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1.微生物——是一切肉眼看不见或看不清的个体微小(一般<0.1mm)、结构简单的一类低等生物。2.细菌——是一类形体微小、结构简单、细胞壁坚韧、以二等分裂方式繁殖和水生性较强的原核微生物。3.病毒——指没有细胞结构、不能独立进行生长代谢、只能在其他生物体内营寄生生活的极其微小的生物。4.朊病毒——是一类不含核酸但能够自我复制的具有侵染能力蛋白质分子。5.亚病毒:是一类不具备完整的复杂机构的类似病毒的感染性生物因子,是一类比真病毒更小的致病因子,包括类病毒、卫星因子和朊病毒。6.类病毒:是一类只含RNA一种成分、专性寄生在活细胞内的分子病原体。7.伴孢晶体——少数芽孢杆菌在形成芽孢的同时,会在芽孢旁形成一个菱形或不规则形的碱溶性蛋白质晶体。8.芽孢:某些菌生长到一定阶段,细胞内形成一个圆形、椭圆形或卵圆形、厚壁、含水量低、抗逆性强的内生孢子,是对不良环境有较强抵抗力的休眠体。9.选择性培养基:一类根据某微生物的特殊营养要求或其对化学、物理因素的抗性而设计的培养基,具有使混合菌中的劣势菌变成优势菌的功能,广泛用于菌种筛选等领域。10鉴别培养基——是培养基中加入能与某一种菌的无色代谢产物发生显色反应的指示剂,从而用肉眼就能使该菌的菌落与外形相似的其他菌落相区分的培养基11.消毒:指一种采用较温和的理化因素,仅杀死物体表面或内部一部分对人体或动植物有害的病原菌,而对被消毒的对象基本无害的措施。12.灭菌;采用强烈的理化因素使任何物体内外部的一切微生物永远丧失其生长繁殖能力的措施。13.糖酵解——指在不需要氧气的条件下,1分子葡萄糖经转化生成2分子丙酮酸、2分子NADH2喝分子ATP的过程。14.发酵:在生物氧化中发酵是指无氧条件下,底物脱氢后所产生的还原力不经过呼吸链传递而直接交给一内源氧化性中间代谢产物的一类低效产能反应。15.转化:受体菌自然或在人工技术作用下直接摄取来自供体菌的游离DNA片段,并把它整合 到自己的基因组中,而获得部分新的遗传性状的基因转移过程,称为转化。16.转导——转导是以噬菌体为媒介将外源DNA片段携带到受体细胞中,通过交换与整合,使后者获得前者部分遗传性状的现象。17.Stickland反应―――以一种氨基酸作底物脱氢,以另一种氨基酸作氢受体而实现生物氧化产能的独特发酵类型。18.PHB:是一种存在于许多细菌细胞质内属于类脂性质的碳源类贮藏物,不溶于水,具有贮藏能量、碳源和降低细胞内渗透压等的作用。19.准性生殖——类似于有性生殖,同种而不同菌株的体细胞间发生融合,它可不借减数分裂而导致低频率基因重组并产生重组子。20.质粒——细菌中染色体以外的能自主复制的小型环状双链DNA分子。21.培养基:是按照微生物生长繁殖所需要的各种营养物质,用人工方法配制而成的营养基质。22.菌落——指在固体培养基上,由一个或一团相同菌种生长繁殖形成的肉眼可见的群体。23.次生代谢产物——从初级代谢产生的中间产物出发,合成一些生理功能不很明确、化学结构特殊、与维持生命活动无关,但并不影响机体生命活动的代谢产物。24.抗生素——是一类由微生物或其他生物生命活动过程中合成的次生代谢产物或其人工衍生物,他们在很低浓度时就能抑制或干扰他种生物的生命活动,因而可用作优良的化学治疗剂。25.温和噬菌体——侵入相应寄主细胞后,其基因整合到寄主的基因组上,并随后者同步复制,但其侵入不引起寄主细胞裂解,这种噬菌体称温和噬菌体。26.烈性噬菌体:凡在短时间内能连续完成吸附、侵入、增殖、成熟和裂解等5个阶段而实现其繁殖的噬菌体。27.水体富营养化:水体富营养化是由于氮、磷等植物营养物的排入引起水体中藻类大量繁殖的现象。28.活性污泥:指一种由活细菌、原生动物和其他微生物与悬浮物质、胶体物质混杂群聚集在一起组成的絮凝团,在污水处理中具有很强的吸附、分解有机物或毒物的能力和良好的沉降性 能的絮状体颗粒。29.呼吸:底物脱氢后,经呼吸联传递,最终被外源分子氧作为最终电子(或氢)受体的氧化过程;是最普遍、最重要的生物氧化方式。30.Hfr菌株——即高频重组菌株,在Hfr菌株中,由于F质粒已经从游离态转变为在核染色体组特定位点上的整合态,与F’菌株结合后发生基因重组的频率要比F+和F‘结合后的频率高出数百倍,故名。2.干热灭菌法要求的温度和时间为(C)A105℃,2hB121℃,30minC165℃,2hD165℃,4h5.芽孢杆菌经常规染色后,营养体和芽孢的颜色分别是(B)和()A紫、红B红、绿C红、紫D绿、红6..革兰氏阳性(G+)细菌在革兰氏染色后呈现(A)A深紫色B红色C白色D无色7.下列孢子中属于霉菌无性孢子的是(A)A孢囊孢子B子囊孢子C卵孢子D接合孢子9.菌根是微生物与植物间的(C)结构A寄生B互生C共生D拮抗10.在N、P富营养化的水体里,含有大量的(D)19
A霉菌B酵母菌C原生动物D蓝细菌11.单细胞微生物生长过程中,活细胞总数最多的是在(B)A延滞期B稳定期C衰亡期D指数期12.细胞内部的pH值(D)A与外部环境的pH值相同B近酸性C近碱性D近中性13.下列微生物器官耐温顺序为(B)A营养体>孢子>芽孢B芽孢>孢子>营养体C孢子>营养体>芽孢D芽孢>营养体>孢子14.在固体平板上,青霉菌菌落周围葡萄球菌不能生长,此种关系为(C)A竞争关系B猎食关系C拮抗关系D寄生关系15.果汁、牛奶常用的灭菌方法为(A)A巴氏消毒B干热灭菌C间歇灭菌D高压蒸汽灭菌17.产CH4反应的关键底物是(C)ACO2BH2C乙酸D甲醇18.霉菌中的(B)分别是具有假根和足细胞A米根霉和桔青霉B米根霉和黄曲霉C高大毛霉和黑曲霉D黑根霉和红曲霉19.伊红-美蓝(EMB)培养基的类型为(C)A加富培养基B选择培养基C鉴别培养基D普通培养基20.马丁氏培养基的类型为(b)A加富培养基B选择培养基C鉴别培养基D普通培养基22.细菌的主要繁殖方式是(A)A裂殖B芽殖C有性生殖23.一般来说,细菌的C/N较真菌(B)A高B低26.下列哪种不是原核微生物基因重组的途径(B)A接合B转染C转导D原生质体融合27.酵母菌的无性繁殖方式主要是(C)A准性生殖B裂殖C芽殖28.植物病害的微生物多数是(C)A细菌B放线菌C真菌D藻类29.从生态类型上来分,根瘤菌属于(C)固氮菌A联合B共生C自生30.放线菌属于(B)A病毒界B原核生物界C真菌界D原生生物界31组成病毒粒子核髓的化学物质是(C)A糖类B蛋白质C核酸D脂肪32.原核微生物细胞核糖体大小为(C)A30SB50SC70SD80S33.最彻底的杀菌措施是(C)A防腐B消毒C灭菌D化疗34.酿酒酵母菌属于(C)微生物A好氧型B厌氧型C兼性厌氧型D微厌氧型19
35.通常选用(C)作为水质污染的指示菌A拟杆菌属B粪链球菌C大肠菌群D假单胞菌属36.下列不属于主动运输特点的是(C)A逆浓度B需载体C不需能量D选择性强37.蓝藻的营养类型为(A)A光能自养型B化能自养型C光能异养型D化能异养型38.苏芸金杆菌为生产上应用最多的昆虫病原(A)A细菌B放线菌C真菌D病毒39.细菌鞭毛的主要化学成分是(C)A多糖B脂类C蛋白质D核酸40.大多数霉菌细胞壁的主要成份是(C)A肽聚糖B纤维素C几丁质D磷壁酸41.加大接种量可控制少量污染菌的繁殖,是利用微生物间的(C)A互生关系B共生关系C竞争关系D拮抗关系42.下列孢子中属于霉菌无性孢子的是(A)A孢囊孢子B子囊孢子C卵孢子D接合孢子43.在放线菌发育过程中,吸收水分和营养的器官为(A)A基内菌丝B气生菌丝C孢子丝D孢子44.碳源和能源来自同一有机物的是(D)A光能自养型B化能自养型C光能异养型D化能异养型46.营养缺陷型菌株是指(D)的菌株A有营养不良症的菌株B在完全培养基上也不能生长良好的菌株C培养基中营养成分缺少时获得的菌株D丧失了合成某种营养成分能力的菌株47.酵母菌属于(C)微生物A好氧型B厌氧型C兼性厌氧型D微厌氧型49.酵母菌适宜生长的pH范围为(B)A<4.0B4.0~6.0C6.5~8.0D8.050.苏云金杆菌为生产上应用最多的昆虫病原(A)A细菌B放线菌C真菌D病毒51.大多数霉菌细胞壁的主要成份是(C)A肽聚糖B纤维素C几丁质D磷壁酸52.培养真菌时,培养基常加0.3%乳酸,其目的是(A)A调节pHB提供碳源C二者都是D二者都不是53.下列不属于生长素类物质的是(B)A氨基酸B矿质元素C嘌呤碱基D维生素55.下列微生物中能够利用分子氮的是(B)A葡萄球菌B根瘤菌C根霉D酵母菌二、填空(每空0.5分,共16分)1.革兰氏染色要求所用菌种菌龄不能过长,会出现假阴性结果,原因是菌龄过大部分细胞壁溶解,所以会导致呈阴性结果。2.度量细菌大小的单位是μm。因此观察细菌时,所使用的物镜放大倍数是100。3.1974年的“拴菌”试验证明细菌鞭毛运动方式是旋转。19
