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细胞分子生物学天商09级期末考试复习资料

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hnRNA:不均一核RNA,核内不均一RNA为存在于真核生物细胞核中的不稳定、大小不均的一组高分子RNA(分子量约为105~2×107,沉降系数约为30—100S)之总称。占细胞全部RNA之百分之几,在核内主要存在于核仁的外侧。hemidesomosome(半桥粒):上皮细胞与其下方其膜间形成的特殊连接,在形态上类似半个桥粒,但其蛋白质成分与桥粒有所不同,胞内连有中间丝。gatedchannel(门控通道):Gapjunction(间隙连接):动物细胞中,由连接子构成的细胞间通信连接。允许分子质量小于1000Da的分子通过,使相邻细胞间形成电偶联和代谢偶联。Initiationcondon(起始密码子):蛋白质翻译过程中被核糖体识别并与起始tRNA(原核生物为甲酰甲硫氨酸tRNA,真核生物是甲硫氨酸tRNA)结合而作为肽链起始合成的信使核糖核酸(mRNA)三联体碱基序列。大部分情况下为AUG,原核生物中有时为GUG等。Focaladhesion(粘着斑):粘着斑是连接位于上皮细胞紧密连接的下方,靠整联蛋白同肌动蛋白相互作用,将细胞与细胞外基质进行连接。Electron-transportchain(电子传递链):定义一:多种递电子体或递氢体按次序排列的连接情况。生物氧化过程中各物质氧化脱下的氢,大多由辅酶接受,这些还原性辅酶的氢在线粒体内膜上经一系列递电子体(或递氢体)形成的连锁链,逐步传送到氧分子而生成水。此种连锁过程与细胞内呼吸过程密切相关。植物的叶绿体中则存在光合电子传递链以传递电子,完成光合作用中水分解出氧,形成NADPH的过程。定义二:逐渐提高氧化还原电位的电子载体系列。如线粒体内膜中的4个大的多蛋白质复合物和泛醌以及可在膜间隙中扩散的细胞色素c,电子通过此系列,由还原的电子供体(NADH)传递给氧。Confocalsanningmicroscope(激光共聚焦扫描显微镜):激光共聚焦扫描显微镜(laserconfocalscanningmicroscope)用激光作扫描光源,逐点、逐行、逐面快速激光共聚焦扫描显微镜扫描成像,扫描的激光与荧光收集共用一个物镜,物镜的焦点即扫描激光的聚焦点,也是瞬时成像的物点。激光共聚焦扫描显微镜既可以用于观察细胞形态,也可以用于细胞内生化成分的定量分析、光密度统计以及细胞形态的测量。Desomosome(桥粒):相邻细胞间的一种斑点状黏着连接结构。其质膜下方有盘状斑,与10nm粗的中间丝相连,使相邻细胞的细胞骨架间接地连成骨架网。Chemiosmosis(化学渗透假说):是解释氧化磷酸化作用(见氧化磷酸化)机理的一种假说。内容:1.线粒体内膜上的呼吸链同时起质子泵的作用,可以在传递电子的同时将质子从线粒体基质腔转移到膜间腔;2.线粒体内膜上的ATP合酶复合体也能可逆地跨线粒体内膜运送质子,一方面利用水解ATP的能量将质子从基质腔转移到膜间腔,另一方面当膜间腔存在大量质子使线粒体内膜内外存在足够的电化学H+梯度时,质子则从膜间腔通过ATP合成酶复合物上的质子通道进入基质,同时驱动ATP合成酶合成ATP;3.线粒体内膜本身具有离子不透过性,能隔绝包括H+、OH-在内的各种正负离子;4.线粒体内膜上有一系列可介导基本代谢物质和选择性转运无机离子进入线粒体内膜的载体蛋白。Chaperone(分子伴侣):一组从细菌到人广泛存在的蛋白质,非共价地与新生肽链和解折叠的蛋白质肽链结合,并帮助它们折叠和转运,通常不参与靶蛋白的生理功能。主要有三大类:伴侣蛋白、热激蛋白70家族和热激蛋白90家族。Apoptosis(细胞凋亡):由死亡信号诱发的受调节的细胞死亡过程,是细胞生理性死亡的普遍形式。凋亡过程中DNA发生片段化,细胞皱缩分解成凋亡小体,被邻近细胞或巨噬细胞吞噬,不发生炎症。Actionpotential(动作电位):指可兴奋细胞受到刺激时在静息电位的基础上产生的可扩布的电位变化过程。Light-dependentreaction(光反应):通过叶绿素等光合色素分子吸收、传递光能,并将光能转化为化学能,形成ATP和NADPH的过程。包括光能的吸收、传递和光合磷酸化等过程。Light-independentreaction(暗反应):是一种不断消耗ATP和NADPH并固定CO2形成葡萄糖的循环反应,又被称为卡尔文循环。卡尔文用C标记的CO2,探明了CO2转化成有机物的途径,因此暗反应过程又被称为“卡尔文循环”。Limitofresolution(分辨率):能清楚区分被检物体细微结构最小间隔的能力。即相邻两个物点间最小距离的能力。Nucleosome(核小体):组成真核细胞染色体的基本结构单位,由组蛋白和大约200个bp的DNA组成的直径约10nm的球形小体。其核心由H2A、H2B、H3和H4四种组蛋白各两个分子组成八聚体构成。 Operon(操纵子)转录的功能单位。很多功能上相关的基因前后相连成串,由一个共同的控制区进行转录的控制,包括结构基因以及调节基因的整个DNA序列。主要见于原核生物的转录调控,如乳糖操纵子、阿拉伯糖操纵子、组氨酸操纵子、色氨酸操纵子等。定义二:原核生物中由启动子、操作基因和结构基因组成的一个转录功能单位。