贵州省遵义航天高中2014-2015学年高二(下)第一次月考生物试卷 (wo

2014-2015学年贵州省遵义航天高中高二（下）第一次月考生物试卷　一、单项选择题（每小题6分，共78分）1．（6分）（2015春•遵义月考）下列说法中，正确的是（　　）　A．真核和原核的目的基因均可从基因文库中获取　B．DNA连接酶都是从原核生物中分离得到的　C．大多数限制酶识别的核苷酸序列由6个核糖核苷酸组成　D．人工合成法可合成已知序列任意大小的DNA片段　2．（6分）（2015春•遵义月考）基因工程是在DNA分子水平进行设计施工的，在基因操作的以下步骤中，不进行碱基互补配对的是（　　）①人工合成目的基因②E．coliDNA连接酶结合目的基因与运载体③将目的基因导入受体细胞④目的基因的检测和表达⑤个体生物学水平的鉴定．　A．①③B．①⑤C．③⑤D．②③④　3．（6分）（2015春•遵义月考）广西大学动物科学院培育出转基因动物﹣﹣带有巴马香猪长肉基因的小白鼠．他们将长肉基因与含有绿色荧光蛋白基因片段整合植入5只公鼠的睾丸中，这些公鼠与8只母鼠交配后，产下60只小白鼠，科研人员采集小白鼠的细胞在荧光显微镜下检测发现，在23只小白鼠的细胞中观测到绿色荧光，37只不含转基因成分．以下相关说法，你认为正确的是（　　）　A．所需的基因操作工具有限制性内切酶、DNA连接酶和动物病毒　B．长肉基因是标记基因，绿色荧光蛋白的基因是目的基因　C．运用的生物技术有基因工程、细胞工程和DNA重组技术　D．据此分析可知长肉基因在小白鼠细胞中正常表达　4．（6分）（2015春•遵义月考）下表为动植物细胞工程的有关内容比较，你认为错误的是（　　）项目植物细胞工程动物细胞工程特殊处理机械法去除细胞壁胰蛋白酶处理制细胞悬液法融合方法物理方法、化学方法物理方法、化学方法、生物方法典型应用人工种子、杂种细胞单克隆抗体的制备培养基区别含有生长素和细胞分裂素动物血液不可缺少版权所有：中华资源库www.ziyuanku.com 　A．0处B．1处C．2处D．3处　5．（6分）（2014秋•东城区期末）将特定药物与单克隆抗体相结合制成的“生物导弹”，能够用于杀死人类的某些癌细胞，其过程如图所示．下列相关叙述不正确的是（　　）　A．①过程的原理和植物原生质体融合的原理基本相同　B．经①形成的杂交瘤细胞能无限增殖并产生单一抗体　C．②过程需要筛选并克隆单个杂交瘤细胞　D．抗体的靶向作用使③过程具有高度特异性　6．（6分）（2009•浦东新区一模）在下列选项中，不需要采用植物组织培养技术的是（　　）　A．利用基因工程培育抗棉铃虫的棉花植株　B．利用细胞工程技术培养“番茄一马铃薯”杂种植株　C．利用花药离体培养得到单倍体植株　D．利用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗，得到染色体数目加倍的植株　　二、非选择题：7．（11分）（2015春•遵义月考）实验室研究人员欲通过动物细胞培养的方法来鉴定甲、乙两种化学物质毒性，并比较二者毒性的强弱．请你以一个研究人员的身份参与此项研究，完成下列实验报告并回答有关问题．实验原理：有毒物质能诱导细胞产生变异，根据这种变异细胞占全部培养细胞的百分数（以下称Q值），可判断该化学物质的毒性．实验材料：活的小白鼠胚胎．药品用具：胰蛋白酶液、动物细胞培养液、动物细胞固定液、适宜浓度的龙胆紫溶液、滴管、培养皿、剪刀、锥形瓶、培养瓶、恒温箱、载玻片、盖玻片、显微镜、小白鼠正常体细胞有丝分裂各时期高倍显微照片．实验步骤：（1）制备细胞悬浮液：把活的小白鼠胚胎放在培养皿中剪碎，转入锥形瓶中，加入　　　　　　处理，使胚胎组织分散成单个细胞，再加入动物细胞培养液，制成细胞悬浮液．（2）进行细胞培养：①取A、B、C三个洁净的培养瓶，　　　　　　，加入等量的细胞悬浮液．②向A培养瓶中加入化学物质甲，向B培养瓶中加入　　　　　　，向C瓶内加入等量的生理盐水，并将培养瓶摇匀．版权所有：中华资源库www.ziyuanku.com ③在实验中，C培养瓶起什么作用？　　　　　　．（3）制作临时装片：①当细胞增殖到大约第8代左右时，同时从恒温箱中取出三个培养瓶，用胰蛋白酶液处理，使培养的细胞　　　　　　，再加入动物细胞固定液以便迅速杀死细胞并固定细胞．②静置一段时间后，分别从各培养瓶底部吸取适量的细胞悬浮液，滴在与培养瓶有相同编号的载玻片的中央，用　　　　　　染色，3～5min后，盖上盖玻片．（4）镜检和统计：把临时装片放在显微镜下，先用低倍镜后用高倍镜，寻找处于　　　　　　期的细胞，并与C组对比以确认发生变异的细胞，同时统计　　　　　　．