环科环工普通生物学

实验一显微镜下的生命世界一、实验目的掌握显微镜的使用方法，了解生物细胞形态多样性，了解各基本组织结构、机能。二、实验器材、药品显微镜、剪刀、镊子、刀片、载玻片、盖玻片、镊子、牙签、滴管、细胞永久装片、组织永久装片、生理盐水、高锰酸钾、亚甲基蓝。三、实验内容1.显微镜的构造及使用；2.人口腔黏膜上皮细胞临时装片制作及观察；3.酵母菌水装片制作与观察；4.植物表皮细胞临时装片制作及观察；5.动植物组织永久装片观察四、实验步骤（一）显微镜的构造及使用1．显微镜的基本构造：显微镜的中部有一弯曲的柄，称镜臂，基部为镜座。右手握紧镜臂，左手托住镜座，保持镜体直立，轻放于实验台上，观察各部分构造。镜座上的短柱叫镜柱。镜臂基部有一方形或圆形的平台，是载物台（或称镜台）。台的中央有一圆孔，可通过光线，载物台上有镜台X-Y驱动器，用以固定和移动玻片标本。圆孔下面，有由一片或几片透镜所组成的聚光器，有集射光线于物体的作用。聚光器附有一组由金属片组成的可变光阑，其侧面伸出一杠杆，可前后移动使光阑开闭。光阑大则光线强，适于观察色深的物体；光阑小则光线弱，适于观察透明（或白色）的物体。在聚光器下有反光镜，可将光线反射到聚光器。内光源显微镜的光源位于镜座靠后方，在镜座右侧有光源按钮，此按钮可前后移动，用以调节光线的强弱。在载物台的圆孔上方，有一附于镜柄上端的圆筒称镜筒，镜筒上端有接目镜（或称目镜），有不同规格，可放大不同的倍数。较长的是低倍，较短的是高倍。镜筒下端有可旋转的圆盘叫旋转器，下面附有2-4个接物镜（或称物镜），以螺旋旋入旋转器内。物镜也有低倍和高倍之分，较短的是低倍，较长的是高倍，放大的倍数镜头上有标记。还有一个物镜是油镜，镜筒上有OIL或OEL字样。转动旋转器可换不同的物镜。在镜臂上有一组大小相套的螺旋，外周大的叫粗调焦器，中央小的叫细调焦器。显微镜总放大倍数是接目镜的放大倍数与接物镜的放大倍数的乘积。2．显微镜的使用方法：使镜臂反对着自己，摆好显微镜。转动粗调焦器，把镜筒向上提起。转动旋转器，使低倍物镜对准载物台上的圆孔，二者相距约2CM左右，打开光源按钮，一边移动按钮调节光线，一边对着双筒接目镜观察，呈现一片均匀白色即可。取一组织装片放载物台上，使材料正对圆孔，用X-Y驱动器固定好玻片，转动粗调焦器，使低倍物镜与玻片之间的距离最短，然后向目镜内边观察边旋转粗调焦器，直至视野内材料清晰为止，此为调焦点，再以可变光阑调节光线的强弱。低倍镜观察完可转高倍镜。首先将要详细观察的部分移到视野中央，提升镜筒，转动旋转盘，换高倍镜，从侧面观察镜筒与玻片间的距离，使高倍物镜几乎接触玻片为止（大约1MM）,再从目镜观察，转动细调焦器，一般旋转半圈至一圈即可出现物像，有的显微镜在低倍镜下调好焦，直接转到高倍镜即可。使用高倍物镜时，一定要先从低倍物镜开始。准备详细观察的部分，一定要移到视野中央。在高倍镜下调焦点只能用细调焦器，不能用粗调焦器。光阑要开大。由低倍镜转高倍镜需多练几次。使用油镜时，首先在高倍镜下调准焦点，将要观察的部分移至视野中心，转动旋转器，使油物镜转到一旁，在盖片上视野中央的位置加一滴镜头油（具一定折射率），再将油物镜移回，使其镜头浸入油中，开大光阑，即可看到物像，稍旋细调焦器即可看清物像。