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2013届二轮复习测试题---生物技术实践综合检测2(45分钟100分)1.(10分)(2012·淄博模拟)某班同学用新鲜苹果榨取果汁并制作果酒,其简要流程如下:(1)实验过程中,该小组同学发现榨取的果汁非常浑浊,解决的方法是__________________________________。(2)分离酵母菌应使用_______培养基,固定化酵母细胞常采用_______法,若想使这些酵母细胞能反复使用,实验过程中一定要注意_____________________。(3)在酸性条件下,可用_______来检测发酵产物中是否有酒精产生。若想进一步检测所得果酒中酵母菌的密度,可采用_______法。(4)发酵完成后,该班同学制作的果酒品质非常好,为方便后续年级使用,可将菌液________________________保存。(5)另一个班的同学用葡萄制作的果酒酒味醇正,放置一段时间后,发现果酒带有明显的酸味,请分析出现酸味的原因:_______________________________。2.(15分)某兴趣小组就“泡菜腌制过程中亚硝酸盐含量变化”开展了研究,操作如下:1月4日下午选取1、2、3号三只相同的泡菜坛,在每个坛中加入洗净的新鲜莲花菜0.6kg,再分别倒入等量煮沸并冷却的10%的盐水,将坛密封,置于同一环境中。封坛前进行第一次取样测定亚硝酸盐含量,后来定时测定,结果如下图。-8-
(1)测定亚硝酸盐含量的方法是_________,其原理是:在盐酸酸化的条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后,与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成___________,将显色反应后的样品与已知浓度的标准液进行目测比较,可以大致估算出泡菜中亚硝酸盐的含量。(2)实验中,盐水加热煮沸是为了___________;冷却之后再使用是为了保证___________等微生物的生命活动不受影响。(3)在腌制过程中,坛中溶液量会增加,原因是___________________________。(4)图中数据表明,泡菜在腌制的第_______天亚硝酸盐含量达到最大值,腌制到第_______天以后再食用可以较好地避免亚硝酸盐对人体健康的危害。(5)实验中三只坛中产生的亚硝酸盐含量存在差异,最可能的原因是__________________________________________。(6)为了让实验数据更好地表明泡菜腌制过程中亚硝酸盐含量变化,对该实验所获得的三组数据应进行怎样的处理才更合理?3.(9分)(2012·东城模拟)某实验小组欲从土壤中筛选出能分泌淀粉酶的芽孢杆菌,设计实验步骤如下,请给予合理的补充。(1)采样与培养:将采集的土样混匀后称取1g,置于经过灭菌处理的_______(填“固体”或“液体”)培养基中,28℃振荡培养。(2)接种与选择:为避免培养液中菌体浓度过高,需将培养液进行_______处理。之后,将菌液涂布接种于以_________为惟一碳源的固体培养基上,30℃条件下培养。为避免污染,需将培养皿呈__________状态放置。此外,为排除其他因素的影响,提高实验可信度,本步骤需设计_____________作为空白对照。(3)筛选与纯化:将适量的碘液滴加在平板中的菌落周围,如果菌落周围的现象是__________________,则说明此种菌能够________________。从平板中挑取实验效果明显的目的菌株,采用______________法接种于新的培养基平板,可对菌株进行进一步的纯化。4.(14分)柠檬油是植物芳香油中的一种,它是一种广谱性的杀虫剂,它可杀死蚊子、苍蝇、蟑螂和臭虫等传染疾病的害虫,以及危害粮食、蔬菜的常见害虫,包括幼虫、蛹等,被称为一种绿色杀虫剂。柠檬油的提取必经步骤如图。-8-
