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园林植物育种学——生物技术在园林植物遗传改良中的应用

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第九章生物技术在园林植物遗传改良中的应用本章教学目的和要求1.了解园林植物生物技术研究的主要内容。2.掌握植物组织培养、基因工程等技术在园林植物遗传育种中的应用。本章教学重点和难点重点:组织培养与基因工程在园林植物遗传育种中的作用。难点:园林植物生物技术的原理与操作方法。教学内容:生物技术(biotechnology)是指按照人们的意愿采取一定的技术手段,直接或间接地利用生物有机体(从微生物直至高等动植物)或其组成部分(器官、组织、细胞等),发展新的生产工艺,创造新的生物品种或生物制品的一种科学技术体系。包括组织培养、细胞工程、基因工程、发酵工程、蛋白质工程等。  第一节植物组织培养一、植物组织培养的相关概念植物组织培养(planttissueculture):在无菌条件下,将离体的植物材料培养于人工培养基上,并给以适宜的培养条件,使之形成完整植株或生产出具有一定经济价值的生物产品的技术。包括分生组织、输导组织、薄壁组织等离体组织,根、茎、叶、花、果实等各种器官,细胞、胚、胚珠、子房、胚乳等的离体培养。外植体(explant):用于培养的离体材料。继代培养(subculture):由最初培养新增殖的组织,继续转入新的培养基上培养的过程。无性繁殖系:由同一外植体反复进行继代培养后,所得到的一系列无性繁殖后代。单细胞无性系:在细胞培养中,由单细胞形成的无性系。愈伤组织(callus):在培养过程中,从植物各种器官、组织的外植体增殖而形成的一种无特定结构和功能的细胞团。9 胚状体(embryoid):由外植体或愈伤组织产生的,与正常受精卵发育方式类似的胚胎结构体。二、植物组织培养的基本程序1.培养用具的准备2.培养基的制备基本成分(大量元素、微量元素、有机成分、铁盐)、碳源(蔗糖、葡萄糖等)、凝固剂(琼脂、卡拉胶等)、植物生长调节剂(生长素、细胞分裂素等)、其他附加成分(活性炭、LH、CH、椰乳等)、pH值3.外植体的选择4.接种(无菌操作)5.离体培养初代培养、继代培养愈伤组织诱导、不定芽分化(体胚再生)、增殖培养、生根培养等培养条件、培养方式6.炼苗移栽三、植物组织培养的内容1.植株培养2.茎尖与分生组织培养3.胚培养(embryoculture)4.离体器官培养(organculture)5.花药与花粉培养(anther&pollen)6.胚珠和子房培养(ovule&ovary)7.胚乳培养(endospermculture)8.细胞培养(cellculture)9.离体授粉受精(invitrofertilization)四、植物组织培养在园林植物育种中的应用• 快速繁殖植物品种、珍稀植物• 脱除病毒,培养无病毒苗木• 进行种质资源的长期保存和远距离运输• 离体诱发和筛选突变体9 离体辐射或化学诱变;体细胞无性系变异的选择• 获得倍性不同的植株花药(粉)培养获得单倍体;胚乳培养获得三倍体• 克服种子发育和萌发中的障碍兰花种子萌发;胚抢救等• 克服远缘杂交困难离体授粉受精• 提供育种中间材料 第二节植物原生质体培养与细胞融合一、概念原生质体:被去掉细胞壁的具有生活力的裸露细胞。原生质体培养:将去掉了细胞壁的裸露细胞培养成植株的技术。原生质体融合(细胞融合、体细胞杂交):将不同种、甚至属间细胞人工融合为杂种细胞,并使其再生成植株的技术。二、原生质体培养与细胞融合的方法步骤1.原生质体的制备获得大量有活力的原生质体。