4.放线菌菌丝包括基内菌丝、气生菌丝和孢子丝。5.在显微镜下发现未知霉菌子实体呈扫帚状,那么可以初步断定该菌是青霉。如果发现子实体具有足细胞结构,则可初步断定该菌是曲霉。6.噬菌斑为形状,表明该噬菌体为烈性噬菌体。7常用的培养基凝固剂是 琼脂 ,其凝固温度是 49 ℃。检查培养基是否无菌的方法是 把灭过菌的培养基在培养箱里培养,检查是否有杂菌生长 。8.无菌操作时,手消毒一般是用 75%酒精消毒 。接种钩或者接种环的灭菌一般采用 灼烧法 。9.芽孢染色法的原理是利用芽孢的壁厚、透性低、难着色的特点,而采用加热条件,使染料进入芽孢。1.培养基一般都含有碳源、氮源、无机盐、生长因子、能源和水等成分。2.1000个细菌“一”字连接在一起,总长度大约为1mm,因此观察细菌时,所使用的物镜放大倍数是100。3.可以作为“生物农药”的细菌胞内物是伴胞晶体。5.在显微镜下发现未知霉菌具有匍匐菌丝,那么可以初步断定该菌是根霉。如果发现子实体呈“扫帚”状,则可初步断定该菌是青霉。6.噬菌斑为形状,表明该噬菌体为温和噬菌体。7.常用的培养基凝固剂是 琼脂 ,其融化温度是 96 ℃。检查培养基是否无菌的方法是 把灭过菌的培养基在培养箱里培养,检查是否有杂菌生长 。8.高压蒸汽灭菌所使用的压力一般是0.11MPa,需保持该压力20-30min。1.选择育种、诱变育种和杂交育种的原理依次是、和。1.目前流行的“非典型性肺炎”的病原是冠状病毒(SARS病毒)。2.菌根是微生物和植物根(系)形成的共生复合体,菌根主要有内生菌根和外生菌根两种类型。3.食用菌的营养类型主要有寄生型、腐生型和共生型三种类型。4.影响微生物生长的五大环境因子是温度、水分和空气相对湿度、光照、空气和酸碱度。5.微生物生长需要的营养物质主要包括碳源、氮源、无机盐和维生素四大类,其中对碳源的需求量最大。6.进行食用菌育种主要采用选择育种、诱变育种和杂交育种三种方法。7.病毒的侵染过程可分为吸附、侵入与脱壳、生物合成、装配和释放五个阶段。8.根据食用菌菌种的来源、繁殖代数及生产目的,通常将菌种分为母种、原种和栽培种三级。9.根据培养基的物理性状,可将培养基分为固体培养基、液体培养基和半固体培养基三大类。1细菌的特殊构造主要有__鞭毛___、__芽孢___、__伴孢晶体___和_荚膜与粘液层_____。2组成病毒的两大化学成分是__蛋白质___和___核酸__。3选用和设计培养基要考虑的原则主要有__目的明确___、__营养协调___、_理化适宜_____、和__经济节约___。4.引起寄主细胞裂解的噬菌体称_毒性(烈性)噬菌体4按微生物对能源、氢供体和基本碳源的需要,将其分为_光能无机营养型__、_光能有机营养型_、__化能无机营养型_和__化能有机营养型_4种营养类型。5原核微生物实现基因重组的四种方式分别是__接合___、__转化___、__转导___和__原生质体融合_。6__防腐_是采用一定方法阻止或抑制微生物生长,防止物品腐坏。7按对培养基成分的了解,将培养基分为_天然培养基_、_组合培养基_和_半组合培养基_三种。9菌根有___内生菌根_和__外生菌根_两大类。1.放线菌的菌丝有三种,分别是_基内菌丝____、___气生菌丝___和_孢子丝_____。19
2亚病毒根据其化学组成又分为__类病毒____、__拟病毒____和__朊病毒___。3微生物生长必需的六大营养要素是__碳源____、___氮源___、__水____、__无机盐___、___能源____和__生长因子___。4一种微生物生长的温度范围内有__最低生长温度_____、___最适生长温度____和__最高生长温度___3个温度指标。5与高等植物形成共生体系的两种常见微生物是__根瘤菌_____和__菌根菌_____。6微生物的五大共性是__体积小,面积大_____、__吸收多,转化快_____、___生长旺,繁殖快___、___适应强,易变异____和___分布广,种类多____。7微生物固氮的三种类型为__自生固氮____、___共生固氮____和_联合固氮______。8生物固氮六因素分别是_ATP的供应_、__还原力[H]及其传递体_____、___还原底物----氮气___、___适应强,易变异_、_镁离子__和___严格的厌氧环境___。1.原核微生物包括“三菌三体”,指的是细菌、放线菌、蓝细菌、支原体、支原体、 衣原体和 立克次氏体。其中 支原体 无细胞壁。2.细菌一般进行 无性 繁殖,即 裂殖 ;放线菌进行 无性 繁殖,主要形成 无性孢子 ,也可通过 菌丝断裂 进行繁殖;霉菌可进行 无性 繁殖和 有性 繁殖。3.G+细菌可产生 外 毒素,这种毒素的主要成分是 蛋白质 ;G-细菌可产生 内 毒素,这种毒素的主要成分是 脂多糖 。4.Escherichiacoli即 大肠杆菌 ,革兰氏染色呈 阴 性;Bacillussubtilis即 枯草芽孢杆菌 ,革兰氏染色呈 阳 性。5.T偶数噬菌体为 复合 对称结构,SARS病毒为 二十面体 对称结构,TMV病毒为 螺旋 对称结构。6.微生物吸收营养的方式主要有单纯扩散、促进扩散、主动运输和基团转位等四种。7.证明核酸尤其是DNA是真正的遗传变异的物质基础的3个经典实验是肺炎链球菌转化实验、噬菌体感染实验实验和植物病毒重建实验实验。8.遗传物质在微生物细胞中存在的部位和方式可概括为7个水平或层次,他们分别是细胞水平、 细胞核 水平、 染色体 水平、 核酸 水平、 基因 水平、密码子水平和 核苷酸 水平。9.根据微生物利用能源能力的不同,可将微生物分成 光能营养型 和 化能营养型 两种营养类型。1.Ainsworth等人的分类系统中,根据真菌有性孢子的不同将真菌门分成鞭毛菌亚门、 接合菌亚门 、 子囊菌亚门 、 担子菌亚门 和 半知菌亚门5个亚门。2.原核微生物细胞壁的特有成分是 肽聚糖 ,可用 溶菌酶 酶溶解之;酵母细胞壁的主要成分是 甘露聚糖 和 葡聚糖 ,可用 蜗牛消化酶 酶溶解之;高等真菌细胞壁的主要成分是 几丁质 ,可用 溶壁酶酶溶解之。3.EMP途径又叫 糖酵解 途径,其3种产物分别是 NADH、 ATP 和丙酮酸。4.Streptococcus即 链球菌 属,革兰氏染色呈 阳性 性;Rhizobium即 根瘤菌属,革兰氏染色呈 阴性 性。5.病毒颗粒主要由蛋白质组成的衣壳和DNA或RNA组成的核酸两部分组成。SARS病毒表面还有和包膜、刺突。7.菌种保藏的基本原理是采用低温、缺氧、干燥和饥饿等方法,降低菌体的新陈代谢,使之处于休眠状态。实验室最常用的保藏方法是斜面低温保藏法。1.细菌的运动器官是鞭毛。2.细菌细胞壁的特殊成分是肽聚糖,其相互交联形成的网状结构可作为细胞壁的骨架。3.青霉属的分生孢子梗为帚状分枝。19
