生物化学-本科复习参考-2011

一般性内容一、蛋白质化学1、α-螺旋、β-片层结构的结构特征。α-螺旋(1)Righthanded(右手螺旋)，(2)每3.6个氨基酸绕一圈，每圈5.4Å高，(3)Carbonyl(C=O)与下游H-N-生成氢键，(4)每个氢键以13个原子夹着(α13)，(5)整个α-helix呈圆筒形，且有偶极性β-片层结构(1)数条氨基酸链平行排列，並以氢键侧向连接，(2)氨基酸链可为同向或反向排列，(3)整片bsheet呈板狀或盾形，更可捲成筒狀2、蛋白质带电状态与其pI和环境pH的关系当蛋白质溶液处于某一pH时，蛋白质解离成正、负离子的趋势相等，即成为兼性离子，净电荷为零，此时溶液的pH称为蛋白质的等电点蛋白质在高于或低于其pI的溶液中为带电的颗粒，在电场中能向正极或负极移动。这种通过蛋白质在电场中泳动而达到分离各种蛋白质的技术,称为电泳3、使蛋白质沉淀但不变性的方法白质所形成的亲水胶体颗粒具有两种稳定因素，即颗粒表面的水化层和电荷。若无外加条件，不致互相凝集。然而除掉这两个稳定因素(如调节溶液pH至等电点和加入脱水剂)蛋白质便容易凝集析出。如将蛋白质溶液pH调节到等电点，蛋白质分子呈等电状态，虽然分子间同性电荷相互排斥作用消失了。但是还有水化膜起保护作用，一般不致于发生凝聚作用，如果这时再加入某种脱水剂，除去蛋白质分子的水化膜，则蛋白质分子就会互相凝聚而析出沉淀；反之，若先使蛋白质脱水，然后再调节pH到等电点，也同样可使蛋白质沉淀析出。4、哪个氨基酸会妨碍蛋白质形成α-螺旋结构。根据各个氨基酸表示形成α螺旋的能力由大到小分为六组：最强的形成者(Hα)：Glu、Met、Ala、Leu中等的形成者(hα)：Lys、Phe、Gln、Trp、Ile、Val很弱的形成者(Iα)：Asp、His中立者(iα)：Cys、Ser、Thr、Arg较弱的破坏者(bα)：Asn、Tyr最强的破坏者(Bα)：Gly、Pro谷氨酸是形成者，除非连续出现且带电，否则不会有影响。脯氨酸是破坏者，会打断螺旋5、有碱性侧链、没有旋光性的氨基酸和亚氨基酸6、维持蛋白质二级结构稳定的主要作用(1)Peptidebond不能转动，(2)一个氨基酸R基团与前后R基团的限制，(3)R基团的大小、电荷限制7、蛋白质的胶体特性（1）蛋白质分子大小已达到胶体质点范围，具有较大表面积。（2）蛋白质分子表面有许多极性基团，这些基团与水有高度亲和性，很容易吸附水分子。（3）蛋白质分子在非等电状态时带有同性电荷，即在酸性溶液中带有正电荷，在碱性溶液中带有负电荷。由于同性电荷互相排斥，所以使蛋白质颗粒互相排斥，不会聚集沉淀8、氨基酸的两性解离与等电点蛋白质分子除两端的氨基和羧基可解离外，氨基酸残基侧链中某些基团，在一定的溶液pH条件下都可解离成带负电荷或正电荷的基团当蛋白质溶液处于某一pH时，蛋白质解离成正、负离子的趋势相等，即成为兼性离子，净电荷为零，此时溶液的pH称为蛋白质的等电点9、变性蛋白质的特点蛋白质的变性既有物理变化，也有化学变化。变性蛋白质丧失了其生物学活性。变性作用只改变空间结构，共价键不受破坏，分子量不变小，因构象松散，溶解性减小，更易被蛋白酶催化水解 10、必需氨基酸。亮氨酸赖氨酸苯丙氨酸异亮氨酸缬氨酸苏氨酸甲硫氨酸色氨酸11、肽键的结构特点肽是由氨基酸通过肽键缩合而形成的化合物。两肽键平面的交联点为a-碳。两分子氨基酸缩合形成二肽，三分子氨基酸缩合则形成三肽……由十个以内氨基酸相连而成的肽称为寡肽，由更多的氨基酸相连形成的肽称多肽。肽链中的氨基酸分子因为脱水缩合而基团不全，被称为氨基酸残基(residue)12、蛋白质四级结构的亚基单独存在时仍能保存蛋白质原有的生物活性。二、核酸化学1、DNA二级结构特点2、核酸中核苷酸之间的连接方式是3′，5′磷酸二酯键3.核酸的紫外吸收与溶液的pH值关系。4.DNA的Tm值和（A+T）、（G+C）含量关系。5.OD260/OD280<1.8的含义。6.真核生物mRNA的结构特征。7.脱氧核糖与核糖的差别。三、酶化学1、竞争性可逆抑制作用的特点2、酶对它所催化反应的作用机制-使反应的活化能降低3.非竞争性抑制的特点。4.酶的最适温度测定中选择的酶作用时间长短对测定结果的影响。5.测定酶活力时，一般测定产物生成量和测定底物消耗量哪一个准确？6.一种酶有几种底物就有几种Km值。四、糖代谢1、甘油氧化分解及其异生成糖的共同中间产物2、琥珀酸脱氢酶的辅因子3、丙酮酸脱氢酶系的辅因子4、酶的磷酸化和去磷酸化位点通常在丝氨酸残基上5、丙酮酸羧化酶的辅酶6、计算胞浆中1分子乳酸彻底氧化后，产生ATP的分子数7、有氧氧化过程产生FADH2步骤？