（5）结果与结论：经研究人员实验得知：A、B、C三个培养瓶的Q值依次为：QA=1.3%、QB=12.5%、QC=0.1%，由此可知该实验的结论是　　　　　　．　8．（11分）（2015春•遵义月考）科学家将鱼抗冻蛋白基因转入番茄，番茄耐寒能力大大提高，可以在相对寒冷的环境中生长．质粒上有PstⅠ、SmaⅠ、HindⅢ、AluⅠ等四种限制酶切割位点．下图是转基因抗冻番茄培育过程的示意图（ampr为抗氨苄青霉素基因），其中①～④是转基因抗冻番茄培育过程中的相关步骤，Ⅰ、Ⅱ表示相关结构或细胞，请据图作答．（1）图中涉及的技术有：　　　　　　（答出两点）．（2）在构建基因表达载体时，可用一种或多种限制酶进行切割．为了避免目的基因和载体在酶切后产生的末端发生任意连接，在此实例中，应该选用　　　　　　，分别对目的基因和质粒进行切割，切割后产生的DNA片段分别为　　　　　　、　　　　　　种．（3）图中Iampr基因的目的是　　　　　　，除了ampr、鱼的抗冻蛋白基因以外，还应具有的结构是　　　　　　、　　　　　　．（4）研究人员通常采用　　　　　　法将鱼抗冻蛋白基因导入番茄细胞内．通常采用　　　　　　技术，在分子水平检测目的基因是否翻译形成了相应的蛋白质．　9．（11分）（2015春•遵义月考）据近日《每日科学》网站报道，英国牛津大学科学家最近发现了一种“改造”病毒的新方式，可按需要剔除病毒的关键毒性，并保持其复制能力，使其成为杀死癌细胞却不伤害健康细胞的“安全卫士”．这将为癌症治疗的改进提供新的平台，也将为新一代抗病毒疫苗的研制奠定良好基础．已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒，该病毒表面的A蛋白为主要抗原，且疫苗生产和抗体制备的流程之一如图：版权所有：中华资源库www.ziyuanku.com （1）②过程可以通过　　　　　　技术大量扩增A基因，该技术的原理是　　　　　　．（2）过程③构建A基因重组载体时，必须使用限制酶和　　　　　　两种工具酶．（3）若受体细胞为动物细胞，过程④常用的方法是　　　　　　，A蛋白属于　　　　　　性物质．（4）过程⑦运用了　　　　　　技术，该过程技术的原理是　　　　　　．（5）对健康人进行该传染病免疫预防时，可选用图中基因工程生产的　　　　　　所制备的疫苗．对该传染病疑似患者确诊时，可以从疑似患者体内分离出病毒，与已知病毒进行　　　　　　比较；或用图中的　　　　　　进行特异性结合检测．　10．（11分）（2015春•遵义月考）天然酿酒酵母菌通常缺乏分解淀粉的酶类，用作发酵原料的淀粉需经一系列复杂的转化过程才能被利用．研究者从某丝状真菌中获取淀粉酶基因并转入酿酒酵母菌，获得的酿酒酵母工程菌可直接利用淀粉产生酒精．请回答下列问题：（1）若要鉴定淀粉酶基因是否插入酿酒酵母菌，可采用的检测方法是　　　　　　，该项方法要用　　　　　　作探针进行检测．（2）采用PCR技术可对目的基因进行体外扩增．该反应体系的主要成分应包含：扩增缓冲液（含Mg2+）、水、4种脱氧核苷酸、引物、　　　　　　和　　　　　　．假如引物都用3H标记，从理论上计算循环4次，所得DNA分子中含有3H标记的DNA占　　　　　　．（3）已知BamHⅠ与BglⅡ的识别序列及切割位点如图所示，用这两种酶和DNA连接酶对一段含有数个BamHⅠ和BglⅡ识别序列的DNA分子进行反复的切割、连接操作，若干循环后　　　　　　序列明显增多．（4）基因工程只能生产自然界已存在的蛋白质，　　　　　　却能生产自然界不存在的新的蛋白质，但最终还须通过改造基因来实现，原因是　　　　　　．　11．（10分）（2015春•遵义月考）现有A和B两个肉牛品种，A品种牛的细胞组成可表示为A细胞核、A细胞质，B品种牛则为B细胞核、B细胞质．（1）如果要获得一头克隆牛，使其细胞由A细胞核和B细胞质组成，基本步骤是，从A品种牛体内取出体细胞，进行体外培养．然后再从培养细胞中取出　　　　　　注入B品种牛的　　　　　　卵母细胞．（2）对重组细胞经过某处刺激和培养后，可形成胚胎，在培养过程中，配制的培养液通常加入　　　　　　等天然成分，提供O2和CO2的作用分别是　　　　　　和　　　　　　．版权所有：中华资源库www.ziyuanku.com （3）一般来说，要想大量获得这种克隆牛比较难，原因之一是卵母细胞的数量不足，为解决这一问题，可以从屠宰场收集　　　　　　，并从中获得卵母细胞．（4）克隆牛的产生说明　　　　　　具有全能性．克隆牛的性状主要表现　　　　　　品种牛的特征．由A、B两品种杂交得到的牛与克隆牛相比，杂交牛细胞核的遗传物质来自　　　　　　个亲本，克隆牛和杂交牛的遗传物质组成　　　　　　（相同，不同）．　　