Promoter(启动子):DNA分子上能与RNA聚合酶结合并形成转录起始复合体的区域,在许多情况下,还包括促进这一过程的调节蛋白的结合位点。Proto-oncogene原癌基因:是细胞内与细胞增殖相关的基因,是维持机体正常生命活动所必须的,在进化上高等保守。当原癌基因的结构或调控区发生变异,基因产物增多或活性增强时,使细胞过度增殖,从而形成肿瘤。Signalrecognitionparticle,SRP(信号识别颗粒):由6个蛋白质亚基结合在1个7SRNA分子上组成的复合体。该复合体能识别分泌蛋白肽链中的信号序列,一旦信号序列从核糖体露出即与之结合,并引导核糖体附着到内质网上。Transcriptionfactor(转录因子):直接结合或间接作用于基因启动子、形成具有RNA聚合酶活性的动态转录复合体的蛋白质因子。有通用转录因子、序列特异性转录因子、辅助转录因子等。与RNA聚合酶Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ相对应的有三类转录因子:TFⅠ、TFⅡ、TFⅢ。练习题-1二、选择题1.动物细胞中水分约占(C)A.50%一下B.60-70%C.75-85%D.95%以上2.细胞内结构最简单含量最多的化合物是(D)A.氨基酸B.葡萄糖C.甘油D.H2O3.关于蛋白质的四级结构,下列哪像叙述有错?(E)A.指由几个具有三级结构的亚基聚合而成的空间结构B.是在三级结构的基础上的一种空间构象C.并非所有的蛋白质都具有四级结构D.四级结构一定包含有几条多肽链E.构成四级结构的亚基之间以共价键相连4.原核细胞的遗传物质集中在细胞的一个或几个区域中,密度低,与周围的细胞质无明确的界限,较(A)。A.核质B.拟核C.核液D.核孔5.世界上第一个在显微镜下观察到活细胞的人是(C)A.RobertHookB.MendelC.LeeuwenhookD.Brown6.下列关于病毒描述不正确的是(A)A.病毒可以完全在体外培养生长B.所有病毒必须在细胞内寄生C.所有病毒都具有RNA或DNAD.病毒可来源于细胞染色体的一段7.下列对蛋白质描述错误的是(D)A.都有一级结构B.都有二级结构C.都有三级结构D.都有四级结构8.原核细胞和真核细胞相比,共有的基本特征中,哪一条描述是不正确的?A.都有细胞膜B.都有内质网C.都有核糖体D.都有DNA和RNA9.正如您和细胞的染色质主要是由一下成分构成的(B)。A.DNA,RNA和组蛋白B.DNA,组蛋白和非组蛋白C.DNA,RNA和非组蛋白D.RNA,组蛋白和非组蛋白练习题-2一、填空题1用细胞培养法来研究生命规律的优点是:离体条件下观察和研究生命活动的规律,但它也有局限性,即体内体外的细胞生长条件不能完全相同。2DNA提取过程中使用乙醇的原理是:脱水,灭菌。3细菌细胞酵母细胞和植物细胞的细胞壁的化学组成是不同的,所以在制备原生质体时用不同的酶脱壁,一般细菌常常用溶菌酶,酵母用裂解酶,而植物细胞则用果胶酶或纤维素酶。4凝胶过滤层析又称为排阻层析或分子筛法,主要是根据蛋白质的大小和形状,即蛋白质的相对分子量 进行分离和纯化。1使用氯化钯密度梯度离心,其目的是通过密度梯度来维持重力的稳定性,防止物质对流。2在凝胶电泳中,示踪染料的移动速度相对于各种分子样品的移动要快。3细胞融合的诱导剂主要是PEG。4研究DNA在细胞代谢中的变化,常用的同位素标记物是3H-胸腺嘧啶。5核酸探针分为放射性核素类和非放射性核素类,前者灵敏度高,后者无放射污染。6柱层析包括离子交换层析,凝胶过滤层析和亲和层析三种。7检测DNA和RNA时,产常用的荧光标记物是吖啶橙。二、选择题1.下面哪种方法可以检测DNA和蛋白质的相互作用(A)A.凝胶迁移滞后B.凝胶过滤C.甘油梯度离心D.SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳2.开创杂交瘤技术的科学家是(B)A.McGrath和SolierB.Milestein和KorlerC.Gautheret和NobecurtD.Callan和Tomlinson3.杂交瘤技术中筛选融合细胞时常常选用的办法是(C,D)A.密度梯度离心B.荧光标记的抗体和流式细胞术C.采用在选择培养基中不能存活的缺陷性细胞来筛选融合细胞D.让未融合的细胞在培养过程中自然死亡4.从体细胞克隆高等哺乳动物的成功说明了(C)A.体细胞的全能性B.体细胞去分化还原性C.体细胞核的全能性D.体细胞核的去分化还原性5.要探知细胞内某一蛋白的表达水平,可以通过(C)实现。A.SouthernblotB.NorthernblotC.WesternblotD.原位分子杂交6.单克隆抗的产生是建立在哪种技术上?(B)A.转基因技术B.细胞的融合技术C.生物大分子技术D.细胞显微操作技术7.测定细胞核酸中氮碱的方法是(B)A.Feulgen法B.紫外分光光度法C.硝酸银染色法D.醋酸铀染色法E.伊红染色8.用于原位杂交进行基因定位的放射核素是(A)A.3HB.35SC.32PD.14CE.131I9.孚尔根反应可用于(B)A.定位于细胞内RNA的分布区域B.定位于细胞内DNA的分布区域C.定位于细胞内脂肪的分布区域D.定位于细胞内磷酸酶的分布区域E.确定放射线化合物在细胞内的分布部位10.采用哪种技术能证明DNA的半保留复制(D)A.染色质重组技术B.细胞融合技术C.