4.在念珠蓝细菌细胞中,位于菌丝的中间或末端,进行厌氧固氮的场所称为异形胞。5.专性厌氧微生物之所以不能在有氧环境下存活,是因为其缺乏SOD(或超氧化物歧化)酶。6.一种生物产生一些代谢产物可抑制另一种生物的生长发育,甚至杀死他们的一种相互关系称为拮抗关系。7.水体富营养化的最主要原因是N、P营养元素超标。8.光合细菌处理污水所用的紫色非硫细菌的营养类型属于光能异养型。10.在原核生物种常见的染色体外的自主复制子,一般为共价闭环状态的超螺旋结构双链DNA称为质粒。1.细菌所特有的碳源和能源的储存物是PHB(或聚β-羟基丁酸)。2.古菌细胞壁的主要成分是假肽聚糖。3.革兰氏染色时呈紫颜色的细菌为G+细菌。4.大肠杆菌在含乳糖和葡萄糖的培养基中,优先利用葡萄糖,只有葡萄糖耗尽后才开始利用乳糖,是因为分解代谢物阻遏(或中间代谢物阻遏)作用。5.一种微生物细胞在固体培养基上形成的群体称菌落。6.根瘤菌与豆科植物之间存在着共生关系。7.固着类纤毛虫中,钟虫类原生动物以“沉渣取食”的方式,在废水生物处理中对水质的澄清起着重要作用。8.常规加压蒸汽灭菌法所使用的温度和时间为121℃,15-30min。9.一般所说的活性污泥膨胀是丝状真菌菌的过度增殖造成的。10.水体污染的指示菌通常选用大肠菌群。1.菌落特征对菌种识别、鉴定有重要意义,其特征包括大小、 形状 、 光泽 、 颜色 、 硬度 和 透明度 。6.C/N是指培养料中C元素与N元素的比值,是衡量培养基优劣的重要指标。1用马铃薯和糖等成分可以制成培养真菌用的半组合培养基。2细菌产生抗药性的3种途径分别为:染色体组上发生基因突变、抗药性质粒的转移和的适应性。3病毒的核酸类型是多样的,总的说来,动物病毒以dsDNA和ssRNA居多,植物病毒以ssRNA居多,而噬菌体以dsDNA居多。真菌病毒以dsRNA(真菌呢?)4在实验中培养化能异养型细菌时,通常以牛肉膏为碳源,蛋白胨为氮源,维生素为生长因子,以NaCl提供矿质元素。5F因子是大肠杆菌等细菌中决定的质粒,其大小为kb,约等于%染色体DNA,其中1/3基因(tra区)与有关。6.测量病毒大小的单位为nm,多数病毒粒子的直径在100nm上下。7.电子显微镜观察表明:放线菌无性孢子的形成,只有 横隔分裂方式,而无 凝聚分裂方式。8 放线菌的形态特征,以链霉菌最典型:细胞形态呈 丝状分枝 ,营养生长期菌丝 无 隔,一般呈 多核单细胞,细胞内具有为数众多的 体,根据菌丝的结构和功能把菌丝分为 基内菌丝 、 气生菌丝 和 孢子丝 3类,其中 孢子丝 能分化为成串的分生孢子。4 对青霉素不敏感的微生物是A支原体 B衣原体 C 立克次氏体 D金黄色葡萄球菌5UV诱变微生物突变主要的效应是A引起碱基置换B引起移码突变C产生嘧啶二聚体D引起染色体易位7生物法出除酵母菌细胞壁常用:A溶菌酶B几丁质酶C蜗牛酶D纤维素酶8ED途径的关键酶为(07年考题)19
A6-PG脱水酶BKDPG醛缩酶CG-6-P脱氢酶DGln合成酶9细菌的菌毛的主要功能是A运动B传递遗传物质C附着D致病性10真菌生物的微体的主要功能是A解毒B消化作用C能量合成D分泌酶类1.接合菌亚门的无性孢子主要为A休眠孢子B孢囊孢子C游动孢子D分生孢子2.真菌锁状联合结构的细胞核一般为A单核B双核C多核D异核3在固氮微生物中,形成异形胞抗氧机制的为(07年再考)A根瘤菌B蓝细菌C联合固氮菌D自生固氮菌4V.P试验的生化依据是某些细菌发酵糖产生A乳酸B乙酰甲基甲醇C2,3-丁二醇D丁酸5在细菌中,专性能量寄生的为A支原体B衣原体C立克次氏体DMLO6在免疫细胞中,巨噬细胞主要来自A粒细胞B浆细胞C单核细胞D淋巴细胞7干热灭菌法通常的灭菌式为A120℃50minB160℃50minC160℃90minD120℃90min8抗体初次免疫应答通常滴度低,且抗体多为AIgDBIgMCIgADIgE9在1995年版的安贝氏菌物词典中,卵菌属于A真菌界B原生动物界C菌物界D假菌界10噬菌体的核酸主要为AssDNABssRNACdsDNADdsRNA三、判断题(正确的打∨号,错误的打×号。每题1分,共9分)( × )1.酵母菌死活鉴定实验中,活细胞被染成蓝色,死细胞无色。( × )2.木霉和根霉在分类上都属于半知菌亚门。( ∨ )3.TMV病毒为杆状RNA病毒。( ∨ )4.根霉和毛霉产生的无性孢子是孢囊孢子,有性孢子是接合孢子。( × )5.从支原体、立克次氏体到衣原体,其寄生性逐渐减弱。( ∨ )6.血球计数板的计数室的体积0.1mm3。( ∨ )7.EMP途径在有氧和无氧条件下均可进行。( × )8.UV诱变的原因主要是形成了G-G二聚体。( ∨)9.多数真菌喜欢微酸环境,多数细菌喜欢偏碱性环境。( × )1.培养真菌一般用PDA培养基,培养细菌一般用高氏1号培养基。( ∨)2.镜台测微尺的标尺上,每小格的实际长度为10微米( × )3.TMV病毒为杆状dsDNA病毒。( ∨)4.根霉产生的无性孢子为孢囊孢子,属于内生孢子。19
( × )5.促进扩散需提供ATP,基团移位时运送前后溶质分子会发生结构变化。( ∨ )6.生物氧化过程包括脱氢、递氢和受氢3个阶段。( × )7.真核微生物的呼吸链位于细胞膜上。( × )8.恒浊培养时培养基流速恒定,恒化培养时培养基流速不恒定。( × )9.多数细菌喜欢微酸环境,多数真菌喜欢偏碱性环境。( ∨ )1。细菌荚膜的主要成分为多糖、蛋白质,以多糖居多。( ×)2。木霉和根霉在分类上都属于半知菌亚门。( × )3。TMV病毒为dsRNA病毒。( ∨ )4。根霉和毛霉的主要区别是前者有假根。( × )5。C/N是指培养基中碳源和氮源的质量比。( ∨ )6。NADH2是烟酰胺腺嘌呤二核苷酸的缩写。( ∨ )7。EMP途径在有氧和无氧条件下均可进行。( ∨ )8。不同细胞间细胞周期的差异主要表现在G1期。( ∨ )9。多数真菌喜欢微酸环境。( ∨ )10。血球计数板的计数室的体积0.1mm3。( × )1。革兰氏染色的关键步骤是复染。( × )2。木霉和根霉在分类上都属于半知菌亚门。( × )3。T4噬菌体为dsDNA病毒。( ∨ )4。支原体无细胞壁,是生物界中能独立生活的生物。( ∨ )5。促进扩散不需提供ATP。( ∨ )6。FAD是黄素腺嘌呤二核苷酸的缩写。( × )7。真核微生物的呼吸链位于细胞膜上。( ∨ )8。不同细胞间细胞周期的差异主要表现在G1期。( × )9。多数细菌喜欢微酸环境。( ∨ )10。镜台测微尺的标尺上,每小格的实际长度为10微米。四、判断并说明理由(本题共5小题,每小题2分,共10分;认为正确的,在题前括号内打"√";错误的打"×",并在题后简要说明理由,不说明理由,该题无分)1.(√)放线菌是原核生物。2.(√)G+细菌细胞壁中含磷壁酸,而G-细菌细胞壁中不含磷壁酸。3.(×)酿酒酵母的营养体只能以二倍体的形式存在。4.(√)甲型H1N1流感病毒必须在侵入宿主细胞后才脱壳。5.(√)“Park”核苷酸在细菌膜上的运送属于促进扩散。6.(√)从生态类型来分,根瘤固氮菌属于共生固氮菌。7.(√)利用血球计数板计得得酵母菌总数大于平板菌落计数法计得的结果。8.(√)有锁状联合的菌丝是双核菌丝。9.(×)在最适生长条件下得到的发酵产物最多。10.(√)转化子一定带有供体菌的某些生理特征。19
