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课时作业42 植物的组织培养技术 DNA和蛋白质技术植物有效成分的提取时间:25分钟 满分:100分一、选择题(每小题5分,共60分)1.下列有关花药离体培养,说法错误的是( )A.对材料的选择最常用的方法是焙花青—铬矾法,这种方法能将花粉细胞核染成蓝黑色B.材料消毒时需先用酒精浸泡,然后用氯化汞或次氯酸钙溶液浸泡,最后用无菌水冲洗C.接种花药后一段时间内不需要光照,但幼小植株形成后需要光照D.若接种的花药长出愈伤组织或释放出胚状体后,要适时转换培养基,以便进一步分化成再生植株解析:确定花粉发育的时期最常用的方法是醋酸洋红法,有些植物细胞核不易着色时,需采用焙花青—铬矾法。答案:A2.菊花的组织培养和月季的花药培养都是利用组织培养技术,关于两者的叙述下列说法中正确的选项有( )序号比较项目菊花的组织培养月季的花药培养①植物激素不必添加需要添加②染色体倍性的鉴定不需要需要③光照每日日光灯照射12小时最初不需要,幼小植株形成后需要④形成愈伤组织或胚状体后不需更换培养基需要更换培养基A.①②③ B.②③④C.①②④D.①②③④解析:
菊花的组织培养用茎段来培养,比较容易,不必添加植物激素;在培养中不会发生染色体倍性的变化;需要每天日光灯照射12小时;形成愈伤组织或胚状体后不必更换培养基。月季的离体培养需要添加细胞分裂素和生长素等植物激素;在花药培养中,通过愈伤组织形成的植株会出现染色体倍性的变化,所以需要染色体倍性的鉴定;最初不需要光照,幼小植株形成后需要光照;形成愈伤组织或胚状体后需要转移到分化培养基上进一步分化培养。答案:D3.(2011·安徽皖南八校联考)植物组织培养中的“脱分化”过程是指( )A.已休眠的种子经过处理使种子尽快萌发的过程B.植物根尖、茎尖等处分生组织细胞有丝分裂产生新细胞后分化为各种组织C.愈伤组织细胞分化为根与芽的过程D.离体的植物组织、细胞培养产生愈伤组织的过程解析:脱分化指让已经分化的细胞,经过诱导后,失去其特有的结构和功能而转变成未分化细胞的过程。A、B、C都是细胞分裂、分化的过程。答案:D4.(2011·山东济南)有关全能性的叙述,不正确的是( )A.克隆羊的诞生证明了已分化动物细胞的细胞核仍具有全能性B.生物体内细胞由于分化全能性不能表达C.卵细胞与受精卵一样,细胞未分化,全能性最高D.植物细胞离体培养在一定条件下能表现出全能性解析:克隆羊是将羊的乳腺细胞核移植到去核的卵细胞中得到的,体现了已分化的动物细胞的细胞核仍具有全能性;植物离体细胞在一定条件下经脱分化和再分化产生一个完整的个体,表现出全能性;在生物体内由于基因的选择性表达,体细胞分化成不同的组织、器官;卵细胞是高度分化的细胞,但全能性还比较高,仅次于受精卵。答案:C5.下表是关于DNA粗提取与鉴定实验中所使用的材料、操作及其作用,表述正确的是( )试剂操作作用A柠檬酸钠溶液与鸡血混合防止DNA凝固B蒸馏水与鸡血细胞混合保持细胞形状C蒸馏水加入到溶解有DNA的NaCl中析出DNA丝状物D冷却的酒精过滤后的DNA加入其中产生特定的颜色反应 解析:柠檬酸钠溶液的作用是防止血液凝固;蒸馏水与鸡血细胞混合时,蒸馏水的作用是让红细胞吸水涨破;蒸馏水加入到溶解有DNA的NaCl中,此时蒸馏水的作用是降低NaCl溶液浓度至0.14mol/L,从而析出DNA丝状物;将粗提取之后的DNA加入到冷却的酒精中是析出DNA丝状物。
