实验一生物显微镜的构造和使用方法

实验一生物显微镜的构造和使用方法一、目的要求（一）熟悉生物显微镜的构造及其功用，正确掌握显微镜的使用方法并牢记使用时的注意事项。（二）学习低、高倍镜的镜检技术。二、实验内容（一）观察显微镜的各部分结构，理解其基本性能。（二）学习使用显微镜的方法。（三）初步认识几种类型的显微镜。三、材料和用具电子生物显微镜、载玻片、盖玻片、擦镜纸、牙签、洗耳球，甲基蓝染色液、滤纸。四、操作与观察（一）显微镜的基本结构：显微镜是实验室中最常用的仪器。我们要了解它的基本结构，并学会使用显微镜的方法。显微镜的中部有一弯曲的柄，称镜臂；基部有一马蹄形部分，是镜座。自柜中取用时，用右手握紧镜臂，左手托住镜座，保持镜体直立，轻轻放置于桌上，观察各部构造。镜座上的短柱叫镜柱。镜臂基部有一个方形或圆形的平台，是载物台（或称镜台）。台的中央有一圆孔，可通过光线。两侧有压片夹，用以固定玻片标本。现代的显微镜具镜台X-Y驱动器，用以固定和移动玻片标本。在圆孔的下面，有由一片或数片透镜所组成的聚光器，有集射光线于物体的作用。在聚光器下方有反光镜，可将光线反射至聚光器。此镜一面平，一面凹。凹面具有较强的反光性，多用于光线较暗的情况下；光线较强时用平面镜即可。电子显微镜的光源来源于内光源，位于镜座靠后方。镜座右侧臂有调节螺旋，可以前后调节改变光线的强弱。光线较强适于观察色深的物体；光线较弱适于观察透明（或无色）的物体。在载物台的圆孔上方，有一附于镜柄上端的圆筒称为镜筒，其上下两端附有镜头。现代的显微镜一般有两个镜筒。两镜筒之间的距离，可按观察者双目的的距离调节。镜筒上端为接目镜（或称目镜），可从镜筒内抽出。接目镜有低倍和高倍之分。在镜筒下端有可放置的圆盘叫旋转器，下面附有2～4个接物镜（或称物镜）以螺旋旋入旋转器内。接物镜也有低倍和高倍之分。转动旋转器可换用接物镜。在镜臂上有两组螺旋。大的叫粗调焦器，小的叫细调焦器。现代的显微镜粗、细调焦器常组合在一起，外周粗的螺旋为粗调焦器，小的叫细调焦器。用调焦器调焦点。粗调焦器升降镜筒较快，用于低倍镜调焦；细调焦器升降镜筒较慢，用于高倍镜调焦。接物镜有低倍和高倍之分。较短的是低倍，一般放大10倍（10×）；较长的是高倍，一般放大40倍（40×）、油物镜放大100倍（100×）。接目镜也有高低倍之分，较长的是低倍，一般放大5倍（5×）或6倍（6×），较短的是高倍，一般放大10倍（10×）、12倍（12×）或15倍（15×）。显微镜的总放大倍数是接目镜的放大倍数与接物镜放大倍数的乘积。例如，作用5×接目镜与10×接物镜，则总放大倍数是50倍。使用10×接目镜与40× 接物镜，则总放大倍数是400倍。（二）显微镜的使用方法1．光线的调节：使用显微镜时，应使镜臂向着自己（现代显微镜使镜臂反向对着自己），摆好显微镜，平放在实验台上。转动粗调焦器，把镜筒向上提起。转动旋转器，使低倍接物镜对准载物台的圆孔。二者相距约2cm左右，打开光源按钮，向前向后移动按钮，两眼对着双筒接目镜观察，调节光线的强弱至适宜强度。2．低倍镜的使用：将需观察的标本装片放在载物台上，使标本正对中央圆孔。用玻片夹固定。俯首侧视接物镜，并顺时针方向旋动粗调焦螺旋，使载物台上升到装片与接物镜约0.5厘米处。危重双眼全睁自目镜观察，并向逆时针方向慢慢地转动粗调焦螺旋，使载物台下降至能见到物像为止。为使见到的物像更清晰，再来回转动细调焦螺旋。3．高倍镜的使用：需用高倍镜时，一定是在上述低倍镜下能看清物像的前提下进行。首先将要详细看的部分移到视野正中央，转动转换器，换高倍物镜。转动细调焦器，上下调节，使物像达到最清晰为止。电子显微镜（三）镜检练习1、字母或汉字观察：取干净载玻片，在其正中用钢笔写上一个英文字母或汉字，字体越小越好，于低倍镜下观察，上下左右轻轻移动装片，观察物像与实际物像及物像移动方向如何？思考一下原因。2、人口腔粘膜上皮细胞的观察：取一干净的载玻片，放一滴清水，用消毒的牙签从口腔颊部轻轻地刮取一点粘膜物，置于载玻片的水中混匀，再将盖玻片一边与水外缘相接，然后将盖玻片以45°倾斜角匀速放下，制成涂片标本。依次进行低、高倍镜镜检。（四）便用显微镜的注意事项1、加强责任心，养成爱护仪器的习惯，严格操作规程。2、取放显微镜时必须一手握镜臂，另—手托住镜座，禁止单手提着行走。 3、禁止拆散显微镜上任何部件。4、镜检时力求坐姿端正、自然、舒适，双目同时睁开观察，这样即利于绘图，又可减少眼睛疲劳。5、每次镜检，不论物体大小，其顺序必须是先低倍后高倍，最后用油浸镜。6、低倍镜检时必须一边俯侧观察载物台上升一边转动粗调螺旋，然后才能在目镜中观察降低载物台找物像。用高倍镜和油浸镜时，绝不能转动粗调螺旋。7、观察带有水或其他药液的标本，一定要加上盖玻片，并用滤纸吸去盖玻片周围溢出的水或药液，以免接触腐蚀显微镜。8、显微镜各部分必须保持清洁。光学系统部分切勿用手、布、粗纸等擦拭，必须用擦镜纸轻轻揩擦，若镜头等光学部分积有灰尘时需先用洗耳球吸去灰尘后再擦拭，必要时可略蘸些二甲苯进行揩擦。金属等机械部分有灰尘时，可用纱布擦拭。9、显微镜用毕后，必须把接物镜移开。使两个高、低倍接物镜以“八”字形朝前方，然后取出装片。拔掉电源，放回原位，罩好防护罩。最后要按仪器使用情况登记本如实填写该仪器使用情况。五、作业1、绘制人口腔粘膜上皮细胞图。2、使用显微镜应注意哪些事项？3、由低倍镜转高倍镜应特别注意什么？