版权所有：中华资源库www.ziyuanku.com 2014-2015学年贵州省遵义航天高中高二（下）第一次月考生物试卷参考答案与试题解析　一、单项选择题（每小题6分，共78分）1．（6分）（2015春•遵义月考）下列说法中，正确的是（　　）　A．真核和原核的目的基因均可从基因文库中获取　B．DNA连接酶都是从原核生物中分离得到的　C．大多数限制酶识别的核苷酸序列由6个核糖核苷酸组成　D．人工合成法可合成已知序列任意大小的DNA片段考点：基因工程的原理及技术．版权所有分析：获取目的基因的方法主要有两种：（1）从供体细胞的DNA中直接分离基因，最常用的方法是“鸟枪法”又叫“散弹射击法“；（2）人工合成基因，这种方法有两条途径，一是以目的基因转录的信使RNA为模板，反转录成互补的单链DNA，再在酶的作用下合成双链DNA，即目的基因；另一条途径是蛋白质的氨基酸序列，推测出信使RNA序列，再推测出结构基因的核苷酸序列，然后用化学的方法以单核苷酸为原料合成．解答：解：A、真核和原核的目的基因均可从基因文库中获取，A正确；B、T4DNA连接酶来源于T4噬菌体，噬菌体是一种病毒，B错误；C、大多数限制酶识别的核苷酸序列由6个脱氧核糖核苷酸组成，C错误；D、当基因比较小，核苷酸序列又已知的情况下，适用于用人工合成法合成，D错误．故选：A．点评：本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记原核细胞基因和真核细胞基因结构的异同；识记基因工程的操作步骤，掌握目的基因的获取方法，能运用所学的知识准确判断各选项．　2．（6分）（2015春•遵义月考）基因工程是在DNA分子水平进行设计施工的，在基因操作的以下步骤中，不进行碱基互补配对的是（　　）①人工合成目的基因②E．coliDNA连接酶结合目的基因与运载体③将目的基因导入受体细胞④目的基因的检测和表达⑤个体生物学水平的鉴定．　A．①③B．①⑤C．③⑤D．②③④版权所有：中华资源库www.ziyuanku.com 考点：基因工程的原理及技术．版权所有分析：基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取；②基因表达载体的构建；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与鉴定．其中人工合成目的基因、基因表达载体的构建、目的基因的检测都进行碱基互补配对原则．解答：解：①人工合成目的基因的方法是逆转录法，需要进行碱基互补配对，正确；②目的基因与运载体结合时，进行碱基互补配对，正确；③将目的基因导入受体细胞，不进行碱基互补配对，错误；④检测目的基因时需要用到基因探针，进行碱基互补配对；基因表达包括转录和翻译过程，都要进行碱基互补培养，正确；⑤个体生物学水平的鉴定不需要碱基互不配对原则，错误．故选：C．点评：本题考查基因工程的相关知识，要求考生掌握基因工程的操作步骤，能准确判断哪些步骤进行碱基互补配对原则，相关知识点只需考生熟记即可，属于考纲识记层次的考查．要求考生在平时的学习过程中注意知识网络结构的构建．　3．（6分）（2015春•遵义月考）广西大学动物科学院培育出转基因动物﹣﹣带有巴马香猪长肉基因的小白鼠．他们将长肉基因与含有绿色荧光蛋白基因片段整合植入5只公鼠的睾丸中，这些公鼠与8只母鼠交配后，产下60只小白鼠，科研人员采集小白鼠的细胞在荧光显微镜下检测发现，在23只小白鼠的细胞中观测到绿色荧光，37只不含转基因成分．以下相关说法，你认为正确的是（　　）　A．所需的基因操作工具有限制性内切酶、DNA连接酶和动物病毒　B．长肉基因是标记基因，绿色荧光蛋白的基因是目的基因　C．运用的生物技术有基因工程、细胞工程和DNA重组技术　D．据此分析可知长肉基因在小白鼠细胞中正常表达考点：基因工程的原理及技术．版权所有分析：根据题意分析：1、马香猪长肉基因是目的基因，将之导入小鼠，获得转基因小鼠，而目的基因在小鼠中是成单存在的，产生的配子中只有一半有目的基因，所以产生的后代有一部分有转基因成分，有一些没有；2、绿色荧光蛋白（GFP）在紫外光的照射下会发出绿色荧光，能示踪蛋白质的转移途经．解答：解：A、转基因小鼠需要限制酶和DNA连接酶将目的基因与运载体连接，还需要病毒作为运载体将目的基因导入小鼠细胞，A正确；B、长肉基因是目的基因，绿色荧光蛋白的基因是标记基因，B错误；C、运用的生物技术有基因工程、细胞工程，基因工程又叫DNA重组技术，C错误；D、根据题意分析转基因小鼠产生的配子中只有一半有目的基因，后代应该一半有绿色荧光，而产下60只小白鼠中在23只小白鼠的细胞中观测到绿色荧光，37只不含转基因成分，说明有一些小白鼠中的目的基因没有表达，D错误．