答案:C6.关于血红蛋白的提取和分离操作不正确的是( )A.色谱柱内不能有气泡存在,一旦发现有气泡,必须重装B.凝胶用自来水充分溶胀后,配成凝胶悬浮液C.为加快凝胶膨胀,可以将加入洗脱液的湿凝胶用沸水浴加热,逐渐升温至沸腾,通常只需1~2hD.在血红蛋白提取过程中,不断用磷酸缓冲液处理,是让血红蛋白处在稳定的pH范围内,维持其结构和功能解析:由于本题中用到的是商品凝胶,为干燥的颗粒,使用前需要用蒸馏水充分溶胀后,配成凝胶悬浮液,再用洗脱液进行充分洗涤平衡,使凝胶装填紧密,也可在沸水浴中加热膨胀,可节约时间,除去凝胶中微生物,排除胶粒内空气。答案:B7.用凝胶色谱法分离蛋白质的过程中,关于蛋白质的叙述,正确的是( )A.相对分子质量较小的蛋白质行程大于相对分子质量较大的蛋白质B.相对分子质量较小的蛋白质行程小于相对分子质量较大的蛋白质C.相对分子质量较小的蛋白质行程等于相对分子质量较大的蛋白质D.两者无法比较解析:相对分子质量较小的蛋白质扩散进入凝胶颗粒内,所以行程长;而相对分子质量较大的蛋白质则被排阻在颗粒之外,所以行程短。答案:A8.玫瑰精油提取的过程是( )A.鲜玫瑰花+水→水蒸气蒸馏→油水混合物→分离油层→除水B.鲜玫瑰花+水→油水混合物→水蒸气蒸馏→分离油层→除水C.鲜玫瑰花+水→油水混合物→除水→分离油层D.鲜玫瑰花+水→油水混合物→水蒸气蒸馏→除水解析:玫瑰精油提取的实验流程是:鲜玫瑰花+水→水蒸气蒸馏→油水混合物→分离油层→除水。答案:A9.下列有关胡萝卜素的叙述,错误的是( )A.胡萝卜素是化学性质稳定,溶于水,不溶于乙醇的物质B.胡萝卜是提取天然β胡萝卜素的原料C.微生物的发酵生产是工业提取β胡萝卜素的方法之一D.提取后,干燥过程中,时间不能太长,温度不能太高解析:
胡萝卜素的化学性质比较稳定,不溶于水,微溶于乙醇,易溶于石油醚等有机溶剂。答案:A10.在用水蒸气蒸馏法制取玫瑰乳浊液提纯过程中,先后使用NaCl、无水Na2SO4,其作用分别是( )A.分层、吸水B.溶解、吸水C.吸水、分层D.分层、萃取解析:玫瑰乳浊液的处理过程中,加入NaCl目的是降低玫瑰精油的溶解度,利于水、油分层,便于分液。加入无水Na2SO4(常用的干燥剂)目的是进一步吸取分液出来的油层中的水分。答案:A11.(2010·江苏淮安二模)下列有关生物学实验原理和技术操作的叙述中,正确的是( )A.提取细胞中的DNA和蛋白质都必须用蒸馏水涨破细胞B.研究某遗传病的遗传方式,一定要调查患者家系的情况C.与利用鲜酵母相比,等量酵母菌制成的凝胶珠发酵生产酒精更迅速D.用显微镜观察细胞时,若细胞为无色透明,可调节通光孔使视野暗一些解析:提取细胞中的DNA和蛋白质可以用研磨后离心分离等方法;酵母菌制成的凝胶珠可重复利用,但发酵较慢。通光孔的大小是固定的,无法调节,可以通过调节光圈和反光镜使视野变暗。答案:B12.(2010·江苏镇江一调)下列关于实验叙述中,不正确的是( )A.血红蛋白的提取和分离实验中使用的交联葡聚糖凝胶G75,其中“75”表示每克凝胶膨胀时吸水7.5克B.在色素的提取和分离的实验中,叶绿素b在层析液中的溶解度最低,扩散速度最慢C.用洋葱作实验材料进行DNA的粗提取与鉴定实验时,加入一定的食盐的目的是有利于溶解DNAD.制取细胞膜、血红蛋白的提取和分离均以鸡血细胞作为实验材料解析:血红蛋白的提取和分离以鸡血细胞作为实验材料;制取细胞膜不能用鸡血细胞,鸡血细胞有核膜。答案:D二、简答题(共40分)13.(13分)如下图所示为胡萝卜的韧皮部细胞通过无菌操作接入试管后,在一定的条件下形成试管苗的培育过程,请据图回答下列问题:
(1)所用技术叫,依据的理论基础是________。①过程为________________;②过程为________________。(2)通过①产生的愈伤组织细胞与根的韧皮部细胞相比,在染色体的数目上________,所含基因________;细胞的形态结构________,其原因是__________________________。(3)①和②过程主要进行的细胞分裂方式为________,②过程除进行分裂外,还主要进行的生理活动是________。(4)要使愈伤组织正常分化为植物体,除营养物质培养条件外,还必须注意植物生长素与________的比例。(5)此过程要无菌操作,主要对________进行灭菌消毒,②过程需要光照的原因是____________________________。