用后旋转粗调焦器将物镜和载物台之间距离拉大，然后将油镜移至旁边，用镜头纸沾镜头清洗液轻轻擦试，不宜用二甲苯或相似溶剂擦试，以免破坏镜头中的胶合剂。观察完毕，必须先把物镜转开，然后取出装片。每次实验完毕，都要把高、低倍镜转向前方，不可对着聚光器。要注意经常保持显微镜的清洁，如金属部分有灰尘时，一定要用柔软洁净的布擦干净，如镜头有灰时，一定要用特备的镜头纸擦，切勿用手或其他布、纸等擦试，以免损坏镜头。（二）人口腔黏膜上皮细胞临时装片制作及观察 滴一滴0.7%生理盐水在载玻片上，用清水漱口，取一根牙签，把粗端浸入0.1%高锰酸钾溶液里消毒后，伸进自己口腔里，在颊部轻刮几下；把牙签头放在载玻片的生理盐水里搅一搅，滴一滴亚甲基蓝溶液,盖上盖片,低倍镜下观察，找到口腔上皮细胞后，移至视野中央，转高倍镜观察。（三）酵母菌水装片制作与观察取1滴酵母菌溶液于载玻片上，滴一滴亚甲基蓝溶液,盖上盖片,低倍镜下观察，找到口腔上皮细胞后，移至视野中央，转高倍镜观察。（四）植物表皮细胞临时装片制作及观察避开大叶脉，撕取植物下表皮置于载玻片上，滴一滴清水，盖上盖玻片，在显微镜下观察。（五）动植物组织永久装片观察选择动植物组织永久装片各2张观察。一、实验作业1．绘制人口腔黏膜上皮细胞3-4个，并发送照片1张；2．发送酵母菌水装片照片1张；3.发送植物表皮细胞临时装片照片1张；4.发送动植物组织永久装片照片各2张。实验二叶绿体色素的综合实验一、基础知识:叶绿体色素是植物吸收太阳光能进行光合作用的重要物质，主要由叶绿素a、叶绿素b、胡萝卜素和叶黄素组成。从植物叶片中提取和分离色素是对其认识和了解的前提。利用叶绿体色素能溶于有机溶剂的特性，可用丙酮提取。植物色素包括脂溶性的叶绿体色素和水溶性的细胞液色素,前者存在于叶绿体中，与光合作用有关，如叶绿素。二、目的要求：掌握分光光度计的使用方法，掌握叶绿体色素的提取方法及其性质。三、实验内容：叶绿体色素的提取和性质测定。四、主要器材、药品：台天平、研钵、量筒、烧杯、漏斗、丙酮、碳酸钙、石英砂、分光光度计、分液漏斗、移液管、吸球、试管、氢氧化钾、乙醚、甲醇、盐酸、醋酸铜、新鲜植物叶片。五、实验学时：5学时六、操作步骤1.称取新鲜叶子0.2g，放入研钵中加丙酮5ml，少许碳酸钙和石英砂，研磨成匀浆，再加丙酮35ml，然后以漏斗过滤之，即为色素提取液。2.叶绿素的荧光现象取上述色素丙酮提取液少许于试管中，用反射光和透射光，观察提取液的颜色有无不同。反射光观察到的溶液颜色，即为叶绿素产生的荧光颜色。3．光对叶绿素的破坏作用取上述色素丙酮捉取液少许，分装在2支试管中，1支试管放在黑暗处(或用黑纸包裹)，另1支试管放在强光下(太阳光)，经2—3小时后，观察两支试管中溶液的颜色有何不同?4．铜在叶绿素分子中的替代作用取上述色素丙酮提取液少许于试管中，1滴1滴加入浓盐酸，直至溶液出现褐绿色，此时叶绿素分子已遭破坏，形成去镁叶绿素。然后加醋酸铜晶体1小块，慢慢加热溶液，则又产生鲜亮的绿色。此即表明铜已在叶绿素分子中替代了原来镁的位置。5.黄色素和绿色素的分离取上述色素丙酮提取液10m1，加到盛有20m1乙醚的分液漏斗中，摇动分液漏斗，并沿漏斗边缘加入30m1蒸馏水，轻轻摇动分液漏斗，静置片刻，溶液即分为两层。