故选：A．点评：版权所有：中华资源库www.ziyuanku.com 本题主要考查基因工程的原理和技术、胚胎工程，要求考生识记基因工程的原理及操作过程，能准确判断图中各过程的名称；识记PCR技术的原理及过程，能与体内DNA复制进行比较；识记胚胎工程技术，能运用所学的知识答题．　4．（6分）（2015春•遵义月考）下表为动植物细胞工程的有关内容比较，你认为错误的是（　　）项目植物细胞工程动物细胞工程特殊处理机械法去除细胞壁胰蛋白酶处理制细胞悬液法融合方法物理方法、化学方法物理方法、化学方法、生物方法典型应用人工种子、杂种细胞单克隆抗体的制备培养基区别含有生长素和细胞分裂素动物血液不可缺少　A．0处B．1处C．2处D．3处考点：植物体细胞杂交的过程；细胞融合的概念及方法．版权所有分析：细胞工程包括植物细胞工程和动物细胞工程，植物细胞工程的技术包括植物组织培养技术和植物体细胞杂交技术；动物细胞工程常用的技术手段有：动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合、生产单克隆抗体等．解答：解：（1）在植物细胞杂交时首先运用纤维素酶或果胶酶去除植物细胞的细胞壁，而在动物细胞培养过程中要运用胰蛋白酶将细胞分散成单个细胞，错误；（2）植物体细胞杂交过程中运用物理法和化学法将原生质体进行融合，没有生物方法，而动物细胞融合可以利用物理、化学、生物三种方法，正确；（3）可以利用植物组织培养技术获得人工种子，利用植物体细胞杂交获得杂种细胞，动物细胞工程中利用动物细胞融合技术制备单克隆抗体，正确；（4）植物细胞工程中的培养基中需要用生长素和细胞分裂素以影响愈伤组织的生长和分化；动物细胞工程的培养液中大多数情况需要加入动物血清、血浆等天然成分，但是有时需要明确界定培养液成分时（而血清中有很多位置成分），也可采用无血清培养，错误．由此可见，表中只有2处不正确．故选：C．点评：本题结合图表，考查细胞工程的相关知识，要求考生识记植物细胞工程和动物细胞工程的技术手段、特殊处理、融合方法、应用和培养基成分，能正确进行区分和比较，属于考纲识记层次的考查．　5．（6分）（2014秋•东城区期末）将特定药物与单克隆抗体相结合制成的“生物导弹”，能够用于杀死人类的某些癌细胞，其过程如图所示．下列相关叙述不正确的是（　　）　A．①过程的原理和植物原生质体融合的原理基本相同　B．经①形成的杂交瘤细胞能无限增殖并产生单一抗体　C．②过程需要筛选并克隆单个杂交瘤细胞版权所有：中华资源库www.ziyuanku.com 　D．抗体的靶向作用使③过程具有高度特异性考点：单克隆抗体的制备过程．版权所有分析：单克隆抗体：由单个B淋巴细胞进行无性繁殖形成的细胞系所产生出的化学性质单一、特异性强的抗体．单克隆抗体的制备过程要进行三次筛选：①筛选能够产生单一抗体的B淋巴细胞③筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞）②筛选出能够产生特异性抗体的细胞群．生物导弹：单克隆抗体+放射性同位素、化学药物或细胞毒素（借助单克隆抗体的定位导向作用将药物定向带到癌细胞，在原位杀死癌细胞．疗效高，副作用小，位置准确．）解答：解：A、①过程的原理和植物原生质体融合的原理都是细胞膜具有一定的流动性．故A正确．B、经①形成的杂合细胞可能有三种，要经过筛选，筛选得到杂交瘤细胞，去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞．故B错误．C、②过程要筛选出能够产生特异性抗体的细胞群，并培养细胞群．故C正确．D、癌细胞是抗原，抗体与抗原发生特异性结合．生物导弹：单克隆抗体+放射性同位素、化学药物或细胞毒素（借助单克隆抗体的定位导向作用将药物定向带到癌细胞，在原位杀死癌细胞．疗效高，副作用小，位置准确．）故D正确．故选B．点评：本题考查了制备单克隆抗体的相关内容．意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力．能独立完成“生物知识内容表”所列的生物实验，包括理解实验目的、原理、方法和操作步骤，掌握相关的操作技能，并能将这些实验涉及的方法和技能进行综合运用．　6．（6分）（2009•浦东新区一模）在下列选项中，不需要采用植物组织培养技术的是（　　）　A．利用基因工程培育抗棉铃虫的棉花植株　B．利用细胞工程技术培养“番茄一马铃薯”杂种植株　C．