染色体分带技术D.SCE染色技术E.免疫荧光技术三、概念题1.单克隆抗体:B淋巴细胞能够产生抗体,但在体外不能无限分裂增殖;肿瘤细胞不能产生抗体,但能在体外无限增殖传代。将两种细胞融合后得到的杂交瘤细胞具有两种亲本细胞的特性,即既能产生抗体又能在体外无限增殖。2.转基因技术:用物理化学生物等技术将外源基因转移到受体细胞或生物体中,并使之在此实现基因的扩增或表达的技术。3.沉降系数:颗粒物质或溶质在超速离心场中的沉降速率,即沉降系数为每单位离心力场的沉降速度。4.基因敲除:利用基因同源重组技术,将外源性无功能的基因转入细胞与基因组中的同源序列进行同源重组,把具有同源序列的有功能的基因置换出来,使功能基因的缺失或失活的技术。5.PCR技术:利用耐热DNA聚合酶依赖于DNA模板的特性,模仿体内DNA复制过程,经过“变性、退火、延伸”三个步骤,使人工合成的一对引物,在被扩增的DNA模板链的两端形成双链,由DNA聚合酶催化一对引物之间的聚合反应,使原模板的一条DNA双链延伸成为两条DNA双链,并成为下次循环模板的技术。6.探针:广义上是指能与特定靶分子发生特异性相互作用,并能被特殊方法所检测的分子,例如抗原-抗体、生物素-亲和素等均可看成是探针与靶分子的相互作用。基因探针是指能与特定核苷酸序列发生特异互补杂交,杂交后又能被特殊方法检测的已知被标记(同位素或非同位素标记)的核苷酸链。五、问答题1.用蔗糖密度梯度和CsCl密度梯度离心法分离生物大分子,在原理上有什么不同?尽管都是惰性介质,但是蔗糖溶液的粘度大,往往形成不连续梯度,而氯化铯则形成连续性梯度。2.用密度梯度立新技术分离细胞组分时,介质的梯度是怎样分布的?离心结果颗粒分布的规律如何?梯度为从上到下密度增加;离心结果,沉降率大的颗粒在下,小的在上面,分层排布。3.克隆基因组DNA和克隆cDNA的区别。这两种克隆都可以扩增和分离目的基因。基因组DNA包含了调控基因序列和间隔序列,而cDNA克隆只含有编码序列。纯cDNA便于基因测序和蛋白质氨基酸序列的测定。基因组DNA克隆提供了有关DNA进化、基因家族和基因调控机制的信息。 4.解决下列问题可采用何种技术?1)证明犯罪现场找到的头发中的DNA与被告犯罪嫌疑人的DNA是吻合的。进行PCR反应后用限制性内切酶处理,经过凝胶电泳,进行限制性长度多态性检测。2)鉴定分泌到细胞外的糖蛋白激素,其糖基是在细胞的哪一部分被加上去的;用放射性标记激素示踪,结合发射自显影。3)寻找新的便宜的而且丰富的人类生长激素来源,以便用于治疗生长激素缺乏症患者;分离生长激素的基因,重组并克隆其基因,然后从表达激素的转基因细胞中纯化该激素。4)确定酶蛋白中关键氨基酸的方法。进行定点突变,再进行酶促动力学分析。练习题-5二、选择题1.有关协助扩散的描述中,不正确的是(A,D)A.需要ATP提供能量B.需要转运蛋白参与C.从高浓度向低浓度转运D.从低浓度向高浓度转运2.通向协同运输中,钠离子顺浓度梯度运输的同时伴有葡萄糖或氨基酸的(A)A.顺浓度梯度B.等浓度梯度C.逆浓度梯度D.与浓度梯度无关3.在跨膜运输过程中,速度由快变慢的依次是(B)A.乙醇、硝酸钠、甘油、葡萄糖B.乙醇、甘油、葡萄糖、硝酸钠C.乙醇、硝酸钠、葡萄糖、甘油D.甘油、乙醇、硝酸钠、葡萄糖4.N-连接的共同前体有多少个单糖残基(A)A.14个B.24个C.34个D.44个5.在细胞膜内外正常的钠离子和钾离子浓度差的形成和维持是由于(ABCDE)A.膜在安静时对钾离子通透性大B.膜在兴奋时对钠离子通透性大C.钠离子和钾离子易化扩散的结果D.膜上钠-钾泵的作用6.钠-钾ATPase(ABCD)A.介导主动运输B.介导钠钾的协同运输C.是一种整合膜蛋白D.能够创造跨膜动力势B.7.下列哪种运输方式不消耗ATP(B)A.胞吞B.易化扩散C.离子泵D.次级主动运输8.钠钾泵的特征为(ABDE)A.具有ATP酶活性B.有大小两种亚基组成C.钠离子的结合点位于细胞膜外D.乌本苷为其抑制剂E.逆浓度梯度运输方式9.下列分子中不能通过膜蛋白脂双层的是(C)A.二氧化碳B.乙醇C.葡萄糖D.尿素10.小肠上皮吸收葡萄糖以及各种氨基酸时,通过(B)来逆浓度梯度运输的A.与钾离子相伴的运输B.与钠离子相伴的运输C.与钙离子相伴的运输D.载体蛋白利用ATP能量的运输11.细胞膜的厚度是约(B)A.1nmB.10nmC.20nmD.100nm12.(C)降低细胞膜的流动性A.温度升高B.卵磷脂/鞘磷脂比值高C.膜蛋白D.不饱和脂肪酸13.细胞内中间纤维通过(C)连接方式,可将整个组织细胞连成一个整体。A.粘着带B.粘着斑C.桥粒D.半桥粒14.下面哪种生物学功能可能与糖蛋白的糖侧链无关(C)A.细胞识别作用B.增强糖蛋白的稳定性C.增加糖蛋白由高尔基体向细胞质膜的转运速率D.使糖蛋白折叠成正确的构象15.生物膜的液态流动性主要取决于(C)A.膜蛋白B.膜糖类C.膜脂D.膜糖蛋白E.膜糖脂16.生物膜的主要化学成分是(D)A.蛋白质、糖类和水B.蛋白质、糖类和金属离子C.蛋白质、糖类和脂肪D.蛋白质、糖类和脂类E.脂类、糖类和无机盐 17.细胞识别的主要部位是(E)A.细胞膜的特化结构B.细胞质C.细胞核D.细胞器E.细胞外被18.细胞的连接方式有(ABC)A.紧密连接B.缝隙连接C.桥粒连接D.细胞通讯E.细胞黏合19.生物膜结构和功能的特殊性主要取决于(B)A.膜脂的种类B.膜蛋白组成和种类C.膜糖类的组成和种类D.