• 原生质体的分离机械分离法酶解分离法:分离材料的准备(离体叶片、悬浮细胞等)酶解(果胶酶、纤维素酶、半纤维素酶等) 2)原生质体的收集与纯化过滤-离心法(沉淀法)漂浮法界面法3)原生质体的活力测定:形态、活性染色、荧光染料活性染色等方法9 影响原生质体活力的因素:• 分离材料的生理状态• 酶解条件:酶质量、浓度、酶解温度、酶解时间、酶溶液的渗透压 • 分离条件:离心次数、离心速度、纯化方法、分离持续时间 • 环境条件:操作环境的温度、分离用具的影响2.原生质体的培养培养原生质体的基本营养同一般组培;对某些组分,如钙和碳源的水平要求更为严格。在培养基中保持一定的渗透压极为重要。常用的培养基有:MS培养基、N-T培养基、B5培养基等。注意原生质的湿度及培养时的温度和光照。培养方法:固体培养法;浅层液体培养法;双层培养法3.细胞融合1)原生质体融合PEG法、电融合法、高pH-高浓度钙离子法、NaNO3法等;2)杂种细胞的筛选突变细胞遗传互补选择法营养互补选择法根据原生质体特性差异的机械选择法3)体细胞杂种植株的鉴定形态学方法、细胞学方法,同工酶法,分子标记法等。融合体的类型:对称融合非对称融合三、原生质体操作在育种中的应用• 培育新品种• 创造新种质• 克服远缘杂交不亲和、杂交不育等障碍• 作为基因工程的良好受体• 进行突变体筛选的优良原始材料 9 第三节植物基因工程一、植物基因工程的概念及其研究概况植物基因工程(plantgeneticengineering)是指按照人们的意志,通过一定的程序,将具有遗传信息的DNA片段,在离体条件下,用工具酶加以剪切、组合和拼接,再将人工重组的基因,引入适当的植物受体中进行复制和表达的技术。1972年,构建第一个重组DNA分子。1983年,世界上获得首例转基因植物。1985年,创建叶盘法进行植物的遗传转化。 迄今,已成功获得大量的转基因植物,园林植物包括矮牵牛、金鱼草、菊花、非洲菊、香石竹、满天星、月季、百合、唐菖蒲、郁金香、仙客来、石蒜、水仙、花叶芋、吊兰、长春花、南非菊、风铃草、半边莲、六出花、夏堇、草原龙胆、蔓陀罗、长寿花、秋海棠、蝴蝶兰、石斛、结缕草、高羊茅、山茶、连翘、杜鹃花、杨树、桉树、刺槐、美国枫香、欧洲白桦、挪威云杉、松类等。二、植物基因工程的一般程序与方法1.目的基因的分离与克隆PCR技术转座子标签技术基因组相减技术cDNA差异显示技术等2.植物表达载体的构建1)启动子的选择组成型启动子:35S特异性启动子:组织特异性、诱导特异性2)终止子3)选择标记基因:npt-II、hpt、bar等3.植物的遗传转化1)农杆菌介导法2)基因枪法3)花粉管通道法9 4)其他方法:PEG法、电激法、显微注射法、激光法、脂质体法、超声波法、真空浸润法、碳硅纤维介导法4.转化细胞的筛选及转基因植物的鉴定1)转化体的筛选抗性筛选:利用选择标记基因利用报告基因:GUS、GFP2)转化体的鉴定PCR检测Southern杂交Northern杂交Western杂交5.转基因植物的安全性评价与商业释放二、基因工程在园林植物育种中的应用1.植物基因工程育种的优点• 从基因水平上修饰植物的遗传物质,定向改造植物的遗传性状,提高了育种的目的性和精确性;• 打破物种之间的生殖隔离障碍,实现了基因资源在生物界的共享,大大地扩展了育种的范围;• 在很大程度上缩短了育种周期。2.基因工程在园林植物遗传改良中的应用• 修饰花色• 改良花型• 增加花香• 延缓衰老• 延长花期• 改变株形• 创造不育• 提高抗病虫能力• 改善抗逆性• 抗除草剂9 • 改善生长特性• 治理环境污染 第四节分子标记及其在育种中的应用一、常见DNA分子标记技术基于DNA-DNA杂交的DNA标记:RFLP基于PCR技术的DNA标记:RAPD、ISSR;SSR、SCAR基于限制性酶切和PCR的DNA标记:AFLP、CAPS基于单个核苷酸多态性的DNA标记:SNP1.RFLP标记限制性片段长度多态性(RestrictionFragmentLengthPolymorphism)1)工作原理:由于单碱基的替换、DNA片断的插入、缺失、易位、倒位等,引起同源DNA序列上限制性内切酶的识别位点或位点间的DNA区段不同,从而导致酶切片段的多态性。