色素已全部转入上层乙醚中，弃去下层丙酮和水，再用蒸馏水冲洗乙醚溶液1—2次。然后于色素乙醚溶液中加入5m130%KOH甲醇溶液，用力摇动分液漏斗，静置约10分钟，再加蒸馏水约10m1，摇动后静置分离，则得到黄色素层和绿色素层，分别保存于试管中。6.用分光光度计观察、记录如下溶液的投射比（即不能吸收而透过的光量）并解释、分析 你观察的现象：(1)色素丙酮提取液(2)黄色素乙醚溶液(3)皂化叶绿素甲醇溶液(4)被光破坏的色素丙酮溶液(5)被铜取代了镁的色素溶液。七、实验作业：分析实验数据及结果实验三螯虾的外形观察和内部解剖一、实验目的：通过对螯虾的外形和内部结构的观察，了解甲壳纲动物在形态结构上的主要特征。二、实验内容：螯虾的外形和内部结构的观察。三、实验材料、药品及用具：螯虾，显微镜，解剖镜，解剖盘，解剖器具。四、实验内容和方法（一）外形：身体分头胸部和腹部，体表被以坚硬的几丁质外骨骼。将标本放在解剖盘中，按下列顺序观察。1.头胸部：由头部与胸部愈合而成，外被头胸甲，头胸甲前部中央有一侧扁的额剑，上缘有齿7-9个，下缘有齿3-5个。额剑两侧各有一可自由转动眼柄，其上着生复眼。2.腹部：长而侧扁。各节的外骨骼可分为背面的背板，腹面的腹板和两侧下垂的侧板。观察体节间如何连接？这种连接对其运动有何作用？尾节扁平，腹面正中有肛门。3.附肢：除第一体节和尾节无附肢外，螯虾共有19对附肢，即每体节1对，除第一对触角是单枝型外，其余都是双枝型。但随着生位置和作用不同而有不同的形态结构。（1）头部附肢：共5对。从上往下依次为小触角1对，大触鞭1对，大颚1对，小颚2对。（2）胸部附肢：共8对，依次为颚足3对，步足5对，步足细小，前3对末端钳状，第三对最长，其余末端爪状。试分圻步足的作用。雄虾第五对步足基部内侧各有一雄孔，雌虾第三对步足内侧各有一雌孔。各足基部有生有羽状鳃，注意其着生位置。（3）腹部附肢：共5对。雄性第一腹肢的内肢变成交接器。第二腹肢内肢内侧具一小型雄性附肢。（4）尾肢1对，与尾节构成尾扇，有何作用？（二）内部结构：1.呼吸器官：用剪刀剪去其右侧鳃盖，即可见鳃，观察其足鳃、关节鳃和肢鳃。分析其作用有何不同？数目如何？然后仔细移去头胸甲，背板，观察肌肉附着于外骨骼内的情况。2.肌肉：为成束横纹肌，往往成对。比较与其它无脊椎动物肌肉的差异。3.循环系统：为开管式，观察心脏与血管。（1）心脏：位于头胸部后端背侧的围心窦内，半透明、多角形肌肉囊。在其背面，前侧面和腹面各有一对心孔。（2）动脉：细而透明。由心脏前行的动脉5条，即1条眼动脉，1对触角动脉，1对肝动脉。由心脏后端发出1条腹上动脉。在胸腹交接处，腹上动脉基部，发出一条弯向胸部腹面的胸直动脉。4.生殖系统：雌雄异体，摘除心脏即可见生殖腺。（1）雄性：精巢1对，位于围心窦腹面。白色，呈三叶状，前部分离为二叶，后部合并为一叶。每侧精巢发出1条细长的输精管，末端开口于第五对步足基部内侧的雄性生殖孔。（2）雌性：卵巢1对，位于围心窦腹面，性成熟时为淡红色或淡绿色，浸制标本呈褐色。颗粒状，也分三叶，其大小随发育时期不同而有很大差别。