8、糖异生的原料9、丙酮酸激酶是何途径的关键酶10、糖原合成需要引物11.计算从糖原开始的一分子葡萄糖变成２分子乳酸净生成ATP的数量。12.甘油激酶催化的反应是可逆反应吗？13.肝脏内糖酵解途径的主要功能。14.糖酵解时产生的NADH的去路。15.糖酵解反应有氧无氧均能进行吗？五、生物氧化1、苹果酸天冬氨酸穿梭作用2、FAD分子组成3、乙酰CoA彻底氧化过程中的P／O值4、了解呼吸链上各辅酶的氧化还原电位的高低顺序5、肌肉组织中肌肉收缩所需要的大部分能量以哪种形式贮存？7.生物氧化过程都是需要氧的吗？8.NADPH/NADP+能进入呼吸链氧化吗？9.ATP虽然含有大量的自由能，但它并不是能量的贮存形式。六、脂肪酸代谢1、促进脂肪动员的激素 2、能携带胞液中的NADH进入线粒体的物质。3、维生素B6有几种转化形式？4、合成胆固醇的限速酶5、脂肪动员的关键酶6.脂肪酸合成和脂肪酸β-氧化作用的细胞定位。7.脂肪酸从头合成中，乙酰CoA如何由线粒体内转移到胞液中？七、氨基酸代谢1、鸟氨酸循环的限速酶2、转氨酶的辅酶3、鸟氨酸循环中，合成尿素的第二分子氨来源4、GPT（ALT）活性最高的组织5、在尿素合成过程中哪步反应需要ATP6.氨甲酰磷酸可以合成尿素和嘌呤。7.谷氨酸在转氨作用和使游离氨再利用方面都是重要分子。重点内容一、蛋白质化学1.试述蛋白质二级结构有哪些？蛋白质α螺旋结构的特点a-螺旋，b-折叠，b-转角，无规卷曲α-螺旋(1)Righthanded(右手螺旋)，(2)每3.6个氨基酸绕一圈，每圈5.4Å高，(3)Carbonyl(C=O)与下游H-N-生成氢键，(4)每个氢键以13个原子夹着(α13)，(5)整个α-helix呈圆筒形，且有偶极性2.举例说明测定蛋白质分子量的方法及原理。由于体内的含氮物质以蛋白质为主，因此，只要测定生物样品中的含氮量，就可以根据以下公式推算出蛋白质的大致含量100克样品中蛋白质的含量(g%)=每克样品含氮克数×6.25×1003.什么是蛋白质的变性作用和复性作用？蛋白质变性后哪些性质会发生改变？蛋白质的变性在某些物理和化学因素作用下，其特定的空间构象被破坏，也即有序的空间结构变成无序的空间结构，从而导致其理化性质改变和生物活性的丧失蛋白质的复性若蛋白质变性程度较轻，去除变性因素后，蛋白质仍可恢复或部分恢复其原有的构象和功能，称为复性破坏非共价键和二硫键，不改变蛋白质的一级结构。4.什么是蛋白质的变性作用？简述蛋白质变性作用的机制。在某些物理和化学因素作用下，其特定的空间构象被破坏，也即有序的空间结构变成无序的空间结构，从而导致其理化性质改变和生物活性的丧失破坏非共价键和二硫键，不改变蛋白质的一级结构。二、核酸化学1.DNA热变性有何特点？Tm值表示什么？Tm：变性是在一个相当窄的温度范围内完成，在这一范围内，紫外光吸收值达到最大值的50%时的温度称为DNA的解链温度，又称融解温度(meltingtemperature,Tm)。其大小与G+C含量成正比。2.试述下列因素如何影响DNA的复性过程？（1）阳离子的存在；（2）低于Tm的温度；（3）高浓度的DNA链。三、酶化学1.试论述酶分离纯化步骤。2.试述Km的意义？3.何谓酶作用的特异性？分为哪几类？各类的含义是什么？举例说明。4.什么是固定化酶？简述其分类和特点。5.何谓酶的抑制剂？酶的抑制的主要类型及其特点是什么？6.实验室中对酶活性测定通常要求符合哪些条件？ 7.简述非竞争性抑制作用的特点。8.试述影响酶反应速度的因素。9.简述酶作为生物催化剂与一般化学催化剂的共性及其个性。四、糖代谢1.试述糖类物质在生物体内的生理作用？2.简述三羧酸循环过程和要点及生理意义。3.磷酸戊糖途径有什么生理意义？4.丙氨酸异生为葡萄糖的主要反应过程及其酶。5.为什么说三羧酸循环是糖、脂和蛋白质三大物质代谢的共通路？6.糖分解代谢可按EMP-TCA途径进行，也可按磷酸戊糖途径，决定因素是什么？五、生物氧化1.请写出（1）完整线粒体内从NADH至O2这段呼吸链的组成顺序；（2）产生偶联ATP合成的部位；（3）三个作用于这段呼吸链不同部位的抑制剂的名称及作用点。2.试述化学渗透学说要点。3.什么叫呼吸链？有哪些方法可用来确定电子传递顺序？六、脂肪酸代谢1.简述脂肪酸的β-氧化作用。2.什么是酮体？酮体的生成和利用的生理意义。3、β-氧化的过程及产物。