请根据实验流程图回答下列问题:(1)柠檬精油的提取适宜采用__________法,此种方法是通过__________将液相柠檬油从固液两相混合物中分离出来。(2)A是__________,目的是__________________________________________。(3)B过程一般加入相当于柠檬果皮质量0.25%的小苏打和5%的硫酸钠,其目的是________________________________________________________________。(4)C过程为____________,目的是____________________________________。(5)采用柠檬油作为杀虫剂,可以解决其他杀虫剂给人类带来的隐患,其突出的优点是_____________________________________________________________。(6)柠檬油是食品、化妆品和香水配料的优质原料,具有很高的经济价值,提取柠檬油不采取水中蒸馏法的原因是:___________________________________。5.(12分)(2012·江西六校联考)红细胞含有大量血红蛋白,红细胞的机能主要是由血红蛋白完成的。我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验,来提取和分离血红蛋白,请回答下列有关问题:(1)分离蛋白质分子的一种常用方法是凝胶色谱法,也叫做_______________,是根据______________________分离蛋白质的有效方法。(2)血红蛋白提取和分离的程序可分为_________、_________、_________和纯度鉴定。(3)洗涤红细胞的目的是___________________,以利于后续步骤的分离纯化。采集的血样要及时分离红细胞,分离时采用低速短时间__________________,然后用胶头吸管吸出上层透明的___________________,将下层暗红色的红细胞液体倒入烧杯,再加入___________________洗涤,如此重复,直至上清液中没有黄色。(4)将洗涤好的红细胞倒入烧杯中,加入______________和______________充分搅拌,红细胞破裂,释放出血红蛋白。-8-
6.(12分)人参是一种名贵中药材,其有效成分主要是人参皂苷。利用细胞培养技术生产人参皂苷的大致流程如下:请回答:(1)配制诱导愈伤组织的固体培养基,分装后要进行_____________。接种前,要对人参根进行_____________。(2)用于离体培养的根切块,叫做_______________________________________。(3)用少量_____________酶处理愈伤组织,获取单细胞或小细胞团,在液体培养基中进行悬浮培养,可有效提高人参皂苷合成量。(4)人参皂苷易溶于水溶性(亲水性)有机溶剂,从培养物干粉中提取人参皂苷宜选用_____________方法,操作时应采用_____________加热。7.(14分)(2012·聊城模拟)某同学使用下列装置或操作进行有关实验,请据图回答问题:-8-
(1)制作果酒时可选用甲图的装置。为适当提高果酒生产速率,进气口应先打开后关闭,这是因为_______________________________________________________________________________________________________________________;排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身相连,这样做的原因是___________。为研究发酵中酵母菌的生长状况,常要通过_________________进行取样统计分析并测定pH,判断取样先后顺序的主要依据是___________________________。(2)乙图中加入蒸馏水的目的是_____________,此时玻璃棒使用要点是__________________,以保证DNA分子结构的完整性。(3)丙、丁用于提取和分离血红蛋白,应先对样品进行处理用______图装置进行___________;丁图中液体Ⅱ应为______________,底端试管中首先收集到的应是相对分子质量较_____(大/小)的蛋白质。