卵巢向两侧腹面发出一对短小的输卵管，其末端开口于第三对步足基部内侧的雌性生殖孔。在第四、五对步足间的腹甲上，有一椭圆形突起，中有一纵行开口，内为受精囊。5.消化系统：生殖腺下方左右两侧各有一团淡黄色腺体，为肝脏，剪去一侧肝脏，可见肠管前接囊状的胃。胃分为体前的壁薄的贲门胃和其后较小、壁略厚的幽门胃。剪开胃壁，观察贲门胃内胃磨及幽门胃内刚毛状结构着生情况，有何功能？用镊子轻轻提起胃，可见贲门胃前腹方连有一短管，即食管，食管前端连于由口器包围的口腔。幽门胃后接中肠。中肠很短，一对肝脏位于其两侧，各以一肝管与之相通。中肠后即为贯穿整个腹部的后肠，以肛门开口于尾节腹面。 6.排泄系统：剪去胃和肝脏，在头部腹面大触角基部外骨骼内方，可见一团扁圆形腺体即触角腺，为成虾排泄器官。生活时绿色，又叫绿腺，浸制标本常为乳白色，它借宽大而壁薄的膀脱伸出的短管，开口于大触角基部腹面的排泄孔。7.神经系统：除保留食管外，将其他内脏器官和肌肉全部除去，小心沿中线剪开胸部底壁，便可见体腹面正中线处有一条白色索状物，邵为其腹神经索二，由两条神经干愈合而成。五、作业：绘虾的螯足图，注名各节名称。实验四血液的综合实验一、基础知识：人体红细胞中有凝集原，血清中有凝集素，相同血型的凝集原和凝集素不能凝集，而不同血型的凝集原和凝集素能凝集，从而使红细胞凝集沉淀；根据含有的凝集原和凝集素的不同将血液分成4中类型：有A凝集原、抗A凝集素的A型血、有B凝集原、抗B凝集素的A型血、有A、B凝集原、无凝集素的AB型血、无凝集原和有抗A、抗B凝集素的O型血；将标准抗A血清和标准抗B血清与未知血型的血液混合，只在前者中凝集的是A型，只在后者中凝集的是B型，在两者中都凝集的是AB型，在两者中都不凝集的是0型。人的白细胞有5种：颗粒型的中性粒细胞（占白细胞总数的50-70%），嗜酸性粒细胞（占白细胞总数的8%左右），嗜碱性粒细胞（占白细胞总数的1%以下），非颗粒型的大单核细胞（占白细胞总数的7%左右）和淋巴细胞（占白细胞总数的20%左右）。二、实验目的：了解血涂片的制作方法，了解红、白细胞形态、功能，了解出血时间和凝血时间的测定方法，掌握ABO血型的测定原理及方法。三、实验器材、药品、材料：显微镜、采血针、小试管、吸水纸、洁净载片、双凹玻片、牙签、消毒棉签、标准血清A和B、生理盐水、75%酒精、消毒棉球、蒸馏水、瑞氏染液。四、实验内容和方法：（一）人血涂片的制作及观察用75%酒精棉球消毒左手无名指指端侧面，待酒精挥发后用消毒的采取针刺破皮肤，深约2-3mm，使血能自然流出。滴一滴血于干净载片上，用另一边缘光滑的载片一侧在血滴上以45度角推一下，涂成一薄而均匀的血层，用瑞氏染液染色3-5分钟后冲去染液，自然干后镜检，观察各种血细胞。（二）ABO血型鉴定1.制备红细胞悬液：指端或耳垂采血1滴，置于盛有1ml生理盐水的小试管内，摇匀即成。2.取双凹玻片一块，用蜡笔在两端分别写上A、B字样，用小滴管在两侧凹内分别滴加1滴A型血清和B型血清，再用小滴管在两侧凹内各滴1滴红细胞悬液。3.将玻片轻动数次，或用牙签搅拌，使红细胞悬液与标准血清充分混匀。放置15分钟左右，用肉眼观察有否凝集，判定自己的血型。五、实验作业：绘制自己五种白细胞图，并发送照片。测定自己血型。