膜中糖类和蛋白质的关系E.膜中脂类与蛋白质的比例20.细胞表面由那些结构组成(BCD)A.细胞表面的特化结构B.细胞外被C.细胞膜D.胞质溶胶层E.细胞连接三、概念题1.桥粒:动物相邻的细胞间一种连接结构,使细胞相粘贴。2.凝集素:是动物细胞和植物细胞都能够合成和分泌的、能和糖结合的蛋白,在细胞识别和粘着反应中起重要作用,主要是促进细胞间的粘着。3.配体门通道:一种需要配体与特定受体结合后才能开启的闸门通道,属于离子通道的一种。这种通道在多数情况下呈关闭状态,当受到某种化学信号物质(配体)的作用后才开启形成跨膜的离子通道蛋白。4.电压门通道:在细胞膜电位突然变化产生特定电压的条件下才能开启的离子通道。当膜去极化膜内外丝的电压差降低时,通道开放。5.钠钾泵:也叫Na+/K+ATP酶,是位于细胞质膜脂质双分子层中的载体蛋白,具有ATP酶的活性,在ATP直接提供能的条件下逆浓度差主动运转钠离子和钾离子。练习题-6:一、说明内膜系统的形成对细胞的生命活动具有哪些重要意义1、首先是内膜系统中各细胞器膜结构的合成和装配是统一进行的,这不仅提高了合成的效率,更重要的是保证了膜结构的一致性,特别是保证了膜蛋白在这些膜结构中方向的一致性。2、内膜系统在细胞内形成了一些特定的功能区域和微环境,如酶系统的隔离与衔接,细胞内不同区域形成pH值差异,离子浓度的维持,扩散屏障和膜电位的建立等等,以便在蛋白质、脂类、糖类的合成代谢、加工修饰、浓缩过程中完成其特定的功能。3、内膜系统通过小泡分泌的方式完成膜的流动和特定功能蛋白的定向运输,这不仅保证了内膜系统中各细胞器的膜结构的更新,更重要的是保证了一些具有杀伤性的酶类在运输过程中的安全,并能准确迅速到达作用部位。4、细胞内的许多酶反应是在膜上进行的,内膜系统的形成,使这些酶反应互不干扰。5、扩大了表面积,提高了表面积与体积的比值。6、区室的形成,相对提高了重要分子的浓度,提高了反应效率。练习题-7二、问答题1、以胆固醇为例叙述细胞内受体介导的胞吞作用机制:通常血液中的胆固醇多以胆固醇复合物的形式存在和运输,这一复合物为低密度脂蛋白(LDL)。细胞在合成生物膜等结构需要胆固醇或生理代谢需要胆固醇时,先合成LDL受体,并结合在细胞膜上,这一有受体的区域因有衣被附着称为有被小窝(凹)。LDL颗粒通过LDL受体结合后,在细胞表面形成有被小凹,LDL-受体复合物形成有被小泡进入细胞。在细胞内,有被小泡失去衣被,和胞内体的小囊结合,形成内体。内体将受体-配体分离。带有受体部分的膜结构芽生,参与受体再循环。含LDL的内体与溶酶体结合,LDL被溶酶体消化,释放出胆固醇、氨基酸等多种可利用的物质进入细胞,共细胞代谢所需,完成胆固醇的受体介导的入胞作用。练习题-8一、选择题1.核糖体与粗面内质网直接接触的是(A)A.60s的大亚基B.40s的小亚基C.80s的核糖体颗粒D.50s的大亚基E.30s的小亚基2.下列哪种蛋白质的合成与粗面内质网无关(E)A.消化酶B.肽类激素C.抗体蛋白D.溶酶体蛋白E.大多数可溶性蛋白3.粗面内质网不具备的功能是(C)A.核蛋白附着的支架B.参与蛋白质合成C.解毒作用 D.物质运输的管道E.区域化作用4.高尔基复合体的小囊泡主要来自于(B)A.溶酶体B.粗面内质网C.微粒体D.滑面内质网E.以上都不是5.高尔基复合体的主要功能是(C)A.合成蛋白质B.合成脂类C.对蛋白质进行加工和转运D.参与细胞氧化过程E.消化异物6.高尔基复合体最重要的部分是(A)A.扁平囊B.大囊泡C.小囊泡D.液泡E.微泡7.与内质网形态功能改变无关的是(E)A.肿胀B.扩张C.脱颗粒D.增生E.位置变化8.滑面内质网不具备的功能是(E)A.脂质和固醇类合成B.蛋白质及脂类的运输C.糖原代谢D.肌肉的收缩E.肽类激素的活化9.下列哪种细胞无内质网(B)A.淋巴细胞B.红细胞C.变形虫细胞D.干细胞E.癌细胞10.所含的内质网全为粗面内质网的细胞是(E)A.平滑肌细胞B.癌细胞C.胚胎细胞D.培养细胞E.胰腺外分泌细胞11.内质网标志酶是(D)A.胰酶B.糖基转移酶C.RNA聚合酶D.葡萄糖-6-磷酸酶E.以上都不是12.高尔基复合体的特征酶是(D)A.璜基-糖基转移酶B.磷酸脂酶C.酪蛋白磷酸激酶D.糖基转移酶E.甘露糖苷酶、13.小肠上皮细胞间的杯状细胞核顶部有丰富的(A)A.高尔基体B.粗面内质网C.滑面内质网D.溶酶体E.线粒体14.蛋白质涉及N-连接寡糖的糖基化作用发生在(B)A.滑面内质网腔内B.粗面内质网腔内C.滑面内质网膜上D.粗面内质网膜上E.高尔基复合体15.内质网的病变改变表现在(ABCDE)A.解聚B.脱粒C.肿胀D.所含内容物质和量的改变E.萎缩16.内质网蛋白的分选信号是(A)A.KDELB.氧化酶C.过氧化氢酶D.糖基转移酶E.甘露糖-6-磷酸17.所含内质网主要为粗面内质网的细胞为(AE)A.胰腺外分泌细胞B.平滑肌细胞C.横纹肌细胞D.肾上腺皮质细胞E.浆细胞18.信号假说的特点是(ABCDE)A.核糖体与粗面内质网结合属于功能性结合B.是特异性的C.是暂时性的D.受时间的限制E.受空间的限制19.高尔基复合体数量多的细胞是(AD)A.分化程度高的细胞B.未分化的胚胎细胞C.干细胞D.分泌功能旺盛的细胞E.成熟的红细胞20.在扁平囊膜上的糖基转移酶是(ACD)A.甘露糖苷酶B.唾液酸转移酶C.乙酰葡萄糖胺转移酶D.半乳糖转移酶E.过氧化氢酶21.