2)基本程序:酶切→电泳后转膜→预杂交/杂交→放射自显影。3)特点:共显性标记,不受显隐性、环境和发育阶段的影响;多态性丰富,重复性稳定性好。实验过程中需对探针进行标记,操作繁琐,耗时费力;DNA需求量大。目前已较少使用。2.RAPD标记随机扩增多态性DNA(RandomAmplifiedPolymorphicDNA)1)工作原理:利用一系列不同的随机引物(9-10bp)对所研究物种的基因组DNA进行扩增,模板DNA序列上引物的结合位点不同,导致扩增产物DNA片段的多态性。2)基本程序:引物筛选→PCR扩增→琼脂糖凝胶电泳→谱带分析。3)特点:操作简单易行,一套引物可用于不同物种的基因组分析;多态性高,所需DNA量少。显性标记,不能区分显性纯合和杂合基因型;实验结果易受实验条件的影响,重复性较差。9 应用较多:品种分类、种质鉴定、遗传多样性分析等。3.SSR标记微卫星简单重复序列(MicrosatelliteSimpleSequenceRepeats)1)工作原理:以2-6个核苷酸为基本单元的简单串联重复序列称为微卫星或简单序列重复;SSR座位两侧具有保守的单拷贝序列,不同物种或品种,所含SSR各异(重复次数不同)2)基本程序:设计特异引物→PCR扩增→聚丙稀酰胺凝胶电泳→多态性分析。3)特点:操作简便,稳定可靠;具有大量的等位差异,多态性十分丰富。依赖SSR的克隆和测序设计引物,开发成本较高。应用前景好:遗传作图、种质鉴定、品种分类4.AFLP标记限制性扩增片段长度多态性(AmplifiedFragmentLengthPolymorphism)1)工作原理:通过对基因组DNA酶切片段的选择性扩增来检测DNA酶切片段长度的多态性。PCR与RFLP相结合的产物。多态性来自酶切位点和其后的选择性碱基的变异。2)基本程序:总DNA酶切,寡聚核苷酸连接头的连接→PCR扩增→聚丙稀酰胺凝胶电泳→检测。3)特点:具有RFLP的可靠性和PCR的高效、灵敏性;一次反应能扩出50~100条谱带,具有丰富的多态性。需对引物进行标记,相对比较费时耗财。目前应用不多。二、分子标记在育种中的应用• 种质资源及遗传多样性分析• 利用分子标记进行基因定位• 构建分子遗传图谱• 资源评价与品种鉴定• 分子标记辅助选择本章思考题:1.植物组织培养在园林植物育种中的作用有哪些?9 2.结合实例谈谈园林植物基因工程改良的应用前景。3.常见DNA分子标记的种类及其工作原理。凝望生活上苍给了我们一双眼睛,是用来凝望生活的。但有人凝望了一辈子,也弄不清楚生活的模样。其实生活的模样就是凝望,凝望是人间最形象、最丰富、最真实的风景。凝望生活是一种审美。马克思说过:如果你想得到艺术享受,就必须先成为有艺术修养的人。一望无际的大海,一带绵延的山川,一堵雪白的墙壁,一座生动的雕像,之所以引人凝望神思,就是因为它们融会了生活的艺术。朋友之间的关切注视,爱人之间的脉脉含情,是生活艺术的升华;久别重逢或冰释前嫌之时饱含千言万语的深情一瞥,则是生活艺术的经典。凝望生活,是一幅画廊。以沧桑的理性作笔,沿着人生的主线,给生命以崭新的诠释和生动的假设,于人于世界的纷繁芜杂中融入人性的至纯。年少的凝望是好奇,充满了憧憬;年轻的凝望是柔情,充满了蜜意;中年的凝望是平静,充满了理性;老年的凝望是感叹,充满了回忆。凝望生活,是一腔投入。以愿望的翅膀为钩,系一线的浮子,让期待在想象中高度充值,赋予时光以全新的定义。