RatantimouseCD4-FITC,RatantimouseCD8-PE,AbDserotec,批号20070123。1.2六味地黄汤(Ll,备用。1.3六味地黄汤生物制剂的制备(PSB-Ll。1.4动物NIH种小鼠,体质量(20±2)g,雌雄各半,由广东省实验动物中心提供(合格证号:2006A017)。1.5方法1.5.1六味地黄汤生物制剂对肾阴虚小鼠体重、脾脏重量指数的影响将小鼠60只随机分为5组,每组12只,分别为空白对照组、模型组、六味地黄组、光合细菌组、六味地黄汤生物制剂组。除空白对照组外,其余各组动物灌胃给予甲状腺素150mg/kg体重和利血平1mg/kg体重,1次/d,连续7d。与此同时,各组动物灌胃给予相应药物或对照物(见表1),1次/d,连续7d。第8天处死动物称体重与脾脏的重量,并按照下列公式计算脾脏指数:脾脏指数=脾脏湿重(g)/小鼠体重(g)。1.5.2六味地黄汤生物制剂对脾T淋巴细胞亚群的影响在无菌条件下剖开小鼠腹腔取脾,称重,研磨过100目筛网,PBS液冲洗,收集分离的脾细胞悬液,2000r/min离心8min,弃上清液;加红细胞裂解液2ml,混匀脾细胞,静止4~5min,待红细胞完全破碎,2000r/min离心8min,弃上清液去除红细胞,PBS液洗2遍,用PBS重悬细胞,计数调整细胞浓度为106个/ml。加荧光抗体CD3-APC,CD4-FITC,CD8-PE各10μl,暗处孵育30min,用流式细胞仪计数CD3,CD4,CD8数目。2结果2.1
六味地黄汤生物制剂对肾阴虚小鼠体重、脾脏重量的影响结果表明肾阴虚模型组动物体重、脾脏指数低于空白组;六味地黄汤及其生物制剂可以显著提高小鼠的体重与脾脏指数,且六味地黄汤生物制剂优于传统的六味地黄汤。结果见表1。表1六味地黄汤生物制剂对肾阴虚小鼠体重、脾脏重量的影响(略)2.2六味地黄汤生物制剂对脾T淋巴细胞亚群的影响结果表明肾阴虚模型组小鼠脾脏T淋巴细胞CD4/CD8比值与空白组比较显著下降;经六味地黄汤及其生物制剂治疗后,T淋巴细胞CD4/CD8比值显著提高且六味地黄汤生物制剂优于传统的六味地黄汤(P0.05)。结果见表2。表2六味地黄汤生物制剂对肾阴虚小鼠的CD4/CD8的影响(略)3讨论肾阴虚主要表现为机体多脏器的衰老、免疫功能低下及内分泌的紊乱[2],肾阴虚小鼠免疫器官内的淋巴细胞凋亡,细胞数目减少[3];脾脏体积缩小,重量减轻,.freelmunesystemasasupersystem[J].AnnualReviemunol,1997,15(4):1213.[10]刘俊清,康强.硒(CONSE)对恶性肿瘤辅助治疗的临床观察[J].山西医科大学学报,1997,28(1):24.[11]史国富.光合细菌在医药保健品方面的应用进展[J].科技情报开发与经济,2003,13(7):100.[12]吉海平,李君.光合细菌应用动态[J].生物工程进展,1997,17(4):46