附着于粗面内质网上的核糖体合成的蛋白质包括(ABCDE)A.分泌蛋白B.膜蛋白C.驻留蛋白D.溶酶体蛋白E.少量的可溶性蛋白22.高尔基复合体的功能(ABCDE)A.参与细胞分泌活动B.对蛋白质的修饰加工C.分选蛋白质的功能D.对蛋白质的水解和加工E.参与膜的转化23.细胞质中合成脂类的重要场所是(B)A.粗面内质网B.光面内质网C.高尔基体D.胞质溶胶24.寡糖连的O-连接是接在蛋白质的下列氨基酸残疾上(D)A.天冬氨酸B.天冬酰胺C.丝氨酸D.丝氨酸或苏氨酸25.下列哪种细胞的内质网均为光面内质网(D)A.癌细胞B.干细胞C.肝细胞D.横纹肌细胞26.下列哪种脂类不在内质网中合成?(C)A.磷脂酰乙醇胺B.磷脂酰甘油C.鞘磷脂D.心磷脂27.合成后进入内质网的多肽一旦出现错误,下列哪种情况不会出现?(C)A.将运出内质网被蛋白酶体水解B.可被二硫键异构酶纠正错误 C.将永远驻留在内质网内D.可被Bip蛋白纠正错误28.高尔基复合体对蛋白质的分选信号存在于(A)A.蛋白质本身B.糖基侧链C.乙酰基侧链D.脂肪酸侧链29.下列各项中哪一个不是高尔基体的功能(D)A.分泌蛋白质B.加工蛋白质C.加工酶的前体使之成熟D.合成磷脂30.N-连接的共同前体有多少个单糖残基?(A)A.14个B.24个C.34个D.44个31.被称为细胞内大分子运输交通枢纽的细胞器是(B)A.内质网B.高尔基体C.核糖体D.溶酶体32.真核生物中,rRNA包括(D)A.28s、23s、和5s分子B.23s、15s、和5s分子C.23s、18s、和5.8s分子D.28s、18s、5.8s和5s分子33.蛋白质的糖基化及其加工、修饰和寡糖链和合成发生在高尔基体的(C)A.顺面潴泡B.中间潴泡C.反面潴泡34.关于粗面内质网,下列叙述错误的是(D)A.粗面内质网表面附着大量核糖体B.粗面内质网常与核膜相接C.粗面内质网是扁囊状内质网D.粗面内质网来自于光面内质网35.关于光面内质网,下列叙述正确的是(B)A.光面内质网是由两层单位膜围成的管状内质网B.光面内质网由粗面内质网衍化而来C.光面内质网的主要成分是DNA、脂类、蛋白质D.光面内质网的主要功能是合成蛋白质36.下列小泡中,属于网格蛋白有被小泡的是(D)A.吞噬泡B.内质网出芽小泡C.高尔基体顺面出芽小泡D.高尔基体反面出芽小泡37.真核蛋白中能使它们进入内质网的特征结构域是(B)A.终止转移结构域B.信号肽序列C.信号序列受体D.信号识别颗粒E.信号识别颗粒38.蛋白质的折叠构象主要取决于它的(B)A.起始氨基酸及随后几个氨基酸残基B.氨基酸的序列及其共价修饰C.分子内二硫键D.氨基酸序列与分子伴侣的作用39.蛋白质的O-连接糖基化修饰是将寡糖基连接到某些氨基酸的(A)上A.-OHB.-NH2C.-CH2D.-SH40.下列哪种蛋白质不属于分子伴侣(D)A.HSP70B.SRPC.蛋白二硫键异构酶D.泛素二、概念题1.多聚核糖体:在蛋白质合成过程中,同一条mRNA分子能够同多个核糖体结合,同时合成若干条蛋白质多肽链,结合在同一条mRNA上的核糖体。2.蛋白质分选信号:主要是指膜结合核糖体上合成的蛋白质,通过信号肽,在翻译的同时进入内质网,然后经过各种加工和修饰,使不同去向的蛋白质带上不同的标记,最后经过高尔基体反面网络进行分选,包装到不同类型的小泡,并运送到目的地,包括内质网、高尔基体、溶酶体、细胞质膜、细胞外和核膜等。广义的蛋白质分选也包括在游离核糖体上合成的蛋白质的定位。3.内质网滞留信号:内质网的结构和功能蛋白羧基端的一个四肽序列:Lys-Asp-Glu-Leu-COO-,即KDEL信号序列。这段序列在高尔基体的膜受有相应的受体,一旦进入高尔基体就会被高尔基体上的受体结合,形成回流小泡被运回内质网,所以将该序列称为内质网滞留信号。练习题-9一、选择题1.细胞骨架是由哪种物质组成?(c)A.糖类2.脂类3.蛋白质D.核酸E.以上都是2.下列哪种结构不是微管组成的(D)A.鞭毛B.纤毛C.纺锤丝D.伪足E.中心粒3.关于微管的组装,哪种说法是错误的?(E)A.微管可随细胞的生命活动不断的组装与去组装B.微管的组装分步进行C.微管的极性对微管的增长有重要意义D.微管蛋白的解聚和聚合时可你的自体组装过程E.微管两端的组装速度是相同的4.组成微丝最重要的化学成分是(A)A.肌动蛋白B.肌球蛋白C.交联蛋白D.波形蛋白E.毛缘蛋白 5.对细胞核其固定作用的结构是(A)A.微管B.微丝C.中间纤维D.核骨架E.内质网6.下列哪种纤维不属于中间纤维?(E)A.角蛋白纤维B.结蛋白纤维C.波形蛋白纤维D.神经丝蛋白纤维E.肌原纤维7.与细胞运动有关的结构是(B)A.微管B.微丝C.中间纤维D.核骨架E.细胞骨架8.恶性细胞转化的一个重要特征是(A)A.微管解聚B.微管聚合C.微丝增加D.微丝减少E.中间纤维减少9.细胞伪足的运动主要是通过什么所起作用(B)A.微管的动态变化B.肌动蛋白的装卸C.肌球蛋白丝的滑动D.微绒毛的收缩10.对微丝有稳定作用的药物是(C)A.toxolB.colchicineC.phalloidinD.cytochalasin11.使微管定的药物(C)A.鬼笔环肽B.长春花碱C.紫杉酚D.细胞松弛素12.主要的微管结合蛋白是(C)A.微管蛋白B.beta-微管蛋白C.微管关联蛋白和tau蛋白D.肌动蛋白和肌球蛋白13.下列哪项不是微管的化学组成成分(D)A.