屈子凝望汨罗江,是失意的时候;李白凝望月光,是思乡的时候;朱自清凝望荷塘,是孤独的时候;李商隐凝望乐游原,是黄昏的时候;弗洛伊德凝望墙壁,是寂寞的时候。那是种非同寻常的沉默,是伟大与成功诞生的前奏。凝望生活,是一支晨曲。在命运的每一次曲折跌宕、大起大落之后,一个个休止符开始了下一轮的自由组合;但休止不是停止,而是一个起点;后面的乐章,必将成熟稳重、热烈奔放、荡气回肠。凝望生活吧,让思维和往事作一次坦荡的毫无遮掩的交流,总结经验,及取教训,积蓄勇气,满怀执著,放眼又一段长征。但生活的改变,仅有凝望是不够的,凝望只是一块跳板,是思想的铺垫;凝望者不是没有泪,也不是没到伤心处,因为人生豪迈不应有悔,醍醐灌顶不应用泪,在凝望之中与理想和成功牵手,共点江山迷津,把过去、现在、未来凝望生活,生活也在凝望你。所有的竞争对手都在平等的氛围里重新谈判,所有的生命都在不同的命运里重新洗牌,所有的一切都在蓝天白云里重新开头。欣赏五彩缤纷的世界和绚丽多姿的生活,让心怀纯真、向往美好的人得以感受无尽的自然美和人性美,欣赏便由此而生。名山大川小桥流水,可悦人目;蝉吟虫唱风声雨声,可动人心;涛走云飞潮涌星移,可触人思;珍器古玩诗文书画,可怡人情。人世间一切挚情真意、美德善行也让人为之心热为之神往。用欣赏的眼光看自然与世情,我们会惊异地发现,大自然和生活馈赠给我们的竟是那么多,以至于我们常常迷茫了自己发现美的眼睛。因了欣赏,美就超越了自然的时空局限走进纯真的心灵并久驻人心,欣赏者的心灵也因美的净化而成为最理想的归宿。是欣赏在真、善、美与纯真心灵之间架起了一座彩虹桥,让真、善、美通向圣洁的心灵世界。因了欣赏,人发现了美,读懂了美,而美也感染了人,启迪了人。这是自然真谛与人生智慧相谐相融的绝妙境界,惟善于欣赏者才会有幸览胜其中。欣赏为欣赏者提供了足够的与美相伴的温馨感觉,让爱美之人与动人之美结下高山流水不解之缘。真正的欣赏,是一种滤尽了一切利欲渣滓的透明情怀。对真、善、美,倾心而不盲从,礼赞而不迷信,远观而不亵玩,用可靠的理智恰到好处地调控着审美情感既不凝滞,也不泛滥,纯然一种平和心态。欣赏是一种健康心态,非品格磊落之人不能拥有。譬如以赏花为喻。有不惜掏钱买花却疏于培育以至花儿香消玉殒者,有见花美而心动继而动手折之者,还有徒羡艳美外表而心仪于罂粟者,种种变味的欣赏或源于狂热冲动,或源于自私浅溥,使人获益不多反受累遭害。透过欣赏之物,可见欣赏者气度、品位及意趣。凡是善于欣赏者,都拥有一颗不凡的慧心。于他们而言,观一花即观一世界,见小草可见大精神。与常见之美面对,便享有一份与故知重逢的欣慰;与罕见之美面对,则仿佛与初识知音邂逅,有一种相见恨晚的惊喜。即使身处荒漠绝域亦能欣赏到平日常景常情难得体味的孤独苍凉之美。一个善于欣赏的人自然是胸藏锦绣,感觉里天地就更开阔明朗更亮丽空灵。相反,一个欣赏细胞缺乏的人,很容易可悲地自沉于一个满目灰暗了无生气的世界。像只有那种不含一丝尘杂平静如镜的水面才会将蓝天白云、茂林修竹、飞鸟游蝶等佳景美物不改变色地留住一样,只有没有遭受利欲渣滓的污染和浮躁之风侵袭的心灵才可以最真实地接纳一切真、善、美。有人赏物易,赏人难;有人赏远离自己生活之人易,赏身边人难;有人乐于自我欣赏而不屑于欣赏别人;还有人将欣赏异化为取悦和谄媚,异化为赤裸裸的吹捧和露骨的逢迎……种种病态的欣赏皆因心灵的水质失去了固有的洁净明澈而产生。所以,拒绝冷漠,抛弃虚伪,远离邪恶,欣赏才会成为一块成色极好的宝石,为你折射出世界缤纷生活的绚丽。在大雾中与你美丽相遇这座江北小城近年来雾多,天潮,黎明时分还是朗星高照,上班时节已是云海海雾茫茫。幢幢楼房隐匿在虚无飘渺之中,远处层层叠叠的山峦一下子幻化为无形。忙忙碌碌的人群穿行于云海雾山之中,诗意地前往各自的目的地,开始了一天中浪漫而多情的生活。