8.(14分)(2012·郑州模拟)随着研究的不断深入,PCR方法被不断改进。到目前它从一种定性的分析方法发展到定量测定;从原先只能扩增几个kb(千碱基对)的基因到目前已能扩增长达几十个kb的DNA片段。现在PCR技术已有十几种之多。它不仅可用于基因分离、克隆和核酸序列分析等基础研究,还可用于疾病的诊断等。PCR需要模板DNA、引物、脱氧核糖核苷酸和DNA聚合酶、ATP等条件,其简要过程如图所示。请分析回答下列有关问题:e(1)PCR技术能把某一DNA片段进行扩增,依据的原理是___________。PCR与体内DNA复制的不同之处主要表现在环境温度的不同,在PCR中先用95℃高温处理的目的是___________,而这一过程中在细胞内是通过___________实现的。(2)通过分析得出新合成的DNA分子中,A=T,C=G,这个事实说明DNA分子的合成遵循____________________________________________________________。(3)若将1个DNA分子拷贝10次,则需要在缓冲液中至少加入______个引物。(4)DNA子链复制的方向是______,这是由于___________________________。-8-
(5)PCR技术不仅为遗传病的诊断带来了便利,而且改进了检测细菌和病毒的方法。若要检测一个人是否感染了艾滋病病毒,你认为可以用PCR扩增血液中的___________________________________________________________________。答案解析1.【解析】(1)实验过程中,榨取的果汁浑浊,用果胶酶处理可使浑浊的果汁变得澄清。(2)分离酵母菌应用选择培养基,固定化酵母细胞常采用包埋法,若想使这些酵母细胞能反复使用,实验过程中一定要注意无菌条件(避免微生物的污染)。(3)在酸性条件下,重铬酸钾与酒精反应呈现灰绿色,故可以用重铬酸钾来检验是否有酒精产生。若想进一步检测所得果酒中酵母菌的密度,可采用稀释涂布平板法。(4)对于频繁使用的菌种,可以采用临时保藏的方法,对于需要长期保存的菌种可以采用甘油管藏的方法。(5)果酒保存时,如果密封不严,其他微生物进行有氧呼吸,将乙醇转变成醋酸,会使果酒带有明显的酸味。答案:(1)用果胶酶处理(2)选择包埋无菌条件(避免微生物的污染)(3)重铬酸钾稀释涂布平板(4)转移到甘油中,与甘油充分混匀后,放在-20℃的冷冻箱中(5)密封不严,其他微生物进行有氧呼吸,将乙醇转变成醋酸2.【解析】(1)测定亚硝酸盐的含量是利用了比色法,即将样品液中的颜色与标准液中的颜色对比,得知样品液中亚硝酸盐的含量。(2)对盐水加热的目的是杀灭杂菌,但需要冷却后再使用,防止高温杀死或抑制乳酸菌。(3)由于加入的是盐水,浓度远大于细胞液浓度,根据细胞吸水、失水的原理可知,蔬菜的细胞要失水,导致坛中溶液量增加。(4)从图中可以看出,大约到第7天亚硝酸盐的含量最多。选择食用时间应是第14天以后,因为此时亚硝酸盐含量相对较低。(5)导致不同装置中的亚硝酸盐含量不同的原因较多,只要分析符合逻辑关系即可。(6)对这三组数据应采取取平均值的方法进行处理。答案:(1)比色法玫瑰红色染料(2)杀灭杂菌乳酸菌(3)外界溶液浓度过高使细胞渗透失水(4)714(5)各坛中微生物种类和数量可能存在差异(或其他合理答案)(6)先求平均值,再绘制一条曲线(将三个坛中每次测定的亚硝酸盐的含量分别记录,求出平均值,然后以日期为横坐标,亚硝酸盐的平均含量为纵坐标画出一条曲线)。3.【解析】(1)根据后面提示信息“进行涂布”-8-