微管蛋白B.beta-微管蛋白C.MAPD.组蛋白14.微管蛋白的异二聚体上具有哪种三磷酸核苷的结合位点(C)A.UTPB.CTPC.GTPD.ATP15.微丝的功能与下列哪项无关(A)A.粒溶作用B.肌肉收缩C.胞质分裂D.胞质环流16.下列哪项不属于中间纤维的功能(D)A.固定细胞核B.参与物质运输C.与有丝分裂有关D.是胞质分裂时收缩环的主要成分17.下列哪种是直接参与肌肉收缩的蛋白质(A)A.肌动蛋白B.原肌球蛋白C.肌钙蛋白D.钙调蛋白18.细胞变形伪足运动的本质是(C)A.细胞膜迅速扩张使细胞局部伸长B.胞内微管蛋白迅速解聚使细胞变形C.胞内微丝迅速重新组装使细胞变形D。胞内中间纤维重新组装使细胞变形19.参与纤毛运动的蛋白质是(B)A.驱动蛋白B.动力蛋白C.tau蛋白D.微管结合蛋白20.中心体能放射出微管素,主要因为其含有(C)A.α-微管蛋白B.β-微管蛋白C.γ-微管蛋白D.微管结合蛋白tau21.间期细胞核的核纤层成分为(C)A.微管B.微丝C.中间纤维D.上述三者均有22.下列哪种细胞骨架成分具有组织特异性(C)A.微丝和中间纤维B.微管和中间纤维C.中间纤维D.微丝23.微丝在非肌细胞中与下列哪种功能无关(D)A.变形运动B.支架作用C.变皱膜运动D.氧化磷酸化练习题-10一、选择题1.线粒体DNA的特点(BD)A.是和核DNA密码略有不同的线状DNAB.是与核DNA密码略有不同的环状DNAC.可与组蛋白结合,形成染色体D.不与组蛋白结合,裸露E.含有线粒体全部蛋白质的遗传物质2.线粒体的半自主性主要表现在(ABCE)A.自身含有遗传物质,mtDNA可以自我复制B.mtDNA的复制和转录需要核基因编码的蛋白参与C.线粒体中含有核糖体,可以合成自身的蛋白质D.线粒体可以通过细胞分裂进行增殖E.生物发生上受核基因和线粒体基因共同控制3.线粒体膜上的孔蛋白的功能是(E)A.细胞骨架B.基因活化C.结构D.自我识别E.运输4.线粒体内膜的特征酶是(C)A.苹果酸脱氢酶B.腺苷酸激酶C.细胞色素C氧化酶D.单胺氧化酶 5.线粒体内膜的特征酶是(D)A.苹果酸脱氢酶B.腺苷酸激酶C.细胞色素C氧化酶D.单胺氧化酶6.线粒体基质的特征酶是(A)A.苹果酸脱氢酶B.腺苷酸激酶C.细胞色素C氧化酶D.单胺氧化酶7.线粒体膜间隙的特征酶是(B)A.苹果酸脱氢酶B.腺苷酸激酶C.细胞色素C氧化酶D.单胺氧化酶8.提供合成ATP能量的跨膜质子梯度发生在(A)A.线粒体内膜B.线粒体外膜C.叶绿体内膜D.叶绿体外膜9.可在光学显微镜下见到的结构是(CD)A.微粒体B.溶酶体C.线粒体D.叶绿体10.在细胞氧化过程中,乙酰辅酶A的生成发生在(A)A.线粒体基质B.线粒体内膜C.线粒体膜间隙D.线粒体外膜11.下列细胞中含线粒体最多的是(B)A.上皮细胞B.心肌细胞C.成熟红细胞D.细菌D.神经细胞12.ATP合成酶是(A)氧化磷酸化复合物A.线粒体内膜上的B.细菌胞质中的C.叶绿体中的D.细胞内膜的13.线粒体氧化磷酸化偶联关键装置是(A)A.ATP合成酶B.细胞色素还原酶C.细胞色素氧化酶D.NADH还原酶14.下列各种膜中,蛋白和脂类比值最高的是(B)A.线粒体基质B.线粒体内膜C.线粒体膜间隙D.线粒体外膜15.光裂解水分子的动力来自(C)A.跨膜类囊体膜的电子浓度梯度B.ATPC.P680+的氧化还原电势D.NADPH16.光合作用中,光反应的产物有(B)A.ATPheNAD+B.ATP和NADPHC.葡萄糖D.蔗糖17.在呼吸作用和光合作用中,质子被分别泵到(B)A.线粒体膜间隙和叶绿体膜间隙中B.线粒体膜间隙和叶绿体类囊体腔C.线粒体膜间隙和叶绿体基质D.线粒体基质和类囊体腔二、名词解释1.化学渗透假说:电子传递过程中,伴随质子从线粒体内膜里层向外层的膜间隙转移,形成跨膜的氢离子梯度,这种势能提供了动力驱动了氧化磷酸化反应,合成了ATP。该学说很好地解释了线粒体内膜中电子传递、质子电化学梯度、ADP磷酸化的关系。2.光反应:在线粒体的类囊体膜上通过叶绿素分子吸收光能,将光能转化为化学能,形成ATP和NADPH的过程,包括光能吸收、电子传递、光合磷酸化三个主要过程。3.暗反应:在线粒体的基质中叶绿素利用光反应产生的ATP和NADPH这两个高能化合物分别作为能源和还原剂将CO2固定转变为葡萄糖,将能量储存的过程。4.氧化磷酸化:在线粒体中伴随呼吸链的氧化过程所发生的能量转换和ATP的形成。5.光合磷酸化:在叶绿体中除了将光能转移到NADPH中之外,还合成ATP,将光合作用和ADP的磷酸化偶联起来。练习题-111.细胞周期:细胞分裂产生的新细胞生长到下一代细胞分裂形成子细胞结束为止所经历的过程叫细胞周期,由四个阶段构成-G1期、S期、G2期、M期。3.MPF:也叫M期促进因子,由细胞周期蛋白和细胞周期蛋白依赖性激酶组成,随着细胞周期的变化而产生浓度的变化或磷酸化去磷酸化现象。5.细胞周期关卡:监控细胞周期的发生发展过程是否严格按程序进行的控制点叫关卡,由G1关卡、G2关卡、M关卡S、关卡组成。7.灯刷染色体:卵母细胞进行减数第一次分裂时停留在双线期的染色体。常见于鱼类、两栖类、爬行类双线期卵母细胞,双线期是卵黄合成的旺盛期。染色体主轴两侧有侧环,状如灯刷,其侧环是转录活跃的区域。9.程序性细胞死亡(细胞凋亡):是指为维持内环境稳定,由基因控制的细胞自主的有序性的死亡。它涉及一系列基因的激活、表达以及调控等的作用,因而是具有生理性和选择性的。