1.(×)放线菌是真核生物。2.(×)G-细菌细胞壁中含磷壁酸,而G+细菌细胞壁中不含磷壁酸。3.(×)酿酒酵母的营养体只能以单倍体的形式存在。4.(√)禽流感病毒必须在侵入宿主细胞后才脱壳。5.(√)青霉素抑制转肽作用,致使G+细菌细胞壁中的肽聚糖不能合成。6.(×)从生态类型来分,根瘤固氮菌属于自生固氮菌。7.(×)利用血球计数板计得得酵母菌总数小于平板菌落计数法计得的结果。9.(×)耐氧菌生长过程中不能有分子氧的存在。()1.革兰氏阳性细菌和革兰氏阴性细菌都含有磷壁酸。(×革兰氏阴性菌不含磷壁酸)()2.芽孢是细菌的抗性结构,同时具有繁殖功能。(×芽孢不具有繁殖功能)()3.蓝细菌的光合作用是一种循环式的光合磷酸化,不产生氧气。(×为非循环光和磷酸化,产生氧气)()4.主动运输与基团转位的差异在于基团转位在运送前后会发生分子结构的变化。(√)()5.缺氧/好氧生物脱氮法,在厌氧阶段进行硝化反应,在好氧阶段进行反硝化反应。(×好氧阶段进行硝化反应,厌氧阶段进行反硝化)()1.聚磷菌在厌氧条件下分解PHB产生能量用于吸收水体中的可溶性磷,好氧条件下分解聚磷酸盐,产生能量用于积累PHB。(×好氧条件下分解PHB,厌氧条件下分解聚磷酸盐)()2.磷壁酸是革兰氏阴性细菌细胞壁中的特有成分。(×应为革兰氏阳性菌)()3.酵母菌生长的最适pH值为中性偏碱。(×酸性)()4.酶合成的调节是微生物细胞在基因水平上的调控,酶活性的调节是细胞在分子水平上的调节。(√)()5.在生产抗生素等次生产物发酵过程中,最佳的收获时间是对数生长期的末期。(×应为稳定期的末期)三、将下列微生物按要求归类(写对1种得0.4分,共8分)大肠杆菌四联球菌链霉菌根瘤菌毛霉酵母木耳灵芝诺卡氏菌假单胞菌链球菌根霉绵霉青霉曲霉香菇芽孢杆菌冬虫夏草羊肚菌平菇归类要求:1.属于革兰氏阳性细菌的有:四联球菌、链球菌、芽孢杆菌2.属于革兰氏阴性细菌的有:大肠杆菌、假单胞菌、根瘤菌3.属于放线菌的有:诺卡氏菌、链霉菌4.属于鞭毛菌亚门的有:绵霉5.属于接合菌亚门的有:根霉、毛霉6.属于子囊菌亚门的有:酵母、羊肚菌、冬虫夏草7.属于担子菌亚门的有:木耳、平菇、香菇、灵芝8.属于半知菌亚门的有:青霉、曲霉四、简答题(每题5分,共30分)绘制根霉显微观察图,并注明各部分特征。绘制芽孢构造模式图,并标明个部分名称。19
试题:1.简述革兰氏染色的机制。(8分)参考答案:细菌对于革兰氏染色的不同反应,是由于它们细胞壁的成分和结构不同造成的。(1分)革兰氏阳性细菌的细胞壁主要是肽聚糖形成的网状结构组成的,(1分)在染色过程中,当用乙醇处理时,由于脱水而引起网状结构中的孔径变小,通透性降低,(1分)使结晶紫-碘复合物被保留在细胞内而不易着色,因此,呈现蓝紫色;(1分)革兰氏阴性细菌的细胞壁中肽聚糖含量低,而脂类物质含量高,(1分)当用乙醇处理时,脂类物质溶解,细胞壁的通透性增加,(1分)使结晶紫-碘复合物易被乙醇抽出而脱色,(1分)然后又被染上了复染液(番红)的颜色,因此呈现红色。(1分)试题:2.简述单细胞酵母菌和霉菌菌落的区别。(6分)参考答案:单细胞酵母菌霉菌含水状态较湿干燥外观形态小而突起大而疏松或大而致密透明度稍透明不透明菌落与培养基结合程度不结合较牢固结合菌落颜色单调,一般呈乳脂或矿烛色,少数红色或黑色十分多样菌落正反面颜色差别相同一般不同菌落边缘可见球状,卵球状或假丝状细胞可见粗丝状细胞细胞生长速度较快一般较快气味多带酒香味往往有霉味注:答对上述8种对比项目中的任意6项均可得满分。试题:4.如何利用微生物学方法确定地沟油是否含有致癌物质?(8分)参考答案:检验致癌物的方法可以采用艾姆斯(Ames)试验。(2分)方法如下:将鼠肝匀浆液加入地沟油样品中(1分),经一段时间保温后,吸入滤纸片中,然后将滤纸片放置于[-]中央(1分)。在[-]上提前涂有一层鼠伤寒沙门氏his-菌菌液。(1分)经培养后,出现3种情况:(1)平板上无大量菌落产生,说明试样中无致癌物(1分);(2)在纸片周围有一抑制圈,其外出现大量菌落,说明试样中含有高浓度的致癌剂;(1分)(3)在纸片周围长有大量菌落,说明试样中有浓度适当的致癌物。(1分)1.如何鉴定一株未知菌是革兰氏阳性还是革兰氏阴性?(8分)参考答案:(1)菌种活化:培养24小时的未知菌,以及大肠杆菌和金黄色葡萄球菌(2分)(2)涂片(1分)(3)固定(1分)(4)初染(1分)(5)媒染(1分)(6)复染(1分)(7)镜检(1分)试题:2.简述细菌菌落和霉菌菌落的区别。(6分)参考答案:细菌霉菌含水状态很湿或较湿干燥19
外观形态小而突起或大而平坦大而疏松或大而致密透明度透明或稍透明不透明菌落与培养基结合程度不结合较牢固结合菌落颜色多样十分多样菌落正反面颜色差别相同一般不同菌落边缘一般看不到细胞可见粗丝状细胞细胞生长速度一般很快一般较快气味一般有臭味往往有霉味注:答对上述8种对比项目中的任意6项均可得满分。试题:3.怎样确定蜡样芽孢杆菌的生长对数期?(7分)参考答案:利用比浊法测定生长曲线,从而确定蜡样芽孢杆菌的对数期。(2分)其步骤为:制备菌悬液(1分),37℃120-150rpm振荡培养,每隔20分钟取样一次(1分),利用分光光度计在600nm波长下测定吸光值(1分),并记录数据,绘制生长曲线(1分),根据生长曲线确定对数生长期。(1分)试题:4.如何进行高压蒸汽灭菌?(4分)参考答案:把要灭菌的物品放入高压蒸汽灭菌器中,封好盖,加热(1分)。压力上升至0.05MPa时,关电源,排冷空气,至压力为0MPa。开电源,加热至0.05MPa时,再次排冷空气,方法同上(1分)。排完气后,继续加热至0.11MPa,维持20-30min,(1分)关闭电源,停止加热,待冷却后,压力降至0MPa时,打开盖,取出物品(1分)。5.病毒繁殖分几个阶段?各阶段的主要过程如何?1)吸附病毒表面蛋白与细胞受体特异性结合;2)侵入吸附后立即发生,消耗能量;3)脱壳只核酸进入细胞;4)生物合成包括核酸复制和蛋白质合成;5)装配按照一定方式、顺序组装;6)释放一般造成裂解,有的以出芽释放。3.什么叫选择性培养基?举例分析其鉴别作用和原理。3.是根据某种微生物的特殊营养要求或对某物理或化学因素的抗性,而设计的培养基,其功能是使混合样中的劣势微生物变为优势微生物,从而提高该微生物的筛选效率。该培养基主要原理有两方面:投其所好或取其所抗。前者加分离对象西画的营养物,使其大量繁殖,在数量上占优势。后者是加入分离对象所抗的物质,抑制或杀灭其他微生物,是分离对象占优势。如Ashby培养基用于富集固氮菌1.简述微生物的五大共性。体积小,面积大;吸收多,转化快;生长旺,繁殖快;分布广,种类多;适应强,易变异。2.如何对培养皿进行干热灭菌?洗涤;干燥;包扎,逐渐升温;控温:160~170℃/2h;冷却至常温;取出。3.简述利用显微镜观察细菌的方法。培养;制片;调光;低倍镜观察;高倍镜观察;滴香柏油,油镜观察;用二甲苯擦油镜。4.简述平菇组织分离的方法。PDA制备——种菇选择——接种箱消毒——手、种菇及工具消毒——切取组织块——转移组织块——培养——检查。5.图示平菇栽培种生产的工艺流程。生产计划制定——配料——拌料——装袋——灭菌——冷却——接种——培养。1、比较革兰氏阳性细胞和革兰氏阴性细胞细胞壁在化学组成和结构上有何异同。比较项目G+细菌G-细菌1.革兰氏染色反应呈紫色呈红色(1分)2.肽聚糖层厚,层次多薄,一般单层3.磷壁酸多数含有无(1分)4.外膜无有(1分)5.脂多糖无有(1分)6.类脂和脂蛋白含量低(仅抗酸菌含有(1分)7.结构特性耐机械强度大,不易破裂耐机械强度小,易解体(1分)1.请详细叙述革兰氏染色的原理、染色液及其配制的方法、染色程序与结果以及染色成败的关键。(1)原理:G+和G-细菌的细胞壁的成分和结构不同,从而导致其对革兰氏染色的反应不同。G+细菌的细胞壁主要是由肽聚糖形成的网状结构组成的,在染色过程中,当乙醇处理时,由于脱水而导致网状结构中的孔径变小,通透性降低,使结晶紫-碘复合物被保留在细胞内而不易脱色,因此呈现蓝紫色;G-性细菌的细胞壁中肽聚糖含量低,而脂类物质含量高,当用乙醇处理时,脂类物质溶解,细胞壁的通透性增加,使晶紫-碘复合物易被乙醇抽出而脱色,然后又被染上了复染液(番红)的颜色,因此呈现红色。(2)染色液及其配制:1)草酸铵结晶紫染液:A液:结晶紫2g,95%酒精20ml;B液:草酸铵0.8g,蒸馏水80ml。混合A和B液,静置48h后使用。2)卢戈氏碘液:碘片1.0g,碘化钾2.0g,蒸馏水300ml;先将碘化钾溶解在少量水中,再将碘片溶解在碘化钾溶液中,待碘全部溶解后,加足水分即成。3)95%的酒精溶液。4)番红复染液:番红2.5g,95%酒精100ml,取上述配好的番红酒精溶液10ml与80ml蒸馏水混匀即成。19
