微生物标准操作规程三

XXX人民医院检验科微生物室标准操作文件文件编号：JY-WSW-SOP-007版本号：2007第1次修改编写者：XXXXXX审核者：XXX修订日期：2012年1月15日页码：第1页共2页军团菌属检验标准操作规程1.概述军团菌属细菌是一群病死率较高的急性呼吸道传染病的病原菌，该菌属包括45个种（60多个血清型），已从人体分离出的有嗜肺军团菌、米克戴德军团菌、波兹曼军团菌等20种。嗜肺军团菌是军团菌属的代表种。2.标本类型痰等标本。3.鉴定3.1形态与染色革兰阴性纤细小杆菌。荧光显微镜下克见被荧光抗体包被的发亮菌体。3.2培养特性在缓冲活性炭酵母提出物琼脂（BCYEα）培养基上，本菌生长缓慢，应每日观察生长情况，在BCYEα上需要3～5日方见菌落，数日后增大到4～5mm，菌落呈灰白色，有光泽。3.3生化反应大部分菌株氧化酶试验阳性，不分解糖类，动力、明胶、马尿酸钠试验阳性，触酶试验弱阳性，多数菌株产生β-内酰胺酶3.4鉴别要点3.4.1本菌属特征革兰阴性细小杆菌，有多形性，苏丹黑染色可显蓝黑色或灰蓝色脂肪滴。在BCYEα平板上3～5日形成蓝灰色、有光泽的菌落。普通琼脂平板上不生长。3.4.2根据在BCYEα琼脂上生长的菌落，在紫外线365nm灯光照射下产生红色荧光可推断为红色军团菌；产生蓝白色荧光，如氧化酶阳性，则为博氏和其他军团菌，如氧化酶阴性，则为杜氏、戈氏、彻氏、图森山军团菌；产生无色荧光，则根据马尿酸水解、氧化酶及其他生化反应进一步鉴定。3.5操作步骤3.5.1涂片、染色革兰阴性杆菌。3.5.2鉴定直接荧光抗体染色，生化反应。4.药敏参见《药物敏感性试验标准操作规程》及CLSIM100-S20最新版本文件。5.质量控制见《质量管理程序》。6.检验结果解释与分析本菌虽然营养要求和培养环境要求严格，但在外环境分布较广，并可长期存活，致使通过污染水源空气而传播致病。从临床或环境标本中分离军团菌时，需先对标本作酸处理（军团菌耐酸而其他杂菌则易被酸杀灭），并使用选择性琼脂平板（在BCYEα 琼脂平板上加入抗生素等抑制杂菌），以提高军团菌的检出率。军团菌对多种抗菌药物敏感，包括红霉素、利福平、氨基糖苷类抗生素、β-内酰胺类抗生素、氯霉素、复方磺胺甲恶唑、多西环素和氟喹诺酮类等。7.临床意义军团菌是一种以肺部感染为主的全身性疾病，嗜肺军团菌是军团菌病的病原菌。可通过空气传播进入肺脏，临床表现多种多样。易于侵犯患有慢性器质性疾病、免疫功能低下的病人。也可从河水、空调器的冷却水、浴室和雾化器等处分离到，为医院感染的主要致病菌之一。8.操作流程痰BCYEα平板3～5日灰白色有光泽菌落后生长菌涂片革兰染色G–杆菌荧光抗体染色，生化鉴定军团菌属 参考文献临床微生物检验标准化操作（第二版）