11.程序性细胞死亡与细胞坏死的比较比较内容程序性细胞死亡细胞坏死质膜不破裂发生破裂细胞核固缩,DNA片段化弥漫性降解 细胞质由质膜包围形成凋亡小体溢出,细胞破裂成碎片细胞质生化改变溶酶体的酶增多溶酶体解体蛋白质合成有无基因活动由基因调控无基因调控自吞噬常见缺少线粒体自身吞噬肿胀诱发因素生理性信号强烈刺激信号对个体影响生长、发育、生存所必需引起炎症练习题-12问答题1、简述微丝的生物学功能1)构成细胞的支架2)参与细胞的运动3)参与细胞分裂4)参与肌肉收缩5)细胞内运输作用2、简述微管的生物学功能1)构成细胞的网状支架维持细胞形态2)参与中心粒、纤毛和鞭毛的形成3)参与细胞内的物质运输4)维持细胞内细胞器的定位与分布5)微管参与染色体的运动,调节细胞分裂6)参与细胞内信号转导3、简述中间纤维的生物学功能1)为细胞提供机械强度支持2)参与细胞连接3)维持细胞核膜稳定练习题-131、细菌启动子的-10区和-35区约相距2圈双螺旋。如果将-35区序列移至-29区的位置,那么这将对基因的转录带来什么影响?为什么?将-35区序列移至-29的位置等于是让-10区与-35区之间少了6bp,几乎缺失了半圈双螺旋,这完全改变了-10和-35之间的相对位置,等于将他们置于DNA双螺旋相反的两侧,结果会大大降低了σ因子与启动子的亲和力,是转录的效率急剧下降。2、细菌启动子-10区得一致序列是TATAAT。如果有两个基因,基因A和基因B,它们在-35区得序列完全一致,但-10区得序列不同,分别是TATAAT和ACTGCT。基因A和基因B的转录之物比是大于1.0.还是小于1.0?为什么?大于1.0.基因A的-10区与一致序列非常接近,更容易被RNA聚合酶全酶识别和结合,而基因B的-10区与一致序列大相径庭,而且有更多的GC碱基对,因此不仅让RNA聚合酶全酶难以识别和结合,而且也让开放的转录起始复合物难以形成,结果必然是基因A的转录效率大大高于基因B。5、一种真核RNA病毒能从一个基因组编码出一长一短的两种mRNA,翻译出来的两条多肽链在N端具有相同的氨基酸序列,但在C端就不同,而且两条多肽链中较长的由较短的mRNA所编码,解释原因。这是因为同一个mRNA前体发生于选择性选择性剪接,具有两条不同的剪接途径,产生长短不同的两种转录物。在长的转录物中,一个含有终止密码子的内含子没有被切除,仍然保留在成熟的mRNA之中。当这种mRNA作为模板翻译的时候,会提前遇到终止密码子,因而翻译的终产物的肽段要短;而在短的转录物中,含有终止密码子的内含子已被切除。因此当它作为模板翻译的时候,不会提前结束,所翻译出来的产物反而比长转录得到的翻译产物要长。6、用寡dT作为引物进行RT-PCR,将一种真核细胞的某种mRNA扩增为双链DNA,再将其克隆到含有正常启动子的质粒载体的下游。但是,当将上面的质粒转染于表达原来mRNA的同一类型的细胞时发现,得到的mRNA比原来进行RT-PCR的mRNA要长得多,解释现象。真核细胞mRNA转录的终止子偶联于3′端的加尾反应,而这种反应通常需要AAUAAA序列以及其下游的富含GU的序列。一个典型的细胞核mRNA在3′端的后加工先是剪接反应,然后才是加尾反应。但是剪接点一般位于AAUAAA序列和富含GU序列之间,因此真核细胞中最后得到的成熟mRNA无富含GU的序列。如果将它们进行RT-PCR扩增,得到的是双链DNA含有AATAAA,但却缺少富含GU的序列。所以在原来的AAUAAA后面无剪接点,这时转录会继续下去,直到遇到更下游的位置作为剪接点,才进行剪接反应和加尾反应,最后得到的成熟mRNA的序列要比野生型的长。9、比较siRNA和miRNA1)miRNA与siRNA的相同之处:①合成都是由双链的RNA或RNA前体形成的;②二者的长度都约在22nt左右;③.二者都依赖Dicer酶的加工,是Dicer的产物,所以具有Dicer产物的特点;④二者都是RISC组分,都与RISC结合;⑤通过碱基配对确定作用的对象,降解与它们互补的mRNA或阻断目标mRNA的翻译。2)miRNA与siRNA的不同点:①miRNA是内源的,是生物体的固有因素;而siRNA是人工体外合成的,通过转染进入人体内,是RNA干涉的中间产物;②结构上,miRNA是单链RNA,而siRNA是双链RNA;③Dicer酶对二者的加工过程不同,miRNA是不对称加工,miRNA仅是剪切pre-miRNA的一个侧臂,其他部分降解,而siRNA 对称地来源于双链RNA的前体的两侧臂;④在作用位置上,miRNA主要作用于靶标基因3′-UTR区,而siRNA可作用于mRNA的任何部位;⑤在作用方式上,miRNA可抑制靶标基因的翻译,在转录水平后和翻译水平起作用,而siRNA只能导致靶标基因的降解,即为转录水平后调控;⑥miRNA主要在发育过程中起作用,调节内源基因表达,而siRNA不参与生物生长,是RNAi的产物。10、干扰素并不含有内含子,用PCR技术从人的基因组分离到完整的干扰素基因,将此基因克隆岛载体上,用T7RNA聚合酶在体外转录出干扰素的mRNA。然而,当将该mRNA显微注射到非洲爪蟾卵母细胞后只产生很少的干扰素。相反,将等量的从细胞中制备的干扰素的mRNA注射到相同的非洲爪蟾卵母细胞后则产生大量的干扰素,为什么?使用T7RNA聚合酶在体外转录出来的干扰素mRNA既没有“帽子”结构,也没有多腺苷酸“尾巴”,这样的mRNA进入卵母细胞之后,极不稳定,很容易发生降解。