(3)染色程序与结果步骤方法结果阳性(G+)阴性(G-)初染媒染剂脱色复染结晶紫60s碘液60s95%乙醇20~30s番红60~120s紫色紫色仍为紫色仍为紫色保持紫色脱去紫色仍显紫色红色(4)染色成败的关键:1)涂片不宜过厚,否则过于密集,出现假阳性反应;,2)把握酒精脱色程度是革兰氏染色的的关键,脱色过度,阳性菌可被误认为阴性菌,脱色不够时,阴性菌可被误认为阳性菌。3)菌龄:菌龄影响染色结果。如阳性菌培养时间过长,或已死亡及部分溶解了,都常呈阴性反应。1.简述革兰氏染色的过程和原理。1)染色要点为:先用结晶紫染色,菌体呈紫色;再加碘液媒染,菌体呈紫色;然后用乙醇脱色,革兰氏阳性菌呈紫色,阴性菌为无色。最后用沙黄或番红复染,阳性菌呈紫色,阴性菌为红色。2)染色结果与细胞壁的结构和化学组成有关。革兰氏阳性菌细胞壁厚,肽聚糖含量高,网络结构紧密,含脂量低,在被酒精脱色后孔径变小,结晶紫-碘复合物不能被脱区去,故菌体为紫色;而革兰氏阴性菌与之相反,脱色后被复染为红色。2.如何利用目镜测微尺测量微生物细胞的大小?1)目镜测微尺的校准。包括目镜测微尺的安装,镜台测微尺的安装,0线重合,第二条重复线间两尺的格数,计算目镜测微尺每格长度。2)制片。3)观察、测量、计算。一般取10-20个菌体的平均数。2.如何利用血球计数板检测细胞浓度?制孢子悬浮液,2)冲洗血球计数板,3)找到计数室,4)加悬浮液5)五点计数.6)按照公式计算.2.如何通过单孢杂交选育优良品种?亲本选择;单孢分离;单孢鉴定,配对杂交;杂交组合鉴定;初筛;复筛3.什么是营养缺陷型?如何筛选营养缺陷型?野生型菌株经诱变处理后,由于发生丧失某种酶合成能力的突变,因而只能在加有该酶合成产物的培养集基中才能生长,这类突变株叫------。诱变处理;淘汰野生型,浓缩突变性;检出缺陷型;鉴定缺陷型。0微生物与生物环境间的几种相互关系:(1)互生关系:两种可单独生活的微生物,当它们生活在一起时,通过各自的代谢活动而有利于对方,或偏利于一方。(1.2分)(2)共生关系:两种微生物紧密地结合在一起,当这种关系高度发展时,就形成特殊的共生体,它们在生理上表现出一定的分工,在组织上和形态上产生了新的结构。(1.2分)(3)拮抗作用:一种微生物通过产生某种特殊的代谢产物或改变环境条件来抑制或杀死另一种微生物。包括非特异性拮抗作用和特异性拮抗作用两种。(1.2分)(4)寄生关系:一种微生物生活在另一种微生物表面或体内并对后者产生危害的相互关系(1.2分)(5)捕食关系:一种微生物直接吞食另一种微生物的关系(1.2分)1.简述革兰氏染色的原理两种细菌经初染均呈紫色(2分)。革兰氏阳性细菌细胞壁较厚,肽聚糖含量较高,含脂量低,网状结构紧密,当被酒精脱色时,引起了肽聚糖网状结构的孔径缩小以至关闭,从而阻止了结晶紫——碘复合物的逸出,因此,酒精脱色后仍呈紫色(2分);再用番红复染时,故菌体呈深紫色(2分);可是革兰氏阴性细菌细胞壁肽聚糖层较薄,含量亦少,而脂类含量高,当用酒精脱色时,脂类物质被溶解,细胞壁的透性较大,结晶紫——碘的复合物随之被抽提出来,因此呈无色(2分),故革兰氏阴性细菌菌体呈现番红的颜色(2分)。2.什么是选择性培养基?举例分析其原理。选择性培养基是一类根据某微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基,具有使混合菌样中的劣势菌变成优势菌的功能。(4分)如:酵母菌富集培养基中加入高浓度的糖来富集酵母菌;马丁培养基加入染料孟加拉红,抗生素链霉素和金霉素来抑制细菌的生长,从而富集土壤中的真菌。(6分)19
2.什么是鉴别性培养基?试以EMB培养基为例,分析其鉴别作用的原理。鉴别性培养基是一类在成分中加有能与目的菌的无色代谢产物发生显色反应的指示剂,从而达到只须用肉眼辨别颜色就能方便地从近似菌落中找出目的菌菌落的培养基。EMB培养基中的伊红、美兰两种染料在低酸条件下会结合生成沉淀,起着产酸指示剂的作用。试样中的多种肠道细菌尤其是大肠杆菌,因其能强烈分解乳糖而产生大量混合酸,菌体表面带H+,故可染上酸性染料伊红,又因伊红与美兰结合,故使菌落染上深紫色,且从菌落表明的反射光中还可看到绿色金属闪光,其它几种产酸能力弱的肠道细菌菌落也有相应的棕色。(6分)3.比较转化、转导与转染转化——受体菌直接吸收供体菌的DNA片段而获得后者部分遗传性状的现象(3分)转染——用提纯的病毒核酸(DNA或RNA)去感染其宿主细胞或其原生质体,可增殖出一群正常病毒后代的现象。(4分)转导——通过缺陷噬菌体做媒介,把供体细胞的小片段DNA携带到受体细胞中,通过交换和整合,使后者获得前者部分遗传性状的现象。(3分)3比较局限转导与溶源转变两种方式导致宿主菌新的性状的产生的不同溶源转变:是指有的溶源菌由于整合了温和噬菌体的核酸,使自身产生了除免疫性以外的其它新的表型特征。新的表型特征是由温和噬菌体的核酸产生的。若温和噬菌体脱离宿主,这样的新性状也会随之消失。(5分)局限性转导:是指缺陷噬菌体将供体细菌的染色体片断运到受体细菌细胞内,并发生整合形成稳定的转导子,同时受体细菌表现出新的表型特征。这样的新的性状是由供体细菌的染色体片断产生的,是稳定存在于受体细菌后代的。(5分)3.如何利用UV诱变选育优良品种?.1)选择诱变对象,2)确定诱变剂量,3)涉及合理方案,4)突变体检出,5),性能测定,6)示范推广4.比较控制有害微生物的四种主要措施的异同。项目灭菌消毒防腐化疗处理因素强理化因素理化因素理化因素化学治疗剂处理对象任何物体内外生物体表、酒、乳等有机质物体内外宿主体内微生物类型一切微生物有关病原菌一切微生物有关病原菌对微生物的作用彻底杀灭杀死或抑制抑制或杀死抑制或杀死举例高压灭菌巴氏消毒冷藏抗生素4.比较植物病毒与T偶数噬菌体在增殖过程中的异同点T偶数噬菌体的增殖过程:(5分)(1)吸附:噬菌体与敏感的寄主细胞接触,与寄主细胞的特异性受点结合,由尾板上的尾钉及尾丝使噬菌体固定在细菌细胞上。(2)侵入:噬菌体吸附在寄主细胞的受体上以后,由尾部分泌一种溶菌酶使寄主细胞的细胞壁溶解成一个小孔,之后靠尾鞘收缩,将尾髓穿过寄主细胞的细胞壁插入细菌细胞中,头部的核酸通过中空的尾髓压入寄主壁报内,蛋白质外壳留在外面。(3)复制:噬菌体的核酸进入细菌细胞后,利用细菌细胞的原料及酶系,使自身的核酸增殖,并进行蛋白质的生物合成。(4)装配:病毒的核酸和蛋白质分别合成后进行各部件的组装(5)释放:寄主细胞内的大量子代噬菌体成熟后,噬菌体分泌溶菌酶,使细菌细胞的细胞壁溶解,细胞破裂释放出子代噬菌体。植物病毒只能以被动方式侵入,如昆虫制造的伤口,天然创口或人工嫁接时的创口侵入。在植物组织中,借细胞间连丝实现病毒粒的扩散和传播。另外,植物病毒必须在侵入宿主细胞后才脱去衣壳。其它过程同噬菌体。(5分)000毒性噬菌体的繁殖过程:(6)吸附:噬菌体与敏感的寄主细胞接触,与寄主细胞的特异性受点结合,由尾板上的尾钉及尾丝使噬菌体固定在细菌细胞上。(1分)(7)侵入:噬菌体吸附在寄主细胞的受体上以后,由尾部分泌一种溶菌酶使寄主细胞的细胞壁溶解成一个小孔,之后靠尾鞘收缩,将尾髓穿过寄主细胞的细胞壁插入细菌细胞中,头部的核酸通过中空的尾髓压入寄主壁报内,蛋白质外壳留在外面。(8)复制:噬菌体的核酸进入细菌细胞后,利用细菌细胞的原料及酶系,使自身的核酸增殖,并进行蛋白质的生物合成。(1分)(9)装配:病毒的核酸和蛋白质分别合成后进行各部件的组装(1分)(10)释放:寄主细胞内的大量子代噬菌体成熟后,噬菌体分泌溶菌酶,使细菌细胞的细胞壁溶解,细胞破裂释放出子代噬菌体。(1分)19