我喜欢大雾,喜欢独自行走于偏僻幽深的小巷中迎面而来的大雾。雾富有诗意和哲理色彩,它让喧嚣的尘世呈现朦胧之美,它让有无共生,成败相形。当我们为生活所拖累,当我们为名利所缠绊,当我们志得意满,当我们遭遇困厄,当我们厌倦尘世,当我们苦不堪言,这时,一个人在前拥后遮的大雾中静静地行走,你会忽然发现,生活其实是诗意的,生命是最美的。秋末晨曦,我放浪形骸地在大雾中前行。这片天地仿佛成为自家的花园,古旧的小巷静谧阒寂,蒙蒙云雾充塞天地,满满当当。我昂首行五步,斜身绕三圈,学老汉柱杖,学老太踮脚,学孩童蹒跚,学秀女猫步……我放心飞灵,畅想美好,憧憬未来,心沛然飘散躯壳之外,神油然驰骋天地之间。影影绰绰,对面转出身影,跳跳荡荡,悠哉游哉,身形虚浮,婀娜多姿,惊鸿一瞥,错出一段只有开头没有结尾的故事。就在这个秋末,就在这大雾之中,仿佛重现了江南雨巷,仿佛有着一个撑着油纸伞的姑娘,曼妙行走于幽深幽深的小巷。错误也是一种美丽。从此,心漾荡而又温馨,仿佛天地间至真至美。看花已是非花,看雨已非真雨,风展眉而笑,月盈盈如水,鸟啁啾诉情,嘤嘤成韵。诗意地生活于每一天,晨星初起,已是精神百倍,抖落一身睡意,健步如飞,愉快地做着各种琐屑之事;夕阳西下,披着一身疲惫,心却如鸟儿,迎着万道霞光,徜徉在归巢的路途中。真想让百花永远盛开,真想让美妙的生活在世间永驻。还是幽雅的小巷,还是大雾的早晨,还是……唯独不见那把油纸伞,我错过了什么?也许我还停留在去年那个雾气迷蒙的早晨,你却已走进来年的那个“良辰美景”;也许我正走在江北古城的小巷,你却彳亍于三月的江南;也许我遥望东方的启明,你却已向往那弯残月;也许……雾海茫茫,走不出那段美丽的传说。江北古城,江南雨巷,踯躅,彷徨,摇曳出一树迷惘和希望。(孙守名)当爱已逝,给自己一片晴空指尖绕过的流年,沾染春温秋素的时光。一纸冰凉,是爱的底片在时间的冲刷中黯然消色。曾经撕心裂肺的爱过,曾经荒废时光,被一份悸动牵绊着。经年后,却是用尽全力换来一场回忆。当一份爱散了,兴许还会有别人在等待你,何不抛开以往所有,试着重新接受一段新感情。也许曾经爱到伤痕累累,试着忘掉一切,给自己一片自由的天空,给自己一个自由的理由。守着曾经留下的,只会加重思念的味道,只会让自己在低迷中错乱一生。当爱已逝,给自己一片晴天。放飞属于自己的梦想,扔掉旧爱留下的所有,重新寻找自己的追求。未来,我们依旧笑靥如花,即使步履蹒跚也不停歇。阳光下的追梦人抉择,站在人生的路口,莫名的苦痛,人生的抉择将强大的自己再次击倒。这是守望者的无奈和揪心的迷蒙,那个阳光下的追梦人,真实写照着我们的惨淡人生,或许此刻的艰辛和心酸后退于他人,但是,假以时日……有时候坚持是一种锥心的疼痛,没有支持,没有鼓励,只有一个人独自前行的孤单和畏惧,甚至是来自于他人无谓的嘲讽,也许渐渐开始怀疑自己是否愚蠢,是否真的执迷不悟,但我们还是鼓起勇气,拼了命的也想要一直走下去,因为我们相信未来是成功的开始,是一片坎坷后的光明。幸福不是必然的,尽管我们与成功背对背拥抱,也不过是执掌在手中的影子罢了。我们恣意奔跑,无论往哪个方向,也终会到达另一片天空。蔚蓝是它的本色,一望无际是它的胸怀,心有多大,舞台就有多大,这一句不变的言语支撑着我们不断位移的脚步。相信自己,永远比相信命运重要,坚守承诺,永远比序言妄想和风云变幻来的诚恳。信念是一片宽阔的沙丘,忍受着所有的寂寞,感叹着时光的蹉跎,世界的落寞等琥珀的泪水来融化,大雨滂沱的季节等地老天荒的执着。我们可以逞强,我们看似疯狂,但是未来还有多少把握,我们任凭它潮起潮落。其实,我们何尝不害怕一切烟火过后只是空白,但是付出终究会有回报,奋斗的过程是一种经历,是人生不可多得的财富,只是看我们,如何去想,如何去领悟,如何如珍惜。漫漫长路无声无息,或许我们一生也在追寻,那又怎样,打破的宁静换回一生的威名,哪怕赴汤蹈火,在所不惜。