少数没有降解的干扰素mRNA因为没有帽子和尾巴结构,难以被核糖体识别启动翻译,故最后能被翻译的干扰素肯定非常少,而从细胞中制备出来的mRNA不存在以上问题,自然可以在卵母细胞中得到正常的翻译。13大肠杆菌RNA聚合酶的组成分析:大肠杆菌的RNA聚合酶有五个亚基组成,含有α,β,β’,δ等4种不同的多肽,其中α为两个分子,所以全酶的组成是α2ββ’δ。α亚基与RNA聚合酶的四聚体核心(α2ββ’)的形成有关;β亚基含有核苷三磷酸的结合位点;β’亚基含有与DNA模板的结合位点;而Sigma因子只与RNA转录的起始有关,与链的延伸没有关系,一旦转录开始,δ因子就被释放,而链的延伸则由四聚体核心酶催化。所以,δ因子的作用就是识别转录的起始位置,并使RNA聚合酶结合在启动子部位。14.画出色氨酸操纵子的结构图并说明其双调控机理(1)色氨酸操纵子的结构:合成色氨酸所需要酶类的基因E、D、C、B、A等头尾相接串连排列组成结构基因群,受其上游的启动子Ptrp和操纵子o的调控,调控基因trpR的位置远离P-o-结构基因群,在其自身的启动子作用下,以组成性方式低水平表达调控蛋白R。(2)色氨酸的负调控:R并没有与o结合的活性,当环境能提供足够浓度的色氨酸时,R与色氨酸结合后构象变化而活化,就能够与o特异性亲和结合,阻遏结构基因的转录。因此这是属于一种负性调控的、可阻遏的操纵子,即这操纵子通常是开放转录的,有效应物(色氨酸为阻遏剂)作用时则阻遏关闭转录。细菌不少生物合成系统的操纵子都属于这种类型,其调控可使细菌处在生存繁殖最经济最节省的状态。 色氨酸操纵子负责调控色氨酸的生物合成,它的激活与否完全根据培养基中有无色氨酸而定。当培养基中有足够的色氨酸时,该操纵子自动关闭;缺乏色氨酸时,操纵子被打开。色氨酸在这里不是起诱导作用而是阻遏,因而被称作辅阻遏分子,意指能帮助阻遏蛋白发生作用。色氨酸操纵子恰和乳糖操纵子相反。(3)弱化子及其作用:在色氨酸操纵子Ptrp-o与第一个结构基因trpE之间有162bp的一段先导序列L。前导区的碱基序列包括4个分别以1、2、3和4表示的片段,能以两种不同的方式进行碱基配对,1-2和3-4配对,或2-3配对,3-4配对区正好位于终止密码子的识别区。前导序列有相邻的两个色氨酸密码子,当培养基中Trp浓度很低时,负载有Trp的tR2NATrp也就少,这样翻译通过两个相邻色氨酸密码子的速度就会很慢,当4区被转录完成时,核糖体滞留1区,这时的前导区结构是2-3配对,不形成3-4配对的终止结构,所以转录可继续进行。反之,核糖体可顺利通过两个相邻的色氨酸密码子,在4区被转录之前,核糖体就到达2区,这样使2-3不能配对,3-4区可以配对形成终止子结构,转录停止。15.画出乳糖操纵子结构图,并解释其对基因表达调控的作用1)乳糖操纵子结构图(略)2)说明乳糖操纵子的双调控机理(1)乳糖操纵子的结构:大肠杆菌的乳糖操纵子含Z、Y及A三个结构基因,分别编码β-半乳糖苷酶、透酶、乙酰基转移酶,此外还有一个操纵序列O、一个启动序列P及一个调节基因Ⅰ。Ⅰ基因编码一种阻遏蛋白,后者与O序列结合,使操纵子受阻遏而处于转录失活状态。在启动序列P上游还有一个分解(代谢)物基因激活蛋白CAP结合位点,由P序列、O序列和CAP结合位点共同构成LAC操纵子的调控区,三个酶的编码基因即由同一调控区调节,实现基因产物的协调表达。(2)阻遏蛋白的负性调节:在没有乳糖存在时,乳糖操纵子处于阻遏状态。此时,Ⅰ基因列在P启动序列操纵下表达的乳糖阻遏蛋白与O序列结合,故阻断转录启动。阻遏蛋白的阻遏作用并非绝对,偶有阻遏蛋白与O序列解聚。因此,每个细胞中可能会有寥寥数分子β半乳糖苷酶、透酶生成。当有乳糖存在时,乳糖操纵子即可被诱导。真正的诱导剂并非乳糖本身。乳糖经透酶催化、转运进入细胞,再经原先存在于细胞中的少数β-半乳糖苷酶催化,转变为别乳糖。后者作为一种诱导剂分子结合阻遏蛋白,使蛋白构型变化,导致阻遏蛋白与O序列解离、发生转录,使β-半乳糖苷酶分子增加1000倍。(3)CAP的正性调节:分解代谢物基因激活蛋白CAP是同二聚体,在其分子内有DNA结合区及cAMP结合位点。有葡萄糖存在时,细菌优先选择葡萄糖供应能量。葡萄糖通过降低cAMP浓度,阻碍cAMP与CAP结合而抑制乳糖操纵子转录,使细菌只能利用葡萄糖。在没有葡萄糖而只有乳糖的条件下,阻遏蛋白与O序列解聚,CAP结合cAMP后与乳糖操纵子的CAP位点,激活转录,使得细菌利用乳糖作为能量来源。当没有葡萄糖及cAMP浓度较高时,cAMP与CAP结合,这时CAP结合在乳糖启动序列附近的CAP位点,使DNA发生开放性结构变化,提高RNA聚合酶 转录活性,使之提高50倍;当葡萄糖存在时,cAMP浓度降低,cAMP与CAP结合受阻,因此乳糖操纵子表达下降。由此可见,对乳糖操纵子来说CAP是正性调节因素,乳糖阻遏蛋白是负性调节因素。两种调节机制根据存在的碳源性质及水平协调调节乳糖操纵子的表达。17.叙述NO信号传递对血压的调节作用机制:血管神经末梢释放乙酰胆碱作用于血管内皮细胞,被激活的血管内皮细胞的钙离子通道被激活打开,钙离子流入内皮细胞中,激活了一氧化氮合成酶。该酶利用精氨酸产生并释放NO。在内皮细胞生成的NO通过扩散进入临近平滑肌细胞,激活了鸟苷环化酶,生成cGMP第二信使,激活了PKG信号传递途径,降低了平滑肌细胞中钙离子浓度,导致血管平滑肌松弛舒张,血压降低。