1.什么是选择性培养基?举例分析其原理选择性培养基是一类根据某微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基,具有使混合菌样中的劣势菌变成优势菌的功能。(8分)如:酵母菌富集培养基中加入高浓度的糖来富集酵母菌;马丁培养基加入染料孟加拉红,抗生素链霉素和金霉素来抑制细菌的生长,从而富集土壤中的真菌。(8分)2.试解释溶源性、溶源菌、温和噬菌体溶源性――温和噬菌体的侵入并不引起宿主细胞裂解的现象。(4分)溶源菌――细胞内有温和噬菌体的细菌。(4分)温和噬菌体——侵入相应寄主细胞后,其基因整合到寄主的基因组上,并随后者同步复制,但其侵入不引起寄主细胞裂解,这种噬菌体称温和噬菌体。(8分)4.比较呼吸、无氧呼吸和发酵的异同点呼吸:底物按常规方式脱氢后,脱下的氢经完整的呼吸链传递,最终被外源分子氧接受,产生了水并放出ATP形式的能量。这是一种递氢和受氢都必须在有氧条件下完成的生物氧化作用,是一种高效的产能方式。(6分)无氧呼吸:底物按常规途径脱氢后,经部分呼吸链递氢,最终由氧化态的无机物或有机物受氢,并完成氧化磷酸化产能反应。(5分)发酵:指在无氧等外源氢受体的条件下,底物脱氢后产生的还原力未经呼吸链传递而直接交与某一内源性中间代谢物接受,以实现底物水平磷酸化产能的一类生物氧化反应。(5分)5.细菌、放线菌、酵母菌和霉菌的菌落有何不同,为什么?细菌菌落:湿润、较光滑、较透明、较粘稠、易挑取、质地均匀、菌落正反面或边缘与中央部位的颜色一致。(3分)原因:细菌属于单细胞生物,一个菌落内无数细胞并没有形态、功能上的分化,细胞间充满着毛细管状态的水,等等。(1分)放线菌菌落:干燥、不透明、表面呈致密的丝绒状,上有一薄层彩色的“干粉”;菌落和培养基的连接紧密,难以挑取;菌落正反面颜色常不一致,在菌落边缘的琼脂平面有变形的现象等。(3分)原因:多数放线菌有基内菌丝和气生菌丝的分化,气生菌丝成熟时又会进一步分化成孢子丝并产生成串的干粉状孢子,它们伸展在空间,菌丝间没有毛细管水存积,等。(1分)酵母菌菌落:较湿润、较透明、表明较光滑、易挑取,质地均匀,正反面及边缘与中央部位的颜色较一致等,这些均类似与细菌菌落。但酵母菌菌落一般较细菌菌落大、厚,外观更粘稠、较不透明等。因为酵母菌的细胞比细菌的大,细胞内已分化出很多细胞器,细胞间隙含水量相对较少,且不能运动等。(4分)霉菌菌落:形态大,质地疏松,外观干燥,不透明,呈现或送或紧的蛛网状、绒毛状或毡状;菌落与培养基间连接紧密,不易挑取,菌落正反面、及中央与边缘的颜色、构造常不一致等。(3分)原因:霉菌的细胞呈丝状,在固体培养基上生长时又有营养菌丝和气生菌丝的分化,而气生菌丝间没有毛细管水。(1分)5.简述细菌和真菌的试管斜面接种过程细菌接种:接种前20分钟打开紫外灯,接种时关掉紫外灯,点燃酒精灯,用酒精棉球擦手,松动试管棉塞,灼烧接种环,环冷却,打开棉塞,在试管斜面刮取少量菌种,在无菌试管斜面上从基部开始划Z形线到斜面顶端。棉塞和试管口过火焰,塞紧棉塞,再次灼烧接种环。将接种后的试管置于37℃温箱培养。(5分)真菌接种:用接种勾或接种铲,取菌种时带一小块培养基,之后将接种块倒置(即有菌丝的面向着新培养基)于无菌试管斜面中央位置。其它操作与细菌接种相同。接种后将试管置于29℃温箱培养。(5分)5简述高压蒸汽灭菌的过程及其注意事项高压蒸汽灭菌过程:(8分)检查灭菌锅内的水位;加热,待水沸腾后,将包装好的要灭菌的物品放入锅内,(注意不能堆放太紧密);拧好盖儿,同时关上安全阀和放气阀,开始升温,待压强升到0.05时放气一次,重新关好放气阀,等压强再次升到0.05时,重复放气一次;关好放气阀,观察仪表,当温度升到121℃,开始记时,维持温度在121℃—126℃之间15—20min;时间到后,关掉电源,待指针自动回零后,打开盖儿,取出物品。注意排尽冷空气(2分)19
6.比较呼吸、无氧呼吸和发酵的异同点呼吸:底物按常规方式脱氢后,脱下的氢经完整的呼吸链传递,最终被外源分子氧接受,产生了水并放出ATP形式的能量。这是一种递氢和受氢都必须在有氧条件下完成的生物氧化作用,是一种高效的产能方式。(3分)无氧呼吸:底物按常规途径脱氢后,经部分呼吸链递氢,最终由氧化态的无机物或有机物受氢,并完成氧化磷酸化产能反应。(3分)发酵:指在无氧等外源氢受体的条件下,底物脱氢后产生的还原力未经呼吸链传递而直接交与某一内源性中间代谢物接受,以实现底物水平磷酸化产能的一类生物氧化反应。6.化能自养微生物与异养微生物的能量代谢有何不同?与异养微生物相比,化能自养微生物的能量代谢主要有3个特点:1.无机底物的氧化直接与呼吸链发生欧联,即由脱氢酶或氧化还原酶催化的无机底物脱氢或脱电子后,可直接进入呼吸链传递,这与异养微生物对葡萄糖等有机底物的氧化要经过多条途径逐级脱氢明显不同;(3分)2.呼吸链的组分更为多样化,氢或电子可以从任一组分直接进入呼吸链;(4分)3.产能效率即P/O比一般要低于化能异养微生物。(3分)7.比较灭菌、消毒、防腐和化疗的异同,并简述高压蒸汽灭菌的过程。灭菌:采用强烈的理化因素使任何物体内外部的一切微生物永远丧失其生长繁殖能力的措施。(1分)消毒:仅杀死物体表面或内部的一部分对人体或动、植物有害的病原菌,而对被消毒的对象基本无害的措施。(1分)防腐:利用某种理化因素完全抑制霉腐微生物的生长繁殖,即通过制菌作用防止食品、生物制品等对象发生霉腐的措施。(1分)化疗:即化学治疗,指利用具有高度选择毒力即对病原菌具高度毒力而对宿主基本无毒的化学物质来抑制宿主体内病原微生物的生长繁殖,借移达到治疗该宿主传染病的一种措施。(1分)7.简述单细胞微生物的典型生长曲线的几个阶段及其特点1)延滞期:指少量单细胞微生物接种到新鲜培养液中后,在开始培养的一段时间内,因代谢系统适应新环境的需要,细胞数目没有增加的一段时间。特点:生长速率为零;细胞形态变大;RNA含量增高,原生质呈嗜碱性;合成代谢活跃;对外界不良条件反应敏感。(2分)2)指数期:细胞数目以几何级数增长的时期特点:生长速率最大;细胞进行平衡生长,菌体各部分成分均匀;代谢旺盛(3分)3)稳定期:新繁殖的细胞数与衰亡数相等。特点:生长速率为零(3分)4)衰亡期:微生物的个体死亡速度超过新生速度,整个群体呈现负生长状态特点:细胞形态发生多形化。(2分)5、简述分批培养时单细胞微生物的典型生长曲线的四个时期及特点。(1)延滞期(lagphase)特点:生长速率常数=0;细胞形态变大或增长;细胞内RNA特别是rRNA含量增高,原生质嗜碱性增强;合成代谢活跃(核糖体、酶类、ATP合成加快),易产生诱导酶;对外界不良条件敏感,(如氯化钠浓度、温度、抗生素等化学药物)(1.5分)(2)对数期(logarithmicphase)特点:生长速率常数最大,即代时最短;细胞进行平衡生长,菌体大小、形态、生理特征等比较一致;代谢最旺盛;细胞对理化因素较敏感。(1.5分)(3)稳定期(stationaryphase)特点:新增殖的细胞数与老细胞的死亡数几乎相等,微生物的生长速率处于动态平衡,培养物中的细胞数目达到最高值;细胞分裂速度下降,开始积累内含物,产芽孢的细菌开始产芽孢;此时期的微生物开始合成次生代谢产物,对于发酵生产来说,一般在稳定期的后期产物积累达到高峰,是最佳的收获时期。(2分)(4)衰亡期(declinephase)特点:①细胞死亡数增加,死亡数大大超过新增殖的细胞数,群体中的活菌数目急剧下降,出现“负生长”(1分)3.什么是微生物的典型生长曲线?可分为几个时期?1)当把少量单细胞微生物接种到恒容积的液体培养基中,在适宜的温度、通气条件下,他们的群体就会有规律地生长起来。如果以细胞数目的对数值为纵坐标,以培养时间为横坐标,就可以划出一条有规律的曲线,即~~~。根据微生物的生长速率常数分为延滞期、指数期、稳定期和衰亡期。4.高压蒸汽灭菌过程:检查灭菌锅内的水位;加热,待水沸腾后,将包装好的要灭菌的物品放入锅内,(注意不能堆放太紧密);拧好盖儿,同时关上安全阀和放气阀,开始升温,待压强升到0.05时放气一次,重新关好放气阀,等压强再次升到0.05时,重复放气一次;关好放气阀,观察仪表,当温度升到121℃,开始记时,维持温度在121℃—126℃之间15—20min;时间到后,关掉电源,待指针自动回零后,打开盖儿,取出物品。(6分)本题主要考查学生对基本理论的理解和掌握程度。评分标准:1.所答要点完整,每小题给10分;全错或不答给0分。19