解析:使用的技术为植物组织培养,其理论基础为植物细胞的全能性,需经过脱分化、再分化过程。整个技术过程植物细胞进行有丝分裂和细胞分化,因此形成的愈伤组织与韧皮部细胞中染色体数目、基因均相同,但细胞形态、结构不同,是基因选择性表达的结果。此技术应无菌操作,主要对外植体接种的固体培养基灭菌消毒,在培养基中除营养物质外,还应注意植物激素的种类及比例。由于愈伤组织再分化后,细胞形成叶绿体,故需要光照。答案:(1)植物组织培养 植物细胞的全能性 脱分化 再分化(2)相同 相同 不同 基因的选择性表达(3)有丝分裂 细胞分化 (4)细胞分裂素(5)培养基 芽发育成叶,叶肉细胞中叶绿素的合成需要光照14.(15分)根据PCR反应系统模式图回答下列问题:(1)PCR反应需要在一定的________溶液中进行,除了调控温度外,溶液中还需要提供哪些条件?________。(2)如把一个用15N标记的某个DNA样品,以14N标记的脱氧核苷酸为原料,经过PCR仪5次循环后,将产生________个DNA分子,其中含14
N标记的DNA分子占全部DNA分子总数的比例为________。在研究15N标记的一个DNA分子中,发现35%腺嘌呤,则由15N标记的这个DNA分子的一条链上,鸟嘌呤的最大值可占此链碱基数的________。(3)分别以不同生物DNA样品为模板合成的各个新DNA之间存在差异,这些差异是什么?________。PCR扩增得到的DNA序列长度是固定的,原因是__________。(4)某个DNA分子的碱基总数中腺嘌呤为200个,利用PCR技术循环数次后,消耗周围环境中腺嘌呤脱氧核苷酸3000个,该DNA分子已循环了________次。解析:PCR反应需要在一定的缓冲溶液中进行,除了调控温度外,溶液中还需要提供DNA模板,分别与两条模板链相结合的两种引物、四种脱氧核苷酸、耐热的DNA聚合酶;5次循环后,将产生25个DNA分子,即32个DNA分子;由于DNA分子是半保留式复制,所以每个DNA分子都含有14N标记的链,故含14N标记的DNA分子占全部DNA分子总数的比例为100%;DNA分子中35%是腺嘌呤,则鸟嘌呤的最大值可占此链碱基数为1-35%×2=30%;DNA的差异性表现在脱氧核苷酸的数目、比例和排列顺序的不同;DNA聚合酶只能从引物的3′端开始延伸,所以特异性的复制处于两个引物之间的DNA片段。设该DNA分子循环了n次,消耗环境中的A为200(2n-1)即200(2n-1)=3000,得出n=4答案:(1)缓冲 DNA模板、分别与两条模板链相结合的两种引物、四种脱氧核苷酸、耐热的DNA聚合酶 (2)32 100% 30% (3)脱氧核苷酸的数目、比例和排列顺序的不同 DNA聚合酶只能特异性的复制处于两个引物之间的DNA片段 (4)415.(12分)下图为提取胡萝卜素的装置示意图,请回答有关问题:(1)一般来说,要想萃取效果好,需保证________。(2)萃取过程应该避免明火加热,采用水浴加热,其原因是______________________。(3)在加热瓶口安装冷凝回流装置的目的是__________。(4)通过什么现象可以证明实验的成功?____________________________________。解析:原料颗粒小、萃取温度高、时间长,需要提取的胡萝卜素就能充分溶解,萃取效果就好;因为有机溶剂都是易燃物,直接使用明火加热易引起燃烧爆炸,所以应该避免明火加热,采用水浴加热;为防止加热使有机溶剂挥发,在加热瓶口安装冷凝回流装置;如果萃取样品中出现了和标准样品一样的层析带,则说明提取胡萝卜素的实验成功。答案:(1)原料颗粒小,萃取温度高,时间长 (2)因为有机溶剂都是易燃物,直接使用明火加热容易引起燃烧爆炸 (3)防止加热使有机溶剂挥发 (4)
是否出现对应的层析带,如果萃取样品中出现了和标准样品一样的层析带,说明提取胡萝卜素的实验成功