,判断应该用液体培养基来培养。(2)减小培养液菌体浓度一般用稀释方法。由于题目要求选出能分泌淀粉酶的芽孢杆菌,所以培养基就应只以淀粉为碳源。倒置可以减少培养基受污染,为排除其他因素影响,需要设置未接种的空白的培养基作对照组。(3)淀粉被水解,培养基会出现透明圈。用平板划线法接种,可进一步纯化菌种。答案:(1)液体(2)系列稀释(或“梯度稀释”)淀粉倒置未接种的空白培养基(或“接种等量无菌水的培养基”)(3)出现透明圈分泌淀粉酶使淀粉发生水解平板划线4.【解析】本题考查压榨法的有关实验操作和原理分析。(1)从实验流程可以看出,提取柠檬精油的方法为压榨法,此方法是通过机械压力将油分挤压出来。(2)在压榨法中,用石灰水浸泡柠檬皮,其目的是破坏细胞结构,分解果胶,防止压榨时果皮滑脱,提高出油率。(3)在压榨过程中,为了使柠檬精油易与水分离,还要分别加入相当于柠檬果皮质量0.25%的小苏打和5%的硫酸钠,并调节pH至7~8。(4)C过程是过滤,用普通布袋,目的是除去固体物和残渣。(5)柠檬油对人体无毒性,并且易被分解,减少对环境的污染。(6)水中蒸馏时其有效成分会发生部分分解,又会产生原料焦糊的问题。答案:(1)压榨机械压力(2)石灰水破坏细胞结构,分解果胶,防止压榨时果皮滑脱,提高出油率(3)使精油易与水分离(4)过滤除去固体物和残渣(5)对人、动物、植物均无毒性;易被分解,减少对环境的污染(6)水中蒸馏会导致原料焦糊和有效成分水解的问题5.【解析】(1)凝胶色谱法也叫分配色谱法,其依据是相对分子质量的大小;(2)血红蛋白提取和分离的步骤为:样品处理、粗分离(透析)、纯化和纯度鉴定。(3)红细胞洗涤的目的是去除杂蛋白,以利于后续步骤的分离纯化;洗涤红细胞是采用低速短时间离心;(4)血红蛋白释放时要加入蒸馏水和40%体积的甲苯,分离血红蛋白时采用高速长时间离心的方法。答案:(1)分配色谱法相对分子质量大小(2)样品处理粗分离纯化(3)去除杂蛋白离心黄色血浆五倍体积的生理盐水(4)蒸馏水40%体积的甲苯6.【解析】灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子,而消毒是指使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物(不包括芽孢和孢子);果胶是植物细胞壁以及胞间层的主要组成成分之一,所以应用果胶酶可以专一性地分解果胶,达到分离植物组织的目的;水浴加热可以适当增加其溶解度。答案:(1)灭菌消毒(2)外植体(3)果胶(4)萃取(浸取)水浴7.【解析】(1)酵母菌是兼性厌氧型生物,先打开进气口,保证酵母菌进行有氧呼吸,增加菌体的数量;后关闭进气口,保证酵母菌进行无氧发酵,产生更多的酒精。排气口连接长而弯曲的胶管是为了防止空气中杂菌污染。研究发酵过程中酵母菌的生长状况一般通过取样分析培养液中pH来完成,pH越大,取样越早。(2)乙图中加入蒸馏水的目的是降低NaCl溶液的浓度,析出DNA,此时玻璃棒使用时要轻缓,并沿同一个方向,以保证DNA分子结构的完整性。(3)提取和分离血红蛋白时,可用丙装置对样品进行透析处理。丁装置进行分离纯化,应选用的洗脱液是20mmol/L的磷酸缓冲液(pH为7.0)。另外底端试管中首先收集到的应是相对分子质量较大的蛋白质。-8-
答案:(1)酵母菌是兼性厌氧型生物,先打开进气口,保证酵母菌进行有氧呼吸,增加菌体的数量;后关闭进气口,保证酵母菌进行无氧发酵,产生更多的酒精防止污染出料口pH的大小,pH越大,取样越早(2)降低NaCl溶液的浓度,析出DNA轻缓,并沿同一个方向(3)丙透析20mmol/L的磷酸缓冲液(pH为7.0)大8.【解析】本题考查对PCR技术的理解,属于知识识记和理解层次的考查,符合高考对选修内容考查的特点。PCR技术又称多聚酶链式反应,扩增过程中遵循的原理就是DNA复制;分析得出新合成的DNA分子中,A=T,C=G,这个事实说明DNA分子的合成遵循碱基互补配对原则;在PCR中选用95℃高温处理的目的是在解旋酶的催化下将DNA分子中的氢键断裂,两条链解开,使DNA分子变性。引物是一种单链DNA或RNA分子,它能与解开的DNA母链的3′端结合,为DNA聚合酶提供吸附位点,使DNA聚合酶从引物的3′端开始连接脱氧核糖核苷酸,从而决定了DNA子链复制的方向是从5′到3′。在DNA分子扩增时,需要两种引物,由于新合成的子链都需要引物作为复制的起点,故所需的引物数目等于新合成的DNA子链数目,即2×210-2=211-2个;PCR扩增技术就是扩增DNA,因此若要检测一个人是否感染了艾滋病病毒,可以用PCR扩增血液中的核酸。答案:(1)DNA复制使DNA变性(使DNA的两条链解开)解旋酶的催化(2)碱基互补配对原则(3)211-2(4)5′到3′DNA聚合酶只能从引物的3′端拼接单个脱氧核苷酸分子(5)病毒核酸-8-