千山暮雪天涯远,万古流长的亘古情怀,学智者接纳红尘纷扰,却置身事外,博得一份淡然。尽管曲终影自单,冷月残照孤星夜,沧海连天堑,南辕北辙的沦陷,不自觉反省过往。倾听那年湖畔笛声赛悠扬,一湖秋水、一缕青丝为梦而唱,江南如画烟雨绽芬芳,醉里吴音相媚好,娇惹了三月的春华。恋上那年溪水叮咚舞红妆,一竹梅笛、一曲小调倚梦而响,清荷宛在水中央,沉醉了月色朦胧,落英候着姗姗来迟的日光。凭栏眺望远方,人生旅程在何方?心指明了方向,诗一行,水一汪,无奈笑沧桑。然而长叹一声,回首青春,继续我们的梦想。留在记忆深处岁月的温度,时间的落差,在梦里,在情里,在伤感的回望里。留在记忆深处,如果是属于你的悲伤,请你忘记,如果可以真的忘记吧,就像放开一切的那些碎屑,消失风中。其实更像是水消失于水当中,一个人消失得无影无踪,消失在信仰的背面。留在记忆的深处,留在深深的梦里。看见那些悲伤的时刻,属于你只是属于你的,看不见其他的灰尘。我独饮这所有的守望,看见悲伤悄悄降临,是的,在记忆的深处,我其实早已经死去,就像缓缓绽放的花蕾,一生积累着哀伤。不在自己的寂寞里死去,就在自己的伤悲里留住。是的,就像时间的落差,调整那些梦幻般的颜色,消失在苍茫之间,只属于你,只看见你的眼睛如此炙热,就像夏天的火球。你能够说出什么,当悲伤已经消失了,我不能说出更多的谎言,就算时间流逝再快,我也想留下来,是的,我是岁月带不走的那一块石头。长满青苔,长满时光的疤痕,你一道道揭开,一道道毁灭给自己看。留在记忆的深处,连同那些消陨的树叶,连同树叶之中铺平的灰烬和伤心。是的,就此打住吧,如果你还有时间,请你记得我,如果你还有理想,请你忘记我。在记忆的深处,就像白云深处的人家,何处是我的家园?看着你,就像隔着几个季节。我看见那些秋天的树叶,冬天的雪花,那些哭泣的耳朵以及湿漉漉的眼睛,还有谁能够记起我,在时光的深处,没有任何的借口,不能得到任何的宽恕。只在你的回忆里,成为洁白的云朵,一次次在故乡的怀抱里闪烁。是的,闪烁,就像星星一样,就像星星之中冷凝的灰尘一样。不能说出更多,不能忘记更多,就是你的眼睛,冷过了那年的霜雪,封住我的幻想,在梦中,在雨中,漂流!向日葵灿烂在遥远的山坡上。我知道季节已经老去多年,我眼眶深深的等待呀,像风一样,消失在自己的恐慌里。河流弯曲在远方,那不是我的家乡,留在记忆深处,那不是我幻想的玫瑰,不是玫瑰的血更不是玫瑰血中深深的伤心。还有什么值得记忆,就像我窗前的百合花,就像床前明月光,我不会想起那是远方的冰霜落在我的眼角上,我看见的只是岁岁年年,年年岁岁,就死在我的手掌里。所以我向着远方挖掘回忆的掌纹,那些开向太阳的窗子,那些死在梦里的故事,我不能说更多的哀伤,就像我此时的心情,比纸透明,比冰雪洁净。回不去的终将成为记忆,成为记忆的终将在时光里死去。阳光之下,大地之上,不能有回忆,死去的将是你永远的痛苦,却一次次被你打开。是吗,我在回忆的角落里,在那些灰尘里,看见的都是你的过去?是吗,开始之后我无法结束,只能在毁灭的时刻,看着自己当年的悲伤痛哭失声?是吗,我一遍遍问自己,却被时光一次次嘲笑。那些霜雪之中的精灵,洁白的云朵,那是传说也是传说之中的悲伤,我不能确定的世界,我不能相信的世界,停止吧,旋转不再,神灵不再,停止吧,如果生命已经成为记忆,你还愿意守望这破败的星球吗?留在记忆深处,留在梦开始的地方。源头开满鲜花,那是你的笑容,闪烁在回忆的盘子里。是的,星星落下来,月亮烧焦了,满眼都是末世的景象!是停止的时候了,在记忆的深处,在记忆深深的烙痕里,我看见风中堆满了往事的瓶子,消失苍茫之间。嘴唇之上闪烁着虚假的言辞,那是你呀,在我的语言之中复活。虚空的风,消失在我记忆的深处,留不下来,还有那些等待的时刻,我守望着,等待着,已经不能回头。