利用花药离体培养得到单倍体植株　D．利用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗，得到染色体数目加倍的植株考点：植物培养的条件及过程．版权所有分析：植物组织培养依据的原理为植物体细胞的全能性，即已经分化的细胞仍然具有发育成完整植株的潜能；培养过程的顺序是离体植物器官、组织或细胞（外植体）脱分化形成愈伤组织，再分化形成根、芽等器官进而形成新的植物体．解答：解：A、基因工程培养抗棉铃虫的棉花植株的过程中，将含有目的基因的棉花细胞形成转基因植物要用到植物组织培养技术，A错误；B、“番茄一马铃薯”杂种植株的培养过程包括植物体细胞杂交和植物组织培养，而将杂种细胞形成杂种植株的过程属于植物组织培养，B错误；C、花药离体培养得到单倍体植株，将花粉形成完整植株也属于植物组织培养，C错误；版权所有：中华资源库www.ziyuanku.com D、用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗后，由植株正常生长、发育就可获得多倍体植株，不需要采用植物组织培养技术，D正确．故选：D．点评：本题考查植物组织培养的应用，意在考查学生分析问题和解决问题的能力，解题的关键是理解将细胞培育成植株即为植物组织培养．　二、非选择题：7．（11分）（2015春•遵义月考）实验室研究人员欲通过动物细胞培养的方法来鉴定甲、乙两种化学物质毒性，并比较二者毒性的强弱．请你以一个研究人员的身份参与此项研究，完成下列实验报告并回答有关问题．实验原理：有毒物质能诱导细胞产生变异，根据这种变异细胞占全部培养细胞的百分数（以下称Q值），可判断该化学物质的毒性．实验材料：活的小白鼠胚胎．药品用具：胰蛋白酶液、动物细胞培养液、动物细胞固定液、适宜浓度的龙胆紫溶液、滴管、培养皿、剪刀、锥形瓶、培养瓶、恒温箱、载玻片、盖玻片、显微镜、小白鼠正常体细胞有丝分裂各时期高倍显微照片．实验步骤：（1）制备细胞悬浮液：把活的小白鼠胚胎放在培养皿中剪碎，转入锥形瓶中，加入　胰蛋白酶液　处理，使胚胎组织分散成单个细胞，再加入动物细胞培养液，制成细胞悬浮液．（2）进行细胞培养：①取A、B、C三个洁净的培养瓶，　消毒灭菌　，加入等量的细胞悬浮液．②向A培养瓶中加入化学物质甲，向B培养瓶中加入　等量的化学物质乙　，向C瓶内加入等量的生理盐水，并将培养瓶摇匀．③在实验中，C培养瓶起什么作用？　对照　．（3）制作临时装片：①当细胞增殖到大约第8代左右时，同时从恒温箱中取出三个培养瓶，用胰蛋白酶液处理，使培养的细胞　从瓶壁上脱落　，再加入动物细胞固定液以便迅速杀死细胞并固定细胞．②静置一段时间后，分别从各培养瓶底部吸取适量的细胞悬浮液，滴在与培养瓶有相同编号的载玻片的中央，用　适宜浓度的龙胆紫溶液　染色，3～5min后，盖上盖玻片．（4）镜检和统计：把临时装片放在显微镜下，先用低倍镜后用高倍镜，寻找处于　细胞有丝分裂中　期的细胞，并与C组对比以确认发生变异的细胞，同时统计　该期变异的细胞占该期细胞总数的百分数（Q值）　．（5）结果与结论：经研究人员实验得知：A、B、C三个培养瓶的Q值依次为：QA=1.3%、QB=12.5%、QC=0.1%，由此可知该实验的结论是　甲、乙都是有毒性的，且乙的毒性大于甲　．考点：动物细胞与组织培养过程．版权所有分析：根据题干信息“甲、乙两种可能有一定毒性的化学物质”、“鉴定它们是否有毒性并比较二者毒性的强弱”和“根据这种变异细胞占全部培养细胞的百分数（以下称Q值），可判断该化学物质的毒性”，可知自变量为甲乙两种化学物质，因变量是Q值，即变异细胞占全部培养细胞的百分数．对照实验的三个步骤：取材、编号；分别作不同的处理；观察实验结果和得出实验结论．解答：版权所有：中华资源库www.ziyuanku.com 解：（1）在动物细胞培养过程中，用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，将细胞分散成单个．（2）进行细胞培养：实验设计时要遵循对照原则和单一变量原则，所以本实验要设计三组实验，单一变量是有毒物质的有无和有毒物质的种类．①取A、B、C三个洁净的培养瓶，消毒灭菌，加入等量的细胞悬浮液；②向A培养瓶中加入化学物质甲，向B培养瓶中加入等量的化学物质乙，并将培养瓶摇匀；③C瓶不作处理，作为对照．（3）①当细胞增殖到大约8代左右时，同时从恒温箱中取出3个培养瓶，用胰蛋白酶液处理，使培养的细胞从瓶壁上脱落，再加入动物细胞固定液以便迅速杀死细胞并固定细胞．