2.部分正确可根据对错程度,依据答案评分点给分。4.举例说明怎样利用琼脂块培养法筛选产量突变株。以春日霉素高产菌株筛选为例,将诱变后的分生孢子涂板培养,长出菌落时用打孔器取出,摆放在空培养皿中,适温下培养4-5天,然后将琼脂块移到生物鉴定板上,培养17-18h,进行抑菌圈检查,挑选出生产抗生素能力强的就变异菌株。5.病毒繁殖分几个阶段?各阶段的主要过程如何?1)吸附病毒表面蛋白与细胞受体特异性结合;2)侵入吸附后立即发生,消耗能量;3)脱壳只核酸进入细胞;4)生物合成包括核酸复制和蛋白质合成;5)装配按照一定方式、顺序组装;6)释放一般造成裂解,有的以出芽释放。一、简答题(本题共5个小题,每小题16分,共80分)本题主要考查学生对基本理论的理解和掌握程度。评分标准:1.所答要点完整,每小题给16分;全错或不答给0分。2.部分正确可根据对错程度,依据答案评分点给分。1.什么是鉴别性培养基?试以EMB培养基为例,分析其鉴别作用的原理。鉴别性培养基是一类在成分中加有能与目的菌的无色代谢产物发生显色反应的指示剂,从而达到只须用肉眼辨别颜色就能方便地从近似菌落中找出目的菌菌落的培养基。EMB培养基中的伊红、美兰两种染料在低酸条件下会结合生成沉淀,起着产酸指示剂的作用。试样中的多种肠道细菌尤其是大肠杆菌,因其能强烈分解乳糖而产生大量混合酸,菌体表面带H+,故可染上酸性染料伊红,又因伊红与美兰结合,故使菌落染上深紫色,且从菌落表明的反射光中还可看到绿色金属闪光,其它几种产酸能力弱的肠道细菌菌落也有相应的棕色。(10分)2.细菌、放线菌、酵母菌和霉菌的菌落有何不同,为什么?细菌菌落:湿润、较光滑、较透明、较粘稠、易挑取、质地均匀、菌落正反面或边缘与中央部位的颜色一致。(3分)原因:细菌属于单细胞生物,一个菌落内无数细胞并没有形态、功能上的分化,细胞间充满着毛细管状态的水,等等。(1分)放线菌菌落:干燥、不透明、表面呈致密的丝绒状,上有一薄层彩色的“干粉”;菌落和培养基的连接紧密,难以挑取;菌落正反面颜色常不一致,在菌落边缘的琼脂平面有变形的现象等。(3分)原因:多数放线菌有基内菌丝和气生菌丝的分化,气生菌丝成熟时又会进一步分化成孢子丝并产生成串的干粉状孢子,它们伸展在空间,菌丝间没有毛细管水存积,等。(1分)酵母菌菌落:较湿润、较透明、表明较光滑、易挑取,质地均匀,正反面及边缘与中央部位的颜色较一致等,这些均类似与细菌菌落。但酵母菌菌落一般较细菌菌落大、厚,外观更粘稠、较不透明等。因为酵母菌的细胞比细菌的大,细胞内已分化出很多细胞器,细胞间隙含水量相对较少,且不能运动等。(4分)霉菌菌落:形态大,质地疏松,外观干燥,不透明,呈现或送或紧的蛛网状、绒毛状或毡状;菌落与培养基间连接紧密,不易挑取,菌落正反面、及中央与边缘的颜色、构造常不一致等。(3分)原因:霉菌的细胞呈丝状,在固体培养基上生长时又有营养菌丝和气生菌丝的分化,而气生菌丝间没有毛细管水。(1分)3比较植物病毒与T偶数噬菌体在增殖过程中的异同点T偶数噬菌体的增殖过程:(10分)(1)吸附:噬菌体与敏感的寄主细胞接触,与寄主细胞的特异性受点结合,由尾板上的尾钉及尾丝使噬菌体固定在细菌细胞上。(2)侵入:噬菌体吸附在寄主细胞的受体上以后,由尾部分泌一种溶菌酶使寄主细胞的细胞壁溶解成一个小孔,之后靠尾鞘收缩,将尾髓穿过寄主细胞的细胞壁插入细菌细胞中,头部的核酸通过中空的尾髓压入寄主壁报内,蛋白质外壳留在外面。(3)复制:噬菌体的核酸进入细菌细胞后,利用细菌细胞的原料及酶系,使自身的核酸增殖,并进行蛋白质的生物合成。(4)装配:病毒的核酸和蛋白质分别合成后进行各部件的组装(5)释放:寄主细胞内的大量子代噬菌体成熟后,噬菌体分泌溶菌酶,使细菌细胞的细胞壁溶解,细胞破裂释放出子代噬菌体。植物病毒只能以被动方式侵入,如昆虫制造的伤口,天然创口或人工嫁接时的创口侵入。在植物组织中,借细胞间连丝实现病毒粒的扩散和传播。另外,植物病毒必须在侵入宿主细胞后才脱去衣壳。其它过程同噬菌体。(6分)19
5.化能自养微生物与异养微生物的能量代谢各有什么特点?与异养微生物相比,化能自养微生物的能量代谢主要有3个特点:1.无机底物的氧化直接与呼吸链发生欧联,即由脱氢酶或氧化还原酶催化的无机底物脱氢或脱电子后,可直接进入呼吸链传递,这与异养微生物对葡萄糖等有机底物的氧化要经过多条途径逐级脱氢明显不同;(5分)2.呼吸链的组分更为多样化,氢或电子可以从任一组分直接进入呼吸链;(6分)3.产能效率即P/O比一般要低于化能异养微生物。(5分)2.、何为原生质体融合,简要说明其过程所包括具体步骤。(1)通过人为方法,使遗传性状不同的两细胞的原生质体发生融合,并进而发生遗传重组以产生同时带有双亲性状的遗传性稳定的融合子(fusant)的过程,称为原生质体融合。(2(2)选择亲株→→制备原生质体→→原生质体融合→→原生质体再生→→筛选优良性状的融合重组子。(4分)1、根据能源微生物所利用能源和碳源的不同,微生物可分为哪四种营养类型,举例说明不同类型微生物的能源、碳源和电子供体类型。营养类型能源氢供体基本碳源实例光能无机营养型光无机物CO2蓝细菌,紫硫细菌(光能自养型)绿硫细菌,藻类光能有机营养型光有机物CO2及简单红螺菌科的细菌(1.5分)(光能异养型)有机物(紫色无硫细菌)化能无机营养型无机物*无机物CO2硝化细菌,硫化细菌,(1.5分)(化能自养型)铁细菌,氢细菌,硫磺细菌等化能有机营养型有机物有机物有机物绝大多数细菌和(1.5分)(化能异养型)全部真核微生物营养类型、能源、氢供体叙事正确给4分,例子正确2分。3、比较毛霉、根霉、青霉、曲霉属菌丝及菌丝特化形态—子实体的异同。(1)根霉:①菌丝白色,无隔多核单细胞菌丝,呈絮状;菌丝体有假根和匍匐枝,与假根相对处向上生出孢囊梗,内有囊轴,颈部有囊托。无性繁殖产孢囊孢子,有性繁殖产生接合孢子。根霉的孢子囊和孢囊孢子多为黑色或褐色,有的颜色较浅,有棱角和条纹。(2)毛霉:无隔多核菌丝,为单细胞真菌。无假根和匍匐枝。菌丝体直立生出孢囊梗,不分支或总状分支,囊内有囊轴,囊基部无囊托,颈部有囊领。孢囊孢子多无色、无条纹、光滑。(1.5分)(3)青霉:有隔多核多细胞组成;青霉无足细胞,分生孢子梗从基内菌丝或气生菌丝上生出,有横隔,顶端生有扫帚状的分生孢子头。分生孢子多呈蓝绿色。扫帚枝有单轮、双轮和多轮,对称或不对称。(1.5分)(4)曲霉:菌丝发达多分枝,有隔多核的多细胞真菌。分生孢子梗由特化了的厚壁而膨大的菌丝细胞(足细胞)上垂直生出,无横隔;分生孢子头状如“菊花”或“头状”。顶囊有初生分生孢子梗和次生孢子梗。(1.5分)5、营养物质进入细胞的主要方式有哪些,各有什么特点?并举例说明。比较项目单纯扩散促进扩散主动运输基团转位特异载体蛋白运输速度物质运输方向胞内外浓度运输分子能量消耗运输后物质的结构载体饱和效应与溶质类似物运送抑制剂运送对象举例无慢由浓至稀相等无特异性不需要不变无无竞争性无H2O、CO2、O2、甘油、乙醇、盐类(1.5分)有快由浓至稀相等特异性不需要不变有有竞争性SO42-、PO43-、糖(1.5分)有快由稀至浓胞内浓度高特异性需要不变有有竞争性有氨基酸、乳糖等糖类,Na+、Ca2+等无机粒子(1.5分)有快由稀至浓胞内浓度高特异性需要改变有有竞争性有葡萄糖、果糖、甘露糖、嘌呤、核苷、脂肪酸(1.5分)1、比较革兰氏阳性细胞和革兰氏阴性细胞细胞壁在化学组成和结构上有何异同。19