留在记忆深处,留在你悲伤的眼睛里,那些扭紧的手掌,灰尘堆积,歌声已远,井水已枯干,还有什么留下来,还有什么是记忆。就算没有,内心早已安静。好朋友简简单单好知己清清爽爽在生命过程中,由于人生观、世界观,情趣爱好和性格特点等相近,会有很多男女朋友,有校园朋友,有职场朋友,网络朋友——我感动每一次缘的靠近,一个简短的问候信息,一段亲切的电话交谈,一个生动活泼的表情的发送,一份生日礼物的祝福,一首轻快飞扬的歌曲,都如此让我感动。感慨缘的美丽,感动友情的温馨,感谢朋友的温暖。淡淡的友情很真,淡淡的问候很醇,淡淡的孤独很美,淡淡的思念很深,淡淡的祝福最真!淡淡的温暖将友情的灯光点亮,温馨地照耀这人生的旅途,拥有朋友的人生不再孤单,拥有友情的生命不在孤独,拥有情谊的生活不在寂寞。一段经典的文字再次读过“有一把知己,是能够在心灵上相通,能够相互了解相互敬慕的人。知己是能够相互体谅,以心相悦、以心相伴的人。他们可能近在咫尺,也可能会相隔遥远,他们相互想念时不一定会告诉对方,但一定在心里时时牵挂。他们能互相读懂对方的每一个眼神,能明白对方每句话的含义。也不一定朝夕相处,但一定会把对方放在心里,阴晴圆缺时能给对方一个问候。家,不是讲理的地方家,不光是住人的地方,更是心之居所,有亲人才能算是家,否则只是一栋空房子,再大再舒服也不能算是家。家是温馨、亲切的称谓;家是心灵的港湾;家是身心疲倦休息的场所;家是受伤后的疗养所;家是你放下所有面具,做回真我的地方。男人是泥,女人是水,所以男人结合不过是“和稀泥”。婚姻是两个人打伙过日子,不必什么事都太计较、太在意。生活在芸芸众生、大千世界里,难免会泥沙俱下,倘若生就一副“容不得沙子”的性格,那只会弄得对方很累,自己也累。用惩罚对方的方法来惩罚自在琐琐碎碎的家庭生活中,夫妻之间不要遇事都想争个理儿,争个我是你非,我对你错、你长我短、你高我低。在家里据理力争,常常要付出十分高昂的代价。家里本无大事,琐琐碎碎,平平常常,如果为这些鸡毛蒜皮的事各讲各的理,各唱各的调,甚至抱定一堆子虚乌有的推理伤害对方、敌视对方,那这个家庭就只有争吵,只有战火,只有密布的阴云,肯定不会再有快乐与幸福执子之手,与子偕老,是我们每个人的向往和追求。我们要用爱去拥抱家庭,而不能让家成为辨别是非的法庭;我们要用爱,让家成为爱的伊甸园,让家充满欢乐,充满温馨。家!是我们的心之居所。温馨的家,是要用爱去经营,用宽容去谅解,用信任去理解的家。记住!家永远不是讲理的地方!婚姻需要摩擦,更需要宽容和理论!夫妻之间更不是讲理的关系,夫妻之间的是是非非,绝不是简单的对与错的问题。互相关爱、互相妥协才是维持美满婚姻的上上策。人性不敌物欲提到美国,也许人们马上会想到,这是一个现代化的国家,生活节奏快,都市霓虹灯闪烁,酒吧餐馆歌舞升平,人们尔虞我诈勾心斗角,人情冷漠,家庭观念不强,性方面非常开放,各种消费欲望极强,钱才是上帝。到了美国你会发现,以上描述基本符合如今中国的状况,与美国关系不算太大。在美国很多城市里,过了晚上8点找饭馆并不是轻而易举的事,很多餐馆都已关门,过了9点10点更难,街上到处都很安静,包括纽约也是如此。上班的日子里,很难见到酒吧爆满夜夜笙歌的情景,只有周末会热闹一些。对于我们这些没时没点的电视人来说就苦了没办法,我们依然处于欲望占据上风的发展阶段,我们还处于用物质来奖赏生命的阶段,离背起行装去山水中激活生命还有距离。还在这个阶段就要面对,谁也无法一跃而过,只是不希望,我们在欲望面前牺牲几代人。从美国回来后,我说过一句话:“当下的中国,由于欲望,我们的人性处于退步的阶段。”按理说,这话并不好听,却意外地得到了八九成网友的支持。我突然明白,人群中,充满希望的一种欲望正在悄悄地形成中,而这种欲望与物质无关,却离心灵很近。人生如戏人生如戏,戏如人生,你演着谁的喜怒哀乐与悲欢离合?浮生若梦,若梦浮生,谁是你的梦中人,谁可以陪你度过若梦浮生,踏碎虚实浮华?