②静置一段时间后，分别从各培养瓶底部吸取适量的细胞悬浮液，滴在与培养瓶有相同编号的载玻片的中央，滴加用适宜浓度的龙胆紫液染色，3﹣5min后，盖上盖玻片．（4）有丝分裂中期的细胞中染色体形态稳定、数目清晰，整齐地排列在赤道板上．因此用显微镜观察时要寻找处于有丝分裂中期的细胞，并与C组对比以确认发生变异的细胞，同时统计该期变异的细胞占该期细胞总数的百分数（Q值）．（5）A、B、C三个培养瓶的Q值依次为：QA=1.3%，QB=12.5%，QC=0.1%，由此可知该实验的结论是①甲、乙两种化学物质均有毒性；②且乙的毒性比甲的毒性大．故答案为：（1）胰蛋白酶液（2）消毒灭菌等量的化学物质乙对照（3）从瓶壁上脱落适宜浓度的龙胆紫溶液（4）细胞有丝分裂中期该期变异的细胞占该期细胞总数的百分数（Q值）（5）甲、乙都是有毒性的，且乙的毒性大于甲点评：本题考查探究实验，意在考查提升学生理解动物细胞培养和分析实验的能力．实验设计时要注意单一变量原则和对照原则．要注意无关变量应该相同且适宜．　8．（11分）（2015春•遵义月考）科学家将鱼抗冻蛋白基因转入番茄，番茄耐寒能力大大提高，可以在相对寒冷的环境中生长．质粒上有PstⅠ、SmaⅠ、HindⅢ、AluⅠ等四种限制酶切割位点．下图是转基因抗冻番茄培育过程的示意图（ampr为抗氨苄青霉素基因），其中①～④是转基因抗冻番茄培育过程中的相关步骤，Ⅰ、Ⅱ表示相关结构或细胞，请据图作答．版权所有：中华资源库www.ziyuanku.com （1）图中涉及的技术有：　DNA重组技术、植物组织培养技术　（答出两点）．（2）在构建基因表达载体时，可用一种或多种限制酶进行切割．为了避免目的基因和载体在酶切后产生的末端发生任意连接，在此实例中，应该选用　PstI、SamI　，分别对目的基因和质粒进行切割，切割后产生的DNA片段分别为　4　、　2　种．（3）图中Iampr基因的目的是　重组质粒的鉴定和筛选　，除了ampr、鱼的抗冻蛋白基因以外，还应具有的结构是　启动子　、　终止子　．（4）研究人员通常采用　农杆菌转化（或基因枪法等）　法将鱼抗冻蛋白基因导入番茄细胞内．通常采用　抗原﹣抗体杂交　技术，在分子水平检测目的基因是否翻译形成了相应的蛋白质．考点：基因工程的原理及技术；植物培养的条件及过程．版权所有分析：结合题意分析图解：鱼的抗冻蛋白基因上具有三种限制酶切割位点，PstⅠ酶的切割位点存在于目的基因的两侧，SmaⅠ酶的切割位点存在于目的基因的左侧，而AluⅠ酶的切割位点存在于目的基因的中央，因此不宜选用AluⅠ酶．质粒上有PstⅠ、SmaⅠ、HindⅢ、AluⅠ等四种限制酶切割位点，在选择限制酶时一般选择同种限制酶，以便形成相同的黏性末端．其中①～④分别表示：基因表达载体的构建、目的基因导入受体细胞、脱分化、再分化．解答：解：（1）图中涉及的技术有DNA重组技术、植物组织培养技术．（2）在构建基因表达载体中，如果目的基因和载体用同一种限制酶切割，获得的黏性末端相同，将会发生自身环化现象，故应选用不同的限制酶分别对目的基因和载体切割，以获得不同的黏性末端，故应选用PstⅠ和SmaⅠ对含鱼抗冻蛋白基因的DNA、质粒进行切割，PstⅠ和SmaⅠ在鱼抗冻蛋白基因的DNA上共有3个酶切位点，切割后产生4个DNA片段，而环状质粒上有两个酶切位点，切割后产生2个DNA片段．（3）图中Iampr基因是标记基因，可以对重组质粒进行鉴定和筛选，重组质粒上除了ampr、鱼的抗冻蛋白基因以外，还应具有启动子、终止子．（4）将目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法，通常采用抗原﹣抗体杂交技术，在分子水平检测目的基因是否翻译形成了相应的蛋白质．故答案为：（1）DNA重组技术、植物组织培养技术（2）PstI、SamI42（3）重组质粒的鉴定和筛选启动子终止子（4）农杆菌转化（或基因枪法等）抗原﹣抗体杂交点评：本题具有一定的难度，属于考纲中理解层次的要求，考查了基因工程的工具酶、目的基因导入受体细胞以及利用植物组织培养技术培养转基因植株的相关知识，解答的难点是能够根据目的基因和质粒上的切割位点选择合适的限制酶．　9．（11分）（2015春•遵义月考）据近日《每日科学》网站报道，英国牛津大学科学家最近发现了一种“改造”病毒的新方式，可按需要剔除病毒的关键毒性，并保持其复制能力，使其成为杀死癌细胞却不伤害健康细胞的“安全卫士”．这将为癌症治疗的改进提供新的平台，也将为新一代抗病毒疫苗的研制奠定良好基础．