比较项目G+细菌G-细菌1.革兰氏染色反应呈紫色呈红色(1分)2.肽聚糖层厚,层次多薄,一般单层3.磷壁酸多数含有无(1分)4.外膜无有(1分)5.脂多糖无有(1分)6.类脂和脂蛋白含量低(仅抗酸菌含有(1分)7.结构特性耐机械强度大,不易破裂耐机械强度小,易解体(1分)2.病毒分子的化学组成是什么,都有哪几种对称方式,举例说明。组成:(1)核酸(2)蛋白质3)其他成分如脂类(1分)对称方式:(1)螺旋对称如烟草花叶病毒(1分)(2)二十面体对称如腺病毒(1分)(3)复合对称大肠杆菌T4噬菌体(1分)3、简述或绘图说明细菌芽孢的结构及各层的主要化学成分,并说明芽孢的特性和功能。(1)主要包括孢外壁、芽孢衣、皮层和核心。(1分)(2)芽孢的外壁层厚而致密,主要成分为脂蛋白,通透性差,不易着色。(1分)(3)核心含有大量的DNA、RNA、蛋白质酶等物质,还含有2,6—吡啶二羧酸(DPA),DPA是芽孢特有的成分。一般以DPA—Ca的形式存在。(2分)(4)皮层主要含芽孢肽聚糖、DPA—Ca,皮层体积大,比较致密。(1分)(5)芽孢平均含水量低,约40%,能抵抗不良环境,如干旱、紫外线、辐射等。(1分)4、根据微生物对氧气需求的不同,可把微生物分为哪几种,它们各有什么特点?(1)好氧菌:氧作为最终氢受体,细胞含有超氧物歧化酶(SOD,superoxidedismutase)和过氧化氢酶。微好氧菌(microaerophilicbacteria):只能较低的氧分压下才能正常生长,通过呼吸链并以氧为最终氢受体而产能。(1.5分)(2兼性厌氧菌(facultativeaerobe):在有氧或无氧条件下均能生长,但有氧情况下生长得更好,在有氧时靠呼吸产能,无氧时接发酵或无氧呼吸产能;细胞含有SOD和过氧化氢酶。(3)耐氧菌(aerotolerantanaerobe):可在分子氧存在下进行厌氧生活的厌氧菌。生活不需要氧,分子氧也对它无毒害。不具有呼吸链,依靠专性发酵获得能量。细胞内存在SOD和过氧化物酶,但缺乏过氧化氢酶。(1分)(4)厌氧菌(anaerobe):分子氧对它有毒害,短期接触空气,也会抑制其生长甚至致死;在空气或含有10%CO2的空气中,在固体培养基表面上不能生长,只有在其深层的无氧或低氧化还原电势的环境下才能生长;生命活动所需能量通过发酵、无氧呼吸、循环光合磷酸化或甲烷发酵提供;细胞内缺乏SOD和细胞色素氧化酶,大多数还缺乏过氧化氢酶。(25、简述分批培养时单细胞微生物的典型生长曲线的四个时期及特点。(1)延滞期(lagphase)特点:生长速率常数=0;细胞形态变大或增长;细胞内RNA特别是rRNA含量增高,原生质嗜碱性增强;合成代谢活跃(核糖体、酶类、ATP合成加快),易产生诱导酶;对外界不良条件敏感,(如氯化钠浓度、温度、抗生素等化学药物)(1.5分)(2)对数期(logarithmicphase)特点:生长速率常数最大,即代时最短;细胞进行平衡生长,菌体大小、形态、生理特征等比较一致;代谢最旺盛;细胞对理化因素较敏感。(1.5分)(3)稳定期(stationaryphase)特点:新增殖的细胞数与老细胞的死亡数几乎相等,微生物的生长速率处于动态平衡,培养物中的细胞数目达到最高值;细胞分裂速度下降,开始积累内含物,产芽孢的细菌开始产芽孢;此时期的微生物开始合成次生代谢产物,对于发酵生产来说,一般在稳定期的后期产物积累达到高峰,是最佳的收获时期。(2分)(4)衰亡期(declinephase)特点:①细胞死亡数增加,死亡数大大超过新增殖的细胞数,群体中的活菌数目急剧下降,出现“负生长”(1分)2.、什么是质粒,它有何特点?典型的质粒有哪几种?(1)质粒:细菌染色体外的遗传物质,由共价闭合环状双链DNA分子组成,能独立于细胞核进行自主复制。(2分)(2)大小:分子量约为2—100×106D,携带1—100个基因,一个菌细胞可有一至数个质粒。特点:非必需性、可转移性、可整合性、可重组性、可消除性等(2分)(3)F–因子、R因子、Col因子、Ti质粒、Ri质粒、巨大质粒(mega质粒)、降解性质粒1.比较细菌、放线菌、酵母及霉菌的细胞和菌落特征。1)细菌和放线菌为原核生物,酵母和霉菌为真核生物。细菌和酵母为单细胞生物,放线菌和霉菌为丝状生物;而菌落是指在固体培养基上,由一个或一团相同菌种生长繁殖形成的肉眼可见的群体。特征见表项目细菌放线菌霉菌酵母含水状态湿润或较湿润干燥或较干燥干燥较湿润菌落形态小而突起或大而平坦大而疏松或大而致密小而紧密大而突起细胞间关系单个分散或有一定方式丝状交织丝状交织单个分散或假菌丝19
透明度透明或稍透明不透明不透明稍透明与M结合程度不结合牢固结合较牢固结合不结合颜色多样单调多样多样边缘特征看不到细胞可见丝状细胞可见丝状细胞可见球状或假丝状细胞气味臭味土腥味霉味多有酒香味1.细菌、放线菌、酵母菌和霉菌的菌落有何不同,为什么?1.细菌、放线菌、酵母菌和霉菌的菌落有何不同,为什么?细菌菌落:湿润、较光滑、较透明、较粘稠、易挑取、质地均匀、菌落正反面或边缘与中央部位的颜色一致。(3分)原因:细菌属于单细胞生物,一个菌落内无数细胞并没有形态、功能上的分化,细胞间充满着毛细管状态的水,等等。(1分)放线菌菌落:干燥、不透明、表面呈致密的丝绒状,上有一薄层彩色的“干粉”;菌落和培养基的连接紧密,难以挑取;菌落正反面颜色常不一致,在菌落边缘的琼脂平面有变形的现象等。(3分)原因:多数放线菌有基内菌丝和气生菌丝的分化,气生菌丝成熟时又会进一步分化成孢子丝并产生成串的干粉状孢子,它们伸展在空间,菌丝间没有毛细管水存积,等。(1分)酵母菌菌落:较湿润、较透明、表明较光滑、易挑取,质地均匀,正反面及边缘与中央部位的颜色较一致等,这些均类似与细菌菌落。但酵母菌菌落一般较细菌菌落大、厚,外观更粘稠、较不透明等。因为酵母菌的细胞比细菌的大,细胞内已分化出很多细胞器,细胞间隙含水量相对较少,且不能运动等。霉菌菌落:形态大,质地疏松,外观干燥,不透明,呈现或送或紧的蛛网状、绒毛状或毡状;菌落与培养基间连接紧密,不易挑取,菌落正反面、及中央与边缘的颜色、构造常不一致等。原因:霉菌的细胞呈丝状,在固体培养基上生长时又有营养菌丝和气生菌丝的分化,而气生菌丝间没有毛细管水。微生物与氮素循环:微生物生存需要氮源物质,有有机氮和无机氮;微生物通过生物固氮作用可以合成多种氨基酸,也可通过硝化作用合成硝酸等无机含氮化合物。试讨论微生物的五大共性对人类的利弊微生物的五大共性:体积小,面积大;吸收多,转化快;生长旺,繁殖快;适应强,易变异;分布广,种类多利:1体积小,面积大:该特点赋予微生物不同于其它生物的五大共性。2吸收多,转化快:使微生物在自然界和人类实践中更好地发挥小型“活的化工厂”的作用。3生长旺,繁殖快:在发酵生产中具有很重要的实践意义,其生产效率高、发酵周期短。此外,该特性对生物学的基本理论的研究也具有极大的优越性,使科学研究周期大大缩短、空间减小、经费降低、效率提高等。4适应强,易变异:适应性强,为研究不同适应机制提供理想的模式生物。发生有益的变异可为人类创造巨大的经济和社会效益。5分布广,种类多:为人类进一步开发利用微生物资源提供了无限广阔的前景。(2分)弊:生长繁殖快,一旦污染会很快蔓延,给生产造成很大的损失。若变异产生耐药性突变体,或致病能力更强的突变体,会给病害的控制带来很大困难,也会造成很大的经济损失。分别广,若是有害微生物,这对生活、生产都很不利。请利用微生物生态学原理详细分析我校西湖污染的原因,并提出应对措施。1、原因:(1)污水排放(2)湖水为死水(3)湖水水域面积小(回答这部分时必须依照微生物学原理,结合水体的自净作用进行论述)2、应对措施:(1)减排(2)增加溶养(3)增加水容量19