我们都是演员,自以为我们的生活有多么悲情,但我们演着的都是别人早已演了千万遍的。我们觉得自己的故事有多悲伤,但实际上局外人看过了千万遍,直到他们连眼泪都吝啬于给。他们都已是冷眼看着世间恩怨。而我们还傻气地扮演着我们的角色。那个角色或是悲哀,或是博爱,或是可怜,或是励志。又怎样呢?真正掌握着人生的上帝在天上看着我们大笑。无论我们怎样?谁把谁伤了,谁把谁忘了,在他眼里不过是昙花一现。轻笑一过。他看多了。他看多了,演员为了自己伤害朋友。他看多了,我们演着的悲观离合。他看多了,这丑陋的人生,不单纯的社会,还有多变的我们蹩脚地演着百态人生。这舞台真大,不停地变,世界在变大,我们在变小。最后,落幕,落幕的黑暗,比想象更长,比盲目更暗。我们还要准备下一场戏,下一场人生。其实人生真的不过一场戏,我们以为多悲情的事,我们以为多大不了的事也不过这个样子。所以,安之若素一点,把一些事情看开一点。不要想太多,我们不过是在演戏,演一场人生之戏。把事情想看点,不要让自己这场戏无疾而终。这舞台太大,我们显得卑微,但是最起码让自己演绎出最美的模样。是,我们在演戏。你知道,剧本是上帝写的,可是剧情是我们自己演的。你知道,这舞台越来越大,那让自己也强大起来,与舞台齐平。你知道,我们都在这舞台演戏,演自己的人生,轮回往复,所以把很多事看开点。并不是谁离开谁就过不了。你知道,我们在戏里要会装,心里才会觉得踏实。那就装吧,只要自己知道那个是真的自己就好,让自己踏实一点。这演的一场戏,又好如一场梦,梦醒人回,等待下一场梦。梦里,总是没什么感受,有些感受过了就过了,别太在意。就像有些话听到的时候只要感动就好了,不要去怀疑。那样自己会演的好一些,过得好一些。梦里面有人哭,有人笑,有人哭一刀两断,有人祝百年好和,有人咒不得好死,那些话真的听过就忘吧,别往心里去,毕竟,梦一醒,什么都没了。既然是做梦,就争取做自己喜欢的,做个美美的梦。管他下一场戏是怎样的,管他下一个人生会是怎样的,管他下一个梦是怎样的,当下这个梦是好的就好了。既然是演戏,就演好一点,演像一。既然是做梦,便不要想太多,伤害的忘记就好。人生如戏,戏如人生,不管你演着谁的喜怒哀乐与悲欢离合,都请你演出自己最美的模样。浮生若梦,若梦浮生,管他谁是你的梦中人,都愿你找到一人,他可以陪你度过若梦浮生,踏碎虚实浮华。孤独,有时候更像一杯水,没有杂质、没有污染,是一种清静幽雅的美。当沉浸于孤独中的时候,没有了喧闹的杂乱,没有可以打扰到我的思绪,也不会因冲动而留下遗憾和后悔;沉浸在孤独中,能让自己平和、冷静、思考、稳重,让有一种超越世俗的感觉,让有一种聆听自己的心语,让有自己感受这不易察觉的美。孤独的时间也是珍贵的,孤独的方式是各种各样的,体会孤独也是因人而异的,体会快乐的孤独感觉是被动的,是需要你去争取去领悟。懂得领悟孤独的人,就会体味人生中孤独所拥有的独特景致。孤独的最高境界莫过于在孤独中创造,多一份孤独的快乐;一份无为的浪费,让生命的每一分每一秒不至于虚度。在孤独中拥有了自己的一切,你就会觉得你一点也不孤独,于是你就会白,能够真正拥有孤独的人是世界上最为幸福的人。其实,人在孤独的时候,总是在怀旧感受和品味曾经的种种,在这个时候,总是会想起曾经的故事,心情也就随之降到了冰点,悲伤的,挥不去的记忆就会填满整个心底。于是,悲哀着自己的悲哀,感伤着自己的情怀!孤独中的人可以寻找到自己最初想要的本真;可以感受到自己坚强的信仰;也可以感受到人生的悲喜与无奈;也会让你明白该如何去切换生活的态度。让你的心灵小憩在孤独小丹之中,享受一回孤独,品味一次孤独。别害怕孤独会淹没了你,因为孤独不是海,它是你的空间,是属于你的另一个空间。你可以在那里找回很多久违了的感受,也可以在那里找到你心灵出发的起点,找回你生命中最想要的东西。9