已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒，该病毒表面的A蛋白为主要抗原，且疫苗生产和抗体制备的流程之一如图：版权所有：中华资源库www.ziyuanku.com （1）②过程可以通过　PCR　技术大量扩增A基因，该技术的原理是　DNA双链的复制　．（2）过程③构建A基因重组载体时，必须使用限制酶和　DNA连接酶　两种工具酶．（3）若受体细胞为动物细胞，过程④常用的方法是　显微注射法　，A蛋白属于　抗原　性物质．（4）过程⑦运用了　动物细胞融合技术　技术，该过程技术的原理是　细胞膜的流动性　．（5）对健康人进行该传染病免疫预防时，可选用图中基因工程生产的　A蛋白　所制备的疫苗．对该传染病疑似患者确诊时，可以从疑似患者体内分离出病毒，与已知病毒进行　核酸序列（或基因序列）　比较；或用图中的　抗A蛋白的单克隆抗体　进行特异性结合检测．考点：基因工程的原理及技术；单克隆抗体的制备过程．版权所有分析：分析题图：图示为疫苗生产和抗体制备的流程之一，其中①表示逆转录过程；②是获取目的基因（A基因）的过程；③是基因表达载体的构建过程；④是将目的基因导入受体细胞的过程；⑤是从小鼠皮下获取已经免疫的B细胞的过程；⑥表示B细胞的增殖和分化过程；⑦是细胞融合过程；X为杂交瘤细胞．解答：解：（1）基因工程的操作步骤是：目的基因的获取﹣﹣构建基因表达载体﹣﹣导入受体细胞﹣﹣目的基因的检测和表达．过程②代表的是目的基因（A）的获取，可以通过PCR技术大量扩增A基因，该技术的原理是DNA双链的复制．（2）构建A基因重组载体时，首先需用限制性核酸内切酶切割含有A基因的外源DNA分子和运载体，再用DNA连接酶连接A基因和运载体形成A基因重组载体．（3）④是将目的基因导入受体细胞的过程，常用显微注射法将目的基因导入动物细胞，A蛋白是外源基因控制产生的，属于抗原性物质．（4）过程⑦采用动物细胞融合技术，将效应B细胞与骨髓瘤细胞融合，获得的细胞叫杂交瘤细胞，其具备了骨髓瘤细胞无限增殖的特性和效应B细胞产生抗体的特性，从而制备单克隆抗体．动物细胞融合技术的原理是细胞膜的流动性．（5）本题中提示该RNA病毒表面的A蛋白为主要的抗原，故而可选用通过基因工程生产的A蛋白制备疫苗；确诊时为判断该病毒是否为题目中的RNA病毒，可以进行核酸序列的比对，也可以利用单克隆抗体具备特异性，利用抗A蛋白的特异性单克隆抗体通过能否特异性结合判断病毒表面是否有A蛋白的存在进一步进行检测是否为目的RNA病毒．故答案为：（1）PCRDNA双链的复制（2）DNA连接酶（3）显微注射法抗原（4）动物细胞融合技术细胞膜的流动性（5）A蛋白核酸序列（或基因序列）抗A蛋白的单克隆抗体版权所有：中华资源库www.ziyuanku.com 点评：本题以图展示了疫苗的生产和单克隆抗体的制备的过程，考查了中心法则、基因工程、动物细胞工程等现代生物科技．考查了学生对相关知识的理解和掌握情况，培养学生搜集和处理科学信息的能力，思维能力，分析和解决问题的能力，具有一定的难度．　10．（11分）（2015春•遵义月考）天然酿酒酵母菌通常缺乏分解淀粉的酶类，用作发酵原料的淀粉需经一系列复杂的转化过程才能被利用．研究者从某丝状真菌中获取淀粉酶基因并转入酿酒酵母菌，获得的酿酒酵母工程菌可直接利用淀粉产生酒精．请回答下列问题：（1）若要鉴定淀粉酶基因是否插入酿酒酵母菌，可采用的检测方法是　DNA分子杂交技术　，该项方法要用　用放射性同位素标记的目的基因　作探针进行检测．（2）采用PCR技术可对目的基因进行体外扩增．该反应体系的主要成分应包含：扩增缓冲液（含Mg2+）、水、4种脱氧核苷酸、引物、　Taq酶（耐高温的或热稳定的DNA聚合酶）　和　模板DNA　．假如引物都用3H标记，从理论上计算循环4次，所得DNA分子中含有3H标记的DNA占　100%　．（3）已知BamHⅠ与BglⅡ的识别序列及切割位点如图所示，用这两种酶和DNA连接酶对一段含有数个BamHⅠ和BglⅡ识别序列的DNA分子进行反复的切割、连接操作，若干循环后　　序列明显增多．（4）基因工程只能生产自然界已存在的蛋白质，　蛋白质工程　却能生产自然界不存在的新的蛋白质，但最终还须通过改造基因来实现，原因是　①基因控制蛋白质的合成，改造基因即改造了蛋白质；②改造的基因可以遗传，直接改造的蛋白质不能遗传；③目前对大多数蛋白质复杂的高级结构还不清楚，所以改造基因比直接改造蛋白质容易　．考点：基因工程的原理及技术．版权所有分析：基因工程操作的工具是限制性内切酶、DNA连接酶和运载体；基因工程操作的步骤为提取目的基因、目的基因与运载体结合、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与表达．目的基因的检测有多种手段，如①DNA分子杂交技术；②分子杂交技术；③抗原﹣抗体杂交技术．微生物在基因工程具有重要的作用，如获取运载体，用来生产多肽药物等．解答：解：（1）检测目的基因是否导入受体细胞，可采用DNA分子杂交技术，用放射性同位素标记的目的基因作探针进行检测．（2）PCR反应体系的主要成分应该包含：扩增缓冲液（含Mg2+）、水、4种脱氧核糖苷酸、模板DNA、TaqDNA聚合酶和（对干扰素基因特异性的）DNA引物；假如引物都用3H标记，由于每次合成都需要引物，所以从理论上计算循环4次所得DNA分子中都含有3H．（3）巳知BamHI与BglII的识别序列及切割位点如图2所示．用这两种酶和DNA连接酶对一段含有数个BamHⅠ和BglⅡ识别序列的DNA分子进行反复的切割、连接操作，若干循环后和序列明显增多．版权所有：中华资源库www.ziyuanku.com （4）基因工程只能生产自然界已存在的蛋白质，蛋白质工程虽能生产自然界不存在的新蛋白质，但最终还须通过改造基因来实现，原因是：①基因控制蛋白质合成，改造基因即改造了蛋白质；②改造的基因可以遗传，直接改造的蛋白质不能遗传；③目前对大多数蛋白质复杂的高级结构还不清楚，所以改造基因比直接改造蛋白质容易．故答案为：（1）DNA分子杂交技术用放射性同位素标记的目的基因（2）Taq酶（耐高温的或热稳定的DNA聚合酶）模板DNA100%（3）（4）蛋白质工程①基因控制蛋白质的合成，改造基因即改造了蛋白质；②改造的基因可以遗传，直接改造的蛋白质不能遗传；③目前对大多数蛋白质复杂的高级结构还不清楚，所以改造基因比直接改造蛋白质容易点评：本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的工具和操作步骤，能应用基因工程技术培育获得的酿酒酵母工程菌，属于考纲识记和理解层次的考查，这类试题需要考生在平时的学习过程中学会构建知识网络结构．　11．（10分）（2015春•遵义月考）现有A和B两个肉牛品种，A品种牛的细胞组成可表示为A细胞核、A细胞质，B品种牛则为B细胞核、B细胞质．（1）如果要获得一头克隆牛，使其细胞由A细胞核和B细胞质组成，基本步骤是，从A品种牛体内取出体细胞，进行体外培养．然后再从培养细胞中取出　细胞核　注入B品种牛的　去核　卵母细胞．（2）对重组细胞经过某处刺激和培养后，可形成胚胎，在培养过程中，配制的培养液通常加入　血浆　等天然成分，提供O2和CO2的作用分别是　用于细胞代谢　和　维持培养液的PH　．（3）一般来说，要想大量获得这种克隆牛比较难，原因之一是卵母细胞的数量不足，为解决这一问题，可以从屠宰场收集　牛卵巢　，并从中获得卵母细胞．（4）克隆牛的产生说明　动物体细胞核　具有全能性．克隆牛的性状主要表现　A　品种牛的特征．由A、B两品种杂交得到的牛与克隆牛相比，杂交牛细胞核的遗传物质来自　两　个亲本，克隆牛和杂交牛的遗传物质组成　不同　（相同，不同）．考点：动物细胞核移植技术；胚胎移植．版权所有分析：动物核移植是将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为克隆动物．克隆牛说明动物细胞核具有全能性，克隆牛主要表现供核动物的特征，杂交牛的细胞核遗传物质来自2个亲本．在培养动物胚胎时，动物血浆可以提供生长因子，血浆中的有些物质也可以提供碳源和氮源；恒温箱中加入CO2可以调节细胞培养液的Ph．解答：解：（1）动物细胞核具有全能性，将A细胞核注入B处于减数第二次分裂中期的卵母细胞．形成的胚胎称为重组胚胎，将该胚胎移入代孕母牛的子宫中可发育成克隆动物．（2）在培养过程中，配制的培养液通常加入动物血浆等天然成分，提供O2的作用是用于细胞代谢，提供CO2的作用是维持培养液的PH．（3）由于卵母细胞数量有限，所以克隆牛数量少，为解决这一问题，可以从屠宰场收集牛卵巢，并从中获得卵母细胞．版权所有：中华资源库www.ziyuanku.com （4）克隆动物利用的是动物细胞的细胞核全能性，得到的新个体的性状主要有细胞核决定，与供核母牛的性状基本一致，杂交牛是精子和卵细胞的融合受精得到受精卵，细胞核来自两个亲本，不过由于精子含有很少的细胞质，受精卵的细胞质主要来自卵细胞，所以杂交牛和克隆牛的遗传物质是不同的．故答案为：（1）细胞核去核（2）血浆用于细胞代谢维持培养液的PH（3）牛卵巢（4）动物体细胞核A两不同点评：本题考查核移植技术，意在考查学生运用书本相关知识解决实际问题的能力．注意杂交牛和克隆牛的区别．　版权所有：中华资源